INTERACCIÓN PARÁSITO-HOSPEDADOR ENTRE NEMATODOS
GASTROINTESTINALES Y RAZAS OVINAS CANARIAS.
PAPEL DE LOS LINFOCITOS T  Y LOS EOSINÓFILOS
Julia Na i idad He nández Vega
Tesis Doc o al
A ucas, Diciemb e 2015

Anexo II
UNIVERSIDAD DE LAS PALMAS DE GRAN CANARIA
Depa amen o: Ins i u o Uni e si a io de Sanidad Animal y Segu idad
Alimen a ia.
P og ama de Doc o ado: “SANIDAD ANIMAL”.
Tí ulo de la Tesis
“INTERACCIÓN PARÁSITO-HOSPEDADOR ENTRE NEMATODOS
GASTROINTESTINALES Y RAZAS OVINAS CANARIAS. PAPEL DE
LOS LINFOCITOS T  Y LOS EOSINÓFILOS”.
Tesis Doc o al p esen ada po Doña Julia Na i idad He nández Vega.
Di igida po el D . D. Jo ge F ancisco González Pé ez y codi igida po el
D . D. José Manuel Molina Caballe o y el D . D. F ancisco Rod íguez
Guisado.
El Di ec o , El Codi ec o , El Codi ec o , El Doc o ando,
Jo ge F. González Pé ez. José M. Molina Caballe o. F ancisco Rod íguez Guisado. Julia N. He nández Vega.
Las Palmas de G an Cana ia, a 14 de oc ub e de 2015.

Índice
Índice
I
1. INTRODUCCIÓN
3
2. OBJETIVOS
7
3. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
13
3.1 EVOLUCIÓN DE LA POBLACIÓN MUNDIAL Y NUEVOS RETOS
ALIMENTARIOS. GANADERÍA SOSTENIBLE
13
3.2 IMPORTANCIA DE LA PRODUCCIÓN GANADERA
15
3.2.1 PRODUCCIÓN OVINA EN EL MUNDO
15
3.2.2 PRODUCCIÓN OVINA EN EUROPA
17
3.2.3 PRODUCCIÓN OVINA EN ESPAÑA
19
3.2.4 PRODUCCIÓN OVINA EN CANARIAS
21
3.3 INCREMENTO DE LA PRODUCCIÓN: IMPORTANCIA DEL CONTROL
PARASITARIO
24
3.3.1 PRINCIPALES NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN PEQUEÑOS
RUMIANTES DE LA ISLA DE GRAN CANARIA: HAEMONCHUS CONTORTUS,
TELADORSAGIA CIRCUMCINCTA Y TRICHOSTRONGYLUS SPP.
26
3.3.2 MÉTODOS DE CONTROL DE LOS PARÁSITOS
30
3.3.2.1 T a amien o selec i o
32
3.3.2.2 Con ol no químico
36
3.3.2.2.1 Manejo de los pas os
36
3.3.2.2.2 Con ol biológico
37
3.3.2.2.3 Con ol a a és de la alimen ación
38
3.3.2.2.4 Vacunación
39
3.3.2.2.5 Selección gené ica
42
3.4 RESPUESTA INMUNE A NEMATODOS GASTROINTESTINALES:
RESISTENCIA A HAEMONCHUS CONTORTUS
47
3.4.1. RESPUESTA INMUNE FRENTE A ESTADIO L3
54
3.4.2. RESPUESTA INMUNE FRENTE A ESTADIO L4
55
3.4.3. RESPUESTA INMUNE FRENTE A ESTADIO ADULTO
56
4. RESUMEN
61
5. SUMMARY
65
6. MATERIAL Y MÉTODOS
69
6.1 CEPA PARASITARIA
69
6.2 ANÁLISIS SANGUÍNEOS
69
6.3 ANÁLISIS COPROLÓGICOS
70
6.4 MUESTRAS TRAS EL SACRIFICIO DE LOS ANIMALES
70
6.4.1 MUESTRAS DE PARED DE ABOMASO
70
6.4.2 CONTENIDO ABOMASAL
70
6.4.3 MUCUS
70
6.4.4 MUCOSA
71
6.5 OTRAS TÉCNICAS PARASITOLÓGICAS
71
6.6 ANTÍGENOS DE HAEMONCHUS CONTORTUS
71
6.7 ANÁLISIS DE INMUNOABSORCIÓN LIGADO A ENZIMAS (E.L.I.S.A.)
72
6.8 HISTOLOGÍA
73
6.9 INMUNOHISTOQUÍMICA
74

Índice
II
6.10 ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA - WESTERN BLOTTING
75
6.11 PROCESADO DE IMAGEN
77
6.12 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
78
7. CAPÍTULOS
CAPÍTULO I. DIFERENCIAS EN SUSCEPTIBILIDAD EN INFECCIONES
NATURALES POR NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN
OVINOS CANARIOS DE PELO Y CANARIOS
81
1. RESUMEN
81
2. INTRODUCCIÓN
82
3. MATERIAL Y MÉTODOS
84
3.1 LOCALIZACIÓN DEL ESTUDIO Y ANIMALES
84
3.2 DATOS CLIMATOLÓGICOS
86
3.3 PROCESADO DE LAS MUESTRAS DE HECES
88
3.4 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
88
4. RESULTADOS
89
4.1 GRANJA 1
89
4.1.1 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas den o de es ación
y de año
89
4.1.2 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas en e años y
es aciones
90
4.1.3 Di e encias en los ecuen os de hue os den o de azas
90
4.1.4 Iden i icación La a ia
90
4.2 GRANJA 2
91
4.2.1 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas den o de es ación
91
4.2.2 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas y es aciones
92
4.2.3 Di e encias en los ecuen os de hue os den o de azas
92
4.2.4 Iden i icación La a ia
92
5. DISCUSIÓN
94
CAPÍTULO II. EL OVINO RESISTENTE CANARIO DE PELO
INFECTADO EXPERIMENTALMENTE CON HAEMONCHUS
CONTORTUS CONTROLA ANTES LA CARGA PARASITARIA QUE SU
LONGITUD
103
1. RESUMEN
103
2. INTRODUCCIÓN
104
3. MATERIAL Y MÉTODOS
105
3.1 ANIMALES Y DISEÑO EXPERIMENTAL
105
3.2 MUESTRAS SANGUÍNEAS
105
3.3 ANÁLISIS COPROLÓGICOS
105
3.4 RECOGIDA DE MUESTRAS TRAS EL SACRIFICIO
105
3.5 ANÁLISIS PARASITOLÓGICOS
105
3.6 CULTIVO DE CÉLULAS SECRETORAS DE ANTICUERPOS (ASC)
106
3.7 ANÁLISIS DE INMUNOABSORCIÓN LIGADO A ENZIMAS (E.L.I.S.A.)
106
3.8 ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA
107
3.9 PROCESADO DE IMAGEN
107
3.10 HISTOLOGÍA E INMUNOHISTOQUÍMICA
107
3.11 ENSAYO DE MIGRACIÓN LARVARIA (LMIA)
107
3.12 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
108
Índice
III
4. RESULTADOS
110
4.1 PARASITOLOGÍA
110
4.2 HEMATOLOGÍA
110
4.3 INMUNOGLOBULINAS (IgAm e IgGm) EN MUCUS
112
4.4 SOBRENADANTES DE CULTIVOS DE CÉLULAS SECRETORAS DE ANTICUERPOS
(ASC)
114
4.5 RESPUESTA INMUNE CELULAR
119
4.6 ENSAYO DE MIGRACIÓN LARVARIA (LMIA)
121
5. DISCUSIÓN
122
CAPÍTULO III. REDUCCIÓN IN VIVO DE LINFOCITOS T EN
OVINOS DE LA RAZA RESISTENTE CANARIA DE PELO
INOCULADOS EXPERIMENTALMENTE CON HAEMONCHUS
CONTORTUS
133
1. RESUMEN
133
2. INTRODUCCIÓN
134
3. MATERIAL Y MÉTODOS
136
3.1 ANIMALES Y DISEÑO EXPERIMENTAL
136
3.2 ANTICUERPO CC15 ANTI-WC1
136
3.3 MUESTRAS SANGUÍNEAS
136
3.4 ANÁLISIS COPROLÓGICOS
137
3.5 RECOGIDA DE MUESTRAS TRAS EL SACRIFICIO
137
3.6 ANÁLISIS PARASITOLÓGICOS
137
3.7 CITOMETRÍA
137
3.8 PROCESADO DE LOS RESULTADOS DE LA CITOMETRÍA
138
3.9 HISTOLOGÍA E INMUNOHISTOQUÍMICA
140
3.10 ANÁLISIS DE INMUNOABSORCIÓN LIGADO A ENZIMAS (E.L.I.S.A.)
140
3.11 ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA
140
3.12 PROCESADO DE IMAGEN
141
3.13 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
141
4. RESULTADOS
142
4.1 CITOMETRÍA
142
4.2 PARASITOLOGÍA
143
4.3 HEMATOLOGÍA
146
4.4 RESPUESTA INMUNE CELULAR LOCAL
148
4.5 RESPUESTA INMUNE HUMORAL
151
4.6 REGRESIÓN MÚLTIPLE DE LA VARIABLE LONGITUD EN FUNCIÓN DE LA
VARIABLES EOSINÓFILOS DE ABOMASO (EOS AB.) E IgA DE MUCUS ESPECÍFICA
DE ANTÍGENO SOMÁTICO ADULTO (IgAmSA)
153
5. DISCUSIÓN
154
5.1 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DEL ANTICUERPO MONOCLONAL ANTI-
WC1 EN LAS POBLACIONES SISTÉMICAS Y LOCALES DE LINFOCITOS T/WC1+
154
5.2 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DEL ANTICUERPO MONOCLONAL ANTI-
WC1 EN LOS DATOS PARASITOLÓGICOS
155
5.3 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DEL ANTICUERPO MONOCLONAL ANTI-
WC1 EN LOS DATOS HEMATOLÓGICOS
156
5.4 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DEL ANTICUERPO MONOCLONAL ANTI-
WC1 EN LA RESPUESTA INMUNE
157
Índice
IV
CAPÍTULO IV. EFECTO DE LA REDUCCIÓN IN VIVO DE LA
INTERLEUQUINA 5 SOBRE EL PAPEL DE LOS EOSINÓFILOS EN EL
CONTROL DE LA FECUNDIDAD DE HAEMONCHUS CONTORTUS
EN EL OVINO CANARIO DE PELO
163
1. RESUMEN
163
2. INTRODUCCIÓN
165
3. MATERIAL Y MÉTODOS
167
3.1 ANIMALES Y DISEÑO EXPERIMENTAL
167
3.2 IL-5 RECOMBINANTE OVINA
167
3.3 ENSAYOS EN ANIMALES
167
3.4 MUESTRAS SANGUÍNEAS
168
3.5 ANÁLISIS COPROLÓGICOS
168
3.6 RECOGIDA DE MUESTRAS TRAS EL SACRIFICIO
168
3.7 ANÁLISIS PARASITOLÓGICOS
168
3.8 ANÁLISIS DE INMUNOABSORCIÓN LIGADO A ENZIMAS (E.L.I.S.A.)
168
3.9 ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA
169
3.10 HISTOLOGÍA
169
3.11 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
169
4. RESULTADOS
171
4.1 INMUNOGLOBINA G ANTI-IL5 O
171
4.2 PARASITOLOGÍA
172
4.3 HEMATOLOGÍA
173
4.4 RESPUESTA INMUNE HUMORAL FRENTE ANTÍGENOS DEL PARÁSITO
176
4.4.1 Inmunoglobulinas del mucus
176
4.4.2 Elec oinmuno ans e encia
177
4.5 RESPUESTA INMUNE CELULAR
178
5. DISCUSIÓN
179
5.1 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN SUBCUTÁNEA DE LA RIL-5OV EN LA
PRODUCCIÓN DE INMUNOGLOBULINAS ESPECÍFICAS
179
5.2 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN SUBCUTÁNEA DE LA RIL-5OV EN RELACIÓN
CON LOS DATOS PARASITOLÓGICOS
179
5.3 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN SUBCUTÁNEA DE LA RIL-5OV EN LOS
DATOS HEMATOLÓGICOS
181
5.4 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN SUBCUTÁNEA DE LA RIL-5OV EN LA
RESPUESTA INMUNE HUMORAL Y CELULAR
183
8. DISCUSIÓN GENERAL. MECANISMO NOVEDOSO DE
RESISTENCIA FRENTE A HAEMONCHUS CONTORTUS
189
9. CONCLUSIONES
197
10. BIBLIOGRAFÍA
201
11. AGRADECIMIENTOS
241
In oducción
Obje i os
8
 Compa a asociaciones en ambas azas en e las dis in as a iables
pa asi ológicas, hema ológicas e inmunológicas.
- Te ce o. Reduci la población de lin oci os T/WC1+, adminis ando el an icue po CC15
po ía in a enosa y alo a su e ec o en in ecciones expe imen ales con 10.000 L3 de
Haemonchus con o us en o inos Cana io de Pelo. En pa icula si a ec a la longi ud y
ecundidad de los pa ási os.
o Obje i os especí icos:
 Reduci la población de lin oci os T/WC1+ una ez que se han
es ablecido las la as pa a e i ica su papel en el con ol de la
ecundidad de es e pa ási o en e apas a anzadas de la in ección.
 Compa a el e ec o de la adminis ación del an icue po CC15 en la
esis encia alo ando las a iables pa asi ológicas: ca ga pa asi a ia,
longi ud de los e mes, hue os en ú e o y en heces; y en la esiliencia
alo ando el hema oc i o y las p o eínas plasmá icas espec o al g upo
con ol.
 Compa a el e ec o de la adminis ación del an icue po CC15 en la
espues a inmune desa ollada a a és de:
 Recuen os de di e en es poblaciones celula es implicadas en la
espues a, an o en sang e pe i é ica como en la mucosa del
abomaso. En conc e o se analiza an los eosinó ilos, mas oci os,
leucoci os globula es, CD4+, CD8+, T+, T/WC1+, CD45RA+ y
MHC-II+ en la mucosa del abomaso y CD2+, CD4+, CD8+, T+,
T/WC1+, CD5+, CD45RA+ y plasmoci os IgG+ en sang e
pe i é ica.
 Exp esión de galec inas 11 y galec ina 14.
 IgA de mucus e IgG en sue o especí icas de H. con o us, y del
pa ón de econocimien o p o eico del an ígeno somá ico adul o
de H. con o us de la IgA del mucus.
 Compa a asociaciones en e las dis in as a iables pa asi ológicas en e
si y en e es as y las a iables hema ológicas e inmunológicas.
- Cua o. Modula el papel de los eosinó ilos, a a és de la educción de los ni eles de
In e leuquina-5 (IL-5), as la adminis ación subcu ánea de IL-5 ecombinan e o ina

Obje i os
9
( IL-5o )/QuilA y es udia su e ec o en in ecciones expe imen ales con 10.000 L3 de
Haemonchus con o us en o inos Cana io de Pelo.
 Gene a inmunoglobulinas especí icas en e a la In e leuquina 5 as la
inmunización con IL-5o que bloqueen su ac i idad biológica.
 Compa a el e ec o de la adminis ación de la IL-5o subcu ánea en la
esis encia, alo ando las a iables pa asi ológicas: ca ga pa asi a ia,
longi ud de e mes, hue os en ú e o y heces; y de la esiliencia alo ando
la e olución del hema oc i o y de las p o eínas plasmá icas.
 Compa a el e ec o de la adminis ación de la IL-5o subcu ánea en la
espues a inmune desa ollada a a és de:
 E olución de los lin oci os, neu ó ilos, eosinó ilos y leucoci os
en sang e pe i é ica.
 Recuen os de di e en es poblaciones celula es implicadas en la
mucosa del abomaso en la espues a, ales como eosinó ilos,
mas oci os y leucoci os globula es.
 IgA del mucus especí ica de an ígeno somá ico de es adio adul o
y de L3 de H. con o us. Pa ón de econocimien o del an ígeno
somá ico adul o de la IgA del mucus.
 Compa a las asociaciones en e las dis in as a iables pa asi ológicas.
Re isión
Bibliog á ica
Re isión Bibliog á ica
13
3. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
3.1 EVOLUCIÓN DE LA POBLACIÓN MUNDIAL Y NUEVOS RETOS
ALIMENTARIOS. GANADERÍA SOSTENIBLE
En el p ime semes e de 2015, la población mundial alcanzó los 7.349 millones de pe sonas
y se espe a que alcance los 9.700 millones en 2050 (Naciones Unidas, 2015), lo que supone
inc emen a la p oducción de alimen os de 8.400 millones de oneladas anuales a p ác icamen e
13.500 millones de oneladas pa a el año 2050 y pode sa is ace , de es e modo, las necesidades
que demanda á la población (FAO, 2015). Es e c ecimien o poblacional, mayo i a iamen e de
países en desa ollo de Á ica y Asia (FAO 1; Naciones Unidas, 2015), a apa ejado de un
c ecimien o de los ing esos y cambios en los hábi os alimen icios, aducidos en una mayo
demanda de ca ne, hue os y leche (FAO, 2013). Es e desa ollo demog á ico y económico,
supone que se gene en p esiones po los ecu sos na u ales exis en es, ag a ado po la pob eza,
consumos insos enibles, el cambio climá ico, la escasez de agua, pé dida de la biodi e sidad, la
de o es ación o la deg adación de los suelos (FAO, 2015). En es e sen ido, una cua a pa e de
la supe icie e es e se u iliza pa a el pas o eo y un e cio de la ie a cul i able se des ina a
alimen o pa a el ganado, es o supone que se des inen más ecu sos a la ag icul u a animal que
a cualquie o a ac i idad humana (FAO, 2013), ag a ando la compe i i idad po los ecu sos
(FAO, 2015).
Dada la escasez de ie a ag ícola, y pa a e i a más de o es ación, el 80% de las p oducciones
que se eque i án en 2050 end ían que p ocede de las ie as des inadas a la p oducción
ac ualmen e (FAO, 2015). Con el in de ga an iza una p oducción in ensi a sos enible que
ga an ice ese abas ecimien o de alimen o pa iendo de ecu sos na u ales limi ados, la
O ganización de las Naciones Unidas pa a la Alimen ación y la Ag icul u a (F.A.O.) p opone 5
p incipios necesa ios que an encaminados a mejo a la p oduc i idad e incluso a busca
sine gias en e sec o es, a a és del uso e icaz de los ecu sos (FAO 2) educiendo el impac o
nega i o de es a ac i idad pa a p o ege , conse a y mejo a los ecu sos na u ales (FAO 3),
omen a una ag icul u a y ganade ía de subsis encia “digna” en zonas u ales mejo ando la
equidad, en cuan o al acceso a ecu sos y conocimien os, y el bienes a (FAO 4); así como en
impulsa polí icas, ecnologías y p ác icas que a o ezcan la es abilidad de esa p oducción
ag opecua ia an e si uaciones sociales y ambien ales ad e sas (FAO 5); pa a lo que se á
necesa io un en o no polí ico-ins i ucional e icaz que a o ezcan un equilib io en e inicia i as
públicas y p i adas (FAO 6).

Re isión Bibliog á ica
14
El sec o ganade o, además de consumi ecu sos (agua, suelo, nu ien es), gene a
con aminación y gases esponsables del e ec o in e nade o (FAO, 2015; FAO 7), po lo que es
necesa io lle a a cabo esas p ác icas que pe mi an una p oducción e icaz más sos enible. En
consecuencia, los p incipios de la F.A.O. sugie en a o ece la conse ación de la biodi e sidad
y el es ablecimien o de una alimen ación e icaz, equilib ada y p ecisa; p o ege los ecu sos
median e la ges ión de su uso y de los esiduos gene ados, y con ola de mane a in eg ada la
salud de los animales (FAO, 2015). La Sanidad Animal es un pila cla e pa a e i a , po un lado,
la p opagación de en e medades en e animales y en e es os y los homb es como consecuencia
de la “masi icación” (One Wo ld, One Heal h) y, po o o, pa a e i a me mas p oduc i as y
económicas que es as p oducen en el sec o (FAO, 2013). Todo es o se aduce en inc emen a
la p oduc i idad de cada animal más que inc emen a el núme o de animales.
La selección du an e años de aquellos animales al amen e p oduc i os se ha hecho en
de imen o de aquellas especies locales al amen e adap adas al medio, seleccionados
na u almen e po su esis encia a en e medades y pa ási os (FAO 8). Es as azas son de g an
impo ancia dada la si uación de p oducción ac ual dónde se busca la p oducción sos enible y
e icien e, y dónde p ima la adap ación a la cambian e si uación climá ica. Según la F.A.O., de las
más de 8.200 azas no i icadas po los países miemb os, más de 2.500 se encuen an en pelig o
de ex inción o ya se han ex inguido (FAO 8) ya sea po la selección de azas más p oduc i as, la
p esión demog á ica y pé dida de hábi a s, como po el cambio climá ico (FAO 9). Es a me ma
de azas supone, po un lado la pé dida de ecu sos económicos –subsis encia- pa a las
poblaciones de zonas des a o ecidas y, po o o lado, la pé dida de ecu sos gené icos de alo
incalculable (FAO, 2010), no solo a la ho a de p oduci mejo as gené icas en los animales, sino
ambién a la ho a de es udia dianas a macológicas a en e medades, que apo a ían mejo as
en sanidad animal y p oduc i idad animal (FAO, 2010; Pied a i a e al., 2010).
En 2013, el núme o de o inos se es imaba en 1.163 millones de cabezas (FAOSTAT). En el año
2006 es aban desc i as 1.409 azas, de las que se habían ex inguido 180 y se encon aban en
pelig o de ex inción 179 azas (FAO, 2010). En el año 2014 había en España 15,4 millones de
o inos (MAGRAMA, 2014a). Según el ca álogo de azas de ganado (RD 2129/2008, de 26 de
diciemb e, po el que se es ablece el P og ama nacional de conse ación, mejo a y omen o de
las azas ganade as y la O den AAA/251/2012, de 9 de eb e o, po el que se modi ica anexo I
del Real Dec e o an e io ), en España hay 43 azas o inas au óc onas, de las que 33 es án
conside adas en pelig o de ex inción, po lo que dada la impo ancia de p ese a y/o man ene
la di e sidad gené ica, exis en p og amas de conse ación - egulados po el mismo RD- de es as
Re isión Bibliog á ica
15
azas en pelig o en e las que se encuen an an o el O ino Cana io (MAGRAMA 1) y el O ino
Cana io de Pelo (MAGRAMA 2).
3.2 IMPORTANCIA DE LA PRODUCCIÓN GANADERA.
El sec o ganade o ep esen a el 40% del P.I.B. ag a io y sus p oduc os suminis an un e cio
de las p o eínas consumidas mundialmen e (FAO, 2009). En 2050 se calcula que se á necesa io
p oduci 465 millones de oneladas de ca ne y 1.043 millones de oneladas de leche, lo que
supone dobla las p oducciones de 1999 (FAO, 2009). Debido a la mayo demanda de p oduc os
de o igen animal po es e c ecimien o demog á ico, el sec o ganade o es á su iendo un cambio
no solo po la endencia a in ensi ica sus sis emas de explo ación y a los cambios geog á icos
que su en las explo aciones a medida que se desa olla la egión, sino ambién po la endencia
cambian e en la p oducción, seleccionando azas más p oduc i as, dónde la ex ensión del sec o
es mayo en sis emas in ensi os de a es y po cinos que en umian es (FAO, 2009; FAO 10).
La ganade ía de pequeños umian es, con mayo dis ibución en países en desa ollo (FAO,
2009), apo a alimen o, lana y abono, suponiendo en muchas ocasiones una economía de
subsis encia u al, dónde es ecuen e la c ía de azas locales mejo adap adas al medio (FAO 8)
capaces de gene a bene icios con un mínimo de in e sión al ap o echa g an a iedad de
ege ales (FAO, 2010). Los o inos y cap inos se pueden c ia en cualquie ambien e, sin
emba go, las cab as suelen es a más p esen es en zonas secas y ab up as, mien as que las
o ejas en zonas de clima húmedo y emplado (FAO, 2013).
Dada la impo ancia de ob ene p oduc os de o igen animal pa a sa is ace la demanda
nu i i a de la población, a con inuación, se ha á un esumen de las p oducciones o inas de
ca ne, leche y queso a ni el mundial, eu opeo y español. Cabe esal a la impo ancia de es a
especie, pues el consumo de su ca ne iene pocas es icciones en las p incipales eligiones del
mundo compa ada con o os ipos de ca nes, como po ejemplo el ce do (Con e as, 2007).
3.2.1 PRODUCCIÓN OVINA EN EL MUNDO
A ni el mundial, en el año 2013, el núme o de cabezas o inas se si úa al ededo de 1.163
millones (FAOSTAT) (Figu a 3.1a), dónde Á ica y Asia, ienen el mayo núme o de o ejas, siendo
China, Aus alia e India los países con mayo censo o ino (FAOSTAT). En los úl imos 20 años la
cabaña o ina sigue una endencia posi i a a ni el mundial, obse ándose un inc emen o de más
de 44 millones de animales con espec o a los 1.118 millones que había en el año 1993
(FAOSTAT), con un pa icula inc emen o en Á ica y Asia (Figu a 3.1a y 3.1b).
Re isión Bibliog á ica
16
Figu a 3.1 Da os po cen uales del o al de o inos a ni el mundial que ep esen a cada con inen e en el
año 2013(a) y 1993 (b). Ci as ex aídas de FAOSTAT.
En cuan o a los p oduc os ob enidos del o ino a ni el mundial, en 2013 se p oduje on casi
8,6 millones de oneladas de ca ne, 10,1 millones de oneladas de leche esca de o ino y 0,6
millones de oneladas de queso de o ino (FAOSTAT), expe imen ándose un aumen o de las
p oducciones a ni el mundial desde 1993 has a 2013 con pa ón de c ecimien o simila al
obse ado en el núme o de cabezas de animales, siendo el inc emen o de la p oducción en
oneladas de ca ne (Figu a 3.2a), leche en e a esca (Figu a 3.2b) y queso (Figu a 3.2c) mayo
en Á ica y Asia. En Amé ica y Eu opa el núme o de cabezas descendió pe o se p oduje on más
oneladas de leche (Amé ica-Eu opa) y queso (Amé ica), lo que se aduce en una mejo a en la
p oducción de esos animales y una mayo endencia a la in ensi icación del sis ema de
explo ación (FAO, 2009).
28,25 %
7,42 %
44,01 %
11,17 %
9,15 %
2013
Á ica
Amé ica
Asia
Eu opa
Oceanía
18,08 %
9,80 %
37,12 %
18,15 % 16,85 %
1993
Re isión Bibliog á ica
17
Figu a 3.2 Toneladas de ca ne (a), leche en e a esca (b) y queso (c) o inos a ni el mundial de cada
con inen e en los años 1993 y 2013. Ci as ex aídas de FAOSTAT.
3.2.2 PRODUCCIÓN OVINA EN EUROPA
En el año 2013 habían al ededo de 130 millones de o inos (11,2% mundial), lo que supone
un descenso de 73 millones de cabezas con espec o a 1993, año en el que habían casi 203
millones (FAOSTAT). Eu opa del Es e es la zona que mayo núme o de cabezas pe dió du an e
esos 20 años, pasando de 77 millones en 1993 a poco más de 36 millones de cabezas en 2013
(Figu a 3.3a y 3.3b) (FAOSTAT). Los países con mayo censo en Eu opa son Tu quía (31,1
millones), Reino Unido (23 millones), España (15,4 millones), Rumanía (9,5 millones) y G ecia (9
millones) (EUROSTAT, ci as pa a el año 2014).
0
2000000
4000000
6000000
8000000
10000000
1993 2013
P oducción de Toneladas de Ca ne
Á ica Amé ica Asia Eu opa Oceanía
0
2000000
4000000
6000000
8000000
10000000
12000000
1993 2013
P oducción de Toneladas de Leche
0
200000
400000
600000
800000
1993 2013
P oducción de Toneladas de Queso
Re isión Bibliog á ica
24
pe mi en ob ene bene icios, sin emba go, pa a hace es e sec o más p oduc i o se ía
necesa io mayo o mación del p oduc o en cuan o a manejo y écnicas p oduc i a, así como
una mayo in e sión en las explo aciones (GobCan 4).
Po odo lo dicho an e io men e, es impo an e p ese a es as azas de g an alo gené ico,
capaces de p oduci en condiciones p eca ias, y de apo a un sus en o económico y un
p oduc o di e enciado y de calidad.
3.3 INCREMENTO DE LA PRODUCCIÓN: IMPORTANCIA DEL CONTROL
PARASITARIO
El inc emen o de las p oducciones de los animales no se consegui á solo suminis ando una
alimen ación adecuada, in i iendo en las ins alaciones o c iando especies al amen e
p oduc i as, pues esa in e sión no se e á e lejado en las p oducciones si los animales no gozan
de un buen es ado de salud, ya que las en e medades suponen me mas p oduc i as (FAO, 2013),
causando ap oximadamen e el 20% de pé didas (OIE), y pueden supone un cie e del come cio
ex e io .
Los pa ási os gas oin es inales ocasionan pé didas económicas y p oduc i as, pues se
ca ac e izan po p oduci en e medades acompañadas de pé dida de peso, al e ación de la
ap i ud ep oduc i a y el endimien o de lac ancia, e aso en el c ecimien o, anemia e incluso
mue e (Pied a i a e al., 2010) p edisponiendo al desa ollo de en e medades secunda ias.
Es as pé didas p oduc i as, p incipalmen e po daños isula es y pé didas de p o eínas
(Fi zpa ick, 2013), son di íciles de cuan i ica po el cu so c ónico o subclínico que
ecuen emen e p esen an, suponiendo pé didas es imadas de 369 millones de dóla es
aus alianos en Aus alia (Sacke e al., 2006), 81,8 millones de dóla es ame icanos anuales en
E iopia (Bi a e al., 2007), 84 millones de lib as anuales en G an B e aña (Nieuwho y Bishop,
2005), 103 millones, 26 millones y 46 millones de dóla es anuales en India, Kenia y Sudá ica
espec i amen e (Walle y Chand awa hani, 2005).
El con ol de los nema odos gas oin es inales se ha ealizado adicionalmen e median e
a amien os an ihelmín icos de amplio espec o, cuyo uso indisc iminado y/o e óneo ha
gene ado esis encias a casi odos los á macos come ciales en odos los con inen es (Van Wyk
e al., 1999; Ba ley e al., 2003; Če ňanská e al., 2006; Coles e al., 2006; Ál a ez-Sánchez e
al., 2006; Ceza e al., 2010; Saeed e al., 2010; Ma ínez-Vallada es e al., 2013a; Lyndal-
Mu phy e al., 2014; Liébano-He nández e al., 2015; Van den B om e al., 2015). Es a pé dida
de la p incipal de ensa con a los pa ási os, implica ene que descub i y/o es ablece nue as
medidas de con ol, como po ejemplo la selección de animales esis en es gené icamen e o

Re isión Bibliog á ica
25
acunas, pues p oduci nue os á macos es ex emadamen e cos oso y poco en able pa a las
a macéu icas (Walle , 1997a). El cambio climá ico, los cambios en sis emas de p oducción,
en e o as cosas, p o ocan mo imien os de animales, cambios de usos del suelo, e c. que a ec a
la dinámica de in ección (Fi zpa ick, 2013), ag a ando aún más es a si uación.
La selección o ina en países desa ollados se ha hecho en a o de ca ac e es p oduc i os,
que unido al al o uso de an ipa asi a ios, ha ido en de imen o de la esis encia de los o inos a
pa ási os; no obs an e en los países en desa ollo, debido p incipalmen e a las limi aciones de
ecu sos, se man ienen azas locales menos p oduc i as pe o de al a us icidad y adap ación al
medio, some idas a la selección na u al lo que les ha con e ido esis encia a especies pa ási as
(Pied a i a e al., 2010). Algunos ejemplos de es as azas esis en es son la Cana ia de Pelo
(González e al., 2008), Ba bados Black Belly (Aumon e al., 2003; G une e al., 2003; Te e e
e al., 2007a), Flo ida Na i e (Radhak ishnan e al., 1972; Ama an e e al., 1999), Gul Coas
Na i e (Mille e al., 1998), San a Inés (Ama an e e al., 2004), S -C oix (Gamble y Zajac, 1992;
Bu ke y Mille , 2004) o Red Massai (Mugambi e al., 1996; 1997). Es as azas son impo an es -
p ueba de ello es el in en o de conse a las y p ese a su a iabilidad gené ica po pa e de
ins i uciones locales, nacionales e in e nacionales- pues la iden i icación y en endimien o del
papel de esos genes ligados a la esis encia, así como el es udio del p opio mecanismo en sí,
pod ía pe mi i in oduci mejo as gené icas en azas más suscep ibles y apo a in o mación
sob e nue as dianas pa a á macos y acunas (Pied a i a e al., 2010).
El o ino Cana io de Pelo p esen a un peculia mecanismo de con ol de la ecundidad de
Haemonchus con o us, en el que pa ece que la diana es el es adio adul o (González e al., 2008)
y que es án implicados los eosinó ilos y los lin oci os T/WC1+ (González e al., 2011a). El
es udio en p o undidad de es e mecanismo de esis encia, nos apo a ía más in o mación y nos
ab i ía pue as pa a en ende la compleja espues a del sis ema inmune a los pa ási os
gas oin es inales.
De ca a a en ende los esul ados ob enidos en es a esis doc o al, a con inuación, se ha á
una e isión que ecoge un b e e esumen sob e nema odos gas oin es inales o inos -más
ecuen es en la isla de G an Cana ia y con especial én asis en Haemonchus con o us- sus signos
clínicos, mé odos de con ol y espues a inmune.
Re isión Bibliog á ica
26
3.3.1 PRINCIPALES NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN PEQUEÑOS RUMIANTES DE
LA ISLA DE GRAN CANARIA: HAEMONCHUS CONTORTUS, TELADORSAGIA
CIRCUMCINCTA Y TRICHOSTRONGYLUS SPP.
Los p incipales nema odos abomasales encon ados en in ecciones mix as na u ales en
explo aciones cap inas de la isla de G an Cana ia ue on Telado sagia ci cumcinc a,
T ichos ongylus axei y Haemonchus con o us (Molina e al., 1997). Es as son p ecisamen e las
especies/géne o (T ichos ongylus spp.) más ecuen es y las p incipales esponsables de
pé didas económicas en el sec o o ino en el mundo (O’Conno e al., 2006), eniendo una
p e alencia del 100% los animales en pas o eo en algunas egiones de España (Meana y Rojo,
1999). De es os es géne os pe enecien es a la amilia T ichos ongylidae, el que mayo
impo ancia iene po su pa ogenicidad y dis ibución es Haemonchus con o us (Le ine, 1978).
Las ca ac e ís icas de algunos ejemplos de es as especies/géne o en cuan o a localización en el
hospedado , mo ología y dis ibución ienen ecogidas en la Tabla 3.1.
Re isión Bibliog á ica
27
Fuen es Le ine, 1978; Medidas aina de la cola Van Wyk y Mayhew, 2013; Dis ibución de O’Conno e al. 2006.
Tabla 3.1 Ca ac e ís icas mo ológicas, localización y dis ibución Haemonchus con o us, Telado sagia ci cumcinc a y T ichos ongylus spp. H: hemb as, M: machos.
“ “
Re isión Bibliog á ica
28
Todos es os nema odos se ca ac e izan po ene un ciclo biológico di ec o (Figu a 3.7) en el
que los hue os, incolo os y con casca a ina, salen con las heces sin emb iona (Meana y Rojo,
1999). El núme o de hue os depende á del es ado inmune del hospedado y/o su edad, así como
de la p oli icidad de la especie y la ca ga pa asi a ia, p oduciendo dia iamen e las hemb as de
H. con o us 5.000-10.000 hue os y T ichos ongylus spp o T. ci cumcinc a 100-200 hue os
(Meana y Rojo, 1999). El es adio la a io 1 (L1) eclosiona á del hue o y su i á dos mudas has a
L3, siendo es e úl imo es adio el in ec an e y se ca ac e iza po es a cubie a po una aina que
no es más que la cu ícula de la L2 (Le ine, 1978). Es a aina, que le impide alimen a se -la L1 y
L2 se alimen an en el medio (Veglia, 1915) – obligándole a subsis i con sus ese as en las
células in es inales (Le ine, 1978), le con ie e p o ección en e a la desecación (O’Conno e
al., 2006). La du ación de es a e apa de ida lib e es de 5 a 14 días (Meana y Rojo, 1999),
dependiendo de la empe a u a y la humedad (Tabla 3.2), de modo que a empe a u as óp imas,
gene almen e más cálidas, se aco a el ciclo y las bajas lo de ienen (O’Conno e al., 2006),
adap ándose a las condiciones locales dominan es (S ea e al., 2007a). Cuando las condiciones
de luz, empe a u a y humedad son adecuadas, las L3 mig an has a la hie ba desde dónde se án
inge idas, (Veglia, 1915; Soulsby, 1987).
Tabla 3.2 Ca ac e ís icas de iabilidad a las condiciones climá icas de los es adios de ida lib e de
Haemonchus con o us, Telado sagia ci cumcinc a y T ichos ongylus colub i o mis.
Haemonchus con o us
Telado sagia ci cumcinc a
T ichos ongylus spp.
T. colub i o mis
Hue o
*No iable po debajo de
10ºC., suscep ible al io y
desecación.
*Viabilidad en e 0-10 ºC.
Suscep ibilidad baja al io y
desecación.
* No iable po debajo de 5ºC.
Suscep ibilidad in e media al io
y desecación.
L1 –L2
*Suscep ibilidad ele ada al
io y desecación.
*Suscep ible a la desecación y
media al ío.
*Suscep ible a la desecación y al
ío. Ele ada mo alidad po
debajo de 5ºC.
L3
*Ele ada supe i encia en
climas cálidos y húmedos.
*Baja supe i encia bajo
0ºC, en climas íos o cálidos
y secos.
*Ele ada supe i encia en
climas íos, húmedos y bajo
0ºC.
*Baja supe i encia en climas
cálidos y secos.
* Ele ada supe i encia en
climas íos o cálidos con
humedad.
* Baja supe i encia bajo 0ºC.
Tabla adap ada de la elabo ada po O’Conno e al., 2006 denominada “Key di e en ia ing ea u es o en i onmen al
in luences on he ee-li ing s ages o he majo ichos ongylid nema ode pa asi es o sheep”.
Una ez inge idas, es as L3 se desen ainan en el umen (H. con o us, T. ci cumcinc a, T. axei)
o abomaso (T ichos ongylus spp. in es inales), p oceso a o ecido po los compues os no
ionizados del ampón bica bona o-CO2, CO2 no disociado y gaseoso del apa a o diges i o del
hospedado que es imulan la sec eción del “ luido de muda” de la la a (Soulsby, 1987; Lee,
2002). Una ez desen ainadas, es as la as mig an al abomaso en el caso de H. con o us y T.
ci cumcinc a y al in es ino delgado en el caso de T. colub i o mis. Las L3 de H. con o us pene an
en e las glándulas epi eliales de la zona úndica del abomaso, T. ci cumcinc a pene a en la base
Re isión Bibliog á ica
29
de las glándulas gás icas de la zona an opiló ica y las especies in es inales de T ichos ongylus
spp. se si úan en e el epi elio y la memb ana basal del p ime e cio del in es ino delgado dónde
muda an al es adio L4 (Soulsby, 1987; Meana y Rojo, 1999).
Du an e es e pe iodo puede ene luga el enómeno conocido como hipobiosis en el que las
la as quedan la en es de eniendo el desa ollo del ciclo du an e a ios meses, asociado a
ac o es ambien ales (condiciones ad e sas pa a los es adios de ida lib e), al hospedado
( esis encia) o como un mecanismo del pa ási o pa a egula su población (Soulsby, 1987). De
no ocu i es o, las L4 eme gen a la luz a los 4-5 días en H. con o us (Veglia, 1915) y a los 6- 10
días en T. ci cumcinc a (Ma ínez-Vallada es, 2006), o quedan embebidos en la mucosa desde
los 7 días en T ichos ongylus spp. (Soulsby, 1987). Es a L4 muda á al es adio L5 (p eadul o),
p esen e en el lumen del ó gano y que al madu a sexualmen e se con ie e en es adio adul o
(Veglia, 1915) que ce a á el ciclo al elimina hue os al ex e io con las heces. El pe iodo p e-
pa en e es de 15-20 días pa a H. con o us y de 17-21 días pa a T. ci cumcinc a y T ichos ongylus
spp. (Soulsby, 1987; Meana y Rojo, 1999).
Figu a 3.7 Rep esen ación del ciclo biológico di ec o pa a Haemonchus con o us, Telado sagia
ci cumcinc a y T ichos ongylus spp. en el o ino.
*Re e encia o o go a-la as: h p://www.na u e.com/na u e/jou nal/ 452/n7184/ ig_ ab/452157a_F1.h ml
La acción pa ógena a a depende de la edad de los animales y de la in ensidad de la in ección
(Meana y Rojo, 1999). Haemonchus con o us es conside ado el pa ási o más impo an e de la
o eja, es hema ó ago desde el es adio L4, p oduciendo anemia, pé dida de peso, debilidad y
edemas ecuen emen e isible en la egión submandibula como consecuencia de la
Desa ollo
la a io de
es adio 1 a 3
Tempe a u a
Humedad
Desa ollo de
L3 a Adul o
*

Re isión Bibliog á ica
30
hipop o einemia, p oduciéndose la mue e en in ecciones g a es (Le ine, 1978). Si bien T.
ci cumcinc a es his o o a, ambién ingie e sang e, pe o las can idades no son an ele adas
(Le ine, 1978), y se ca ac e iza po el daño glandula que p oduce en el abomaso, causando
cambios del pH que ocasionan pé dida de ape i o, peso y dia ea; signos simila es a los
obse ados en T ichos ongylus spp. po los daños que p oducen los di e en es es adios
(Soulsby, 1987).
3.3.2 MÉTODOS DE CONTROL DE LOS PARÁSITOS
T adicionalmen e el a amien o y con ol de los nema odos gas oin es inales se ha
ealizado con á macos desc ibiéndose esis encia a los p incipales an ipa asi a ios de amplio
espec o del me cado en o ejas de odo el mundo (Coles e al., 2006; Taylo e al., 2009),
de iniéndose esis encia como la habilidad del pa ási o a ole a la dosis e apéu ica, a o ecida
po he e ocigosis, elocidad de mu ación de los alelos esis en es y la capacidad ep oduc i a
de los pa ási os (FAO, 2003). En es e sen ido, man ene animales den o del ebaño que no
eciban a amien o, dónde los pa ási os sin a a , conocidos como e ugio, pe mi i án dilui
esos genes esis en es en el medio ( an Wyk, 2001).
En la década de los 50 se in oduje on en los me cados nue as clases de an ihelmín icos
al amen e e icaces y segu os ( an Wyk e al., 2006) que pe mi ie on el con ol de los pa ási os
de una o ma ácil po pa e del ganade o que desplazó el diagnós ico y el aseso amien o
p o esional (FAO, 2003). En 1957, se comunicó la p ime a esis encia de H. con o us a la
eno iazina y en 1964, se desc ibió su esis encia al iabendazol, obse ándose en años
pos e io es esis encias c uzadas en e p incipios ac i os de un mismo g upo (Soulsby, 1987)
educiéndose ápidamen e la e ec i idad de los á macos.
A día de hoy, en el me cado hay a ios á macos clasi icados p incipalmen e en los siguien es
g upos: benzimidazol, imidazo iazoles, e ahid opi imidinas, lac onas mac ociclicas, de i ados
amino-ace oni ilo, espi oindoles, salicilanilidas, isoquinolonas u o gano os o ados
(h p://www.wo mboss.com.au/ es s- ools/managemen - ools/d ench-g oups-and-
ac i es.php). Hay desc i as esis encias en nume osas pa es del mundo (Walle , 1997a) a
muchos de los p incipios ac i os que in eg an es os g upos de p oduc os u ilizados en el
a amien o de nema odos gas oin es inales, como po ejemplo al albendazol (Gill, 1996),
enbendazol (Ba on e al., 1985), ox endazol (Bo gs eede e al., 1997), le amisol (Ba on e al.,
1985; Gill, 1996), mo an el (Yada e al., 1993), i e mec ina (Viei a e al., 1992), moxidec ina
(Scheue le e al., 2009), abamec ina (Kaminsky e al., 2011), monepan el (Sco e al., 2013),
closan el (Lo e e al., 1992), a oxanida (Boe sema y Pandey, 1997) y o gano os o ados (G een
Re isión Bibliog á ica
31
e al., 1981). En España hay desc i as esis encias a benzimidazoles, imidazo iazoles y lac onas
mac ocíclicas (Ál a ez-Sánchez e al., 2006; Díez-Baños e al., 2008; Ma ínez-Vallada es e al.,
2013a), lo que pe mi e hace se una idea de la complicada si uación que se es á gene ando.
Es e con ex o se ha ag a ado con la incapacidad de la indus ia a macéu ica de p oduci
á macos en un co o pe iodo de iempo, a los que los pa ási os no se adap en - esis encia-
ápidamen e (FAO, 2003). Es a in e sión, además esul a poco en able pa a las a macéu icas
que p e ie en in e i en o as especies domés icas (y en la especie humana) al conside a los
me cados más luc a i os pa a ellas (Walle , 1997a). P ueba de odo ello es que en 2009 salió al
me cado como solución a es as mul i esis encias el Monepan el (única molécula del g upo de
los amino-ace oni ilo) y pocos años después se publicó el p ime caso de esis encias en Nue a
Zelanda (Sco e al., 2013), iden i icándose ambién ecien emen e en Eu opa, conc e amen e
en Países Bajos (Van de B om e al., 2015). O o á maco, lanzado al me cado un año pos e io
(2010) ambién en Nue a Zelanda, es á o mado po la combinación de De quan el,
pe enecien e al g upo denominado espi oindoles, y Abamec ina, una lac ona mac ocíclica, las
cuales es án conside adas el g upo de an ihelmín icos con más egis os de esis encias, se ha
is o que iene una e icacia dudosa en e a algunos pa ási os esis en es, debiéndose de ene
en conside ación el espec o a la ho a de aplica lo (Kaminsky e al., 2011; Geo ge e al., 2012).
Dado el impac o económico que ienen los nema odos gas oin es inales y su a amien o en
el sec o o ino y la elocidad con la que los pa ási os desa ollan es as esis encias, ga an iza y
ala ga la ac i idad de los á macos es absolu amen e necesa io. El diagnós ico a a és de
ecuen os ecales de hue os median e McMas e o es de educción de ecuen os ecales de
hue os (siglas en inglés FECRT) en el campo o, a a és de écnicas de labo a o io como el es
de eclosión de hue os (siglas en inglés EHT), desa ollo (siglas en inglés LDT) y/o mo ilidad
la a io (siglas en inglés LMT) (Kassai, 1999) pe mi e de ec a esis encias den o de las g anjas
y no hace cambios de a amien os indisc iminadamen e (FAO, 2003).
Una buena es a egia, pa a aumen a la iabilidad de los á macos, se ía implan a un
p og ama de manejo in eg ado (Walke e al., 1988) a a és de la combinación de es a egias
de con ol, an o químicas como no químicas (Walle , 1997a, 1997b; FAO, 2003; Paul e al.,
2010; Kahn y Woodga e, 2012), ga an izando una p oducción más sos enible que eduzca los
cos es y la p esencia de esiduos en los p oduc os (FAO, 2003). Pa a ello es indispensable an o
la implicación de los ganade os (Kassai, 1999) así como de ecnologías que simpli iquen la
ecogida y análisis de da os y que apo en in o mación sob e manejo de pa ási os (Van Wyk e
al., 2006).
Re isión Bibliog á ica
32
Es as medidas químicas es a ían en ocadas en el a amien o selec i o de animales a a és
del diagnós ico de los más suscep ibles y en e las medidas no químicas se incluyen aquellas
encaminadas a mejo a la espues a del hospedado , ya sea median e la alimen ación, selección
según esis encia o a a és de acunas, así como medidas de manejo del pas o y con ol
biológico (Walle , 1999).
3.3.2.1 T a amien o selec i o
Las ca gas pa asi a ias no se encuen a uni o memen e dis ibuidas en la población, siendo
una mino ía de animales lo que p esen an las mayo es ca gas debido a que hay animales más
suscep ibles y o os más esis en es, esilien es o ole an es a la in ección (Van Wyk e al., 2006;
FAO, 2003). En es e sen ido, el a amien o selec i o consis e en aplica a amien o a aquellos
animales en los que la p esencia de pa ási os p oduce en e medad y/o pé didas p oduc i as
conside ables en ez de a a odo el ebaño (Van Wyk e al., 2006), pe mi iendo que se
man engan poblaciones de pa ási os en e ugio en el ebaño que disminuyan los ni eles de
esis encia an ihelmín ica que se pudie an gene a (Van Wyk., 2001). Pa a pode ealiza es e
a amien o selec i o con éxi o, es necesa io dispone de mé odos que pe mi an iden i ica
adecuadamen e a esos animales suscep ibles pa a pode adminis a el mejo a amien o en
cada momen o, lo que po o o lado ambién pe mi i á iden i ica y selecciona pa a la c ía a
aquellos animales más esis en es ( an Wyk e al., 2006; P es on e al., 2014).
Exis en a ios ma cado es asociados con la in ección po nema odos gas oin es inales (Tabla
3.3) (P es on e al., 2014), como po ejemplo la p esencia de hue os en heces, la anemia que se
puede de e mina /es ima po el hema oc i o (G ay e al., 1987) o po el FAMACHA©(Ba h e
al., 1996; Van Wyk y Ba h, 2002), cambios en el compo amien o animal (Falzon e al., 2013) o
la pé dida de peso, es imado median e el Happy Fac o (G ee e al., 2009; 2010) o de la
condición co po al ( an Wyk e al., 2006; Ba h y an Wyk, 2009).
Re isión Bibliog á ica
33
Tabla 3.3 Desc ipción de algunos ma cado es asociados con la in ección pa a el diagnós ico de
nema odos gas oin es inales (adap ada de P es on e al., 2014).
Desc ipción
Incon enien es
Recuen o de hue os
en heces
Pe mi e con abiliza los hue os
en heces escas como
indicado de in ección de
adul os. Medida di ec a de la
in ección.
Labo ioso en la oma de
mues as, cos oso y iene
al a a iabilidad en los
ecuen os.
No pe mi e iden i ica la
mayo ía de las especies de
nema odos
gas oin es inales,
exis iendo pa a ello
écnicas ápidas como
PCR o uso de lec inas
ma cadas con
luo escencia.
Hema oc i o
Pe mi e alo a la anemia
midiendo el po cen aje de
células ojas en sang e. Medida
di ec a de la in ección.
In asi o.
No es especí ico ya que
o as en e medades
ambién p oducen
pé didas de sang e.
FAMACHA©
Pe mi e alo a la anemia a
a és de compa a el colo de
la conjun i a con una escala del
1 (no a amien o) al 5 ( iesgo
de mue e). Rápido y no es
in asi o.
Subje i o.
No es especí ico ya que
o as en e medades
ambién p oducen
pé didas de sang e.
Compo amien o
animal
Pe mi e, a a és de GPS,
iden i ica indi ec amen e
animales suscep ibles,
basándose en que es os se
mo ilizan más du an e el
pas o eo, pues necesi an
consumi más, pa a ecupe a
la pé dida de p o eínas y bebe
agua.
Requie e de una al a
in e sión económica en
disposi i os GPS.
Happy Fac o
Pe mi e calcula la ganancia de
peso basado en la asa de
e iciencia de los alimen os.
Requi iendo a amien o
aquellos que no alcancen el
alo p e iamen e es imado.
Medida indi ec a.
Requie e de in e sión
económica en ecnología
y pesaje de los animales
cada 15 días.
Pun uación de la
condición co po al
Pe mi e de e mina la pé dida
de condición co po al median e
la palpación de di e en es
es uc u as del do so del
animal. Es á basada en una
escala del 1 (muy laca) al 5
(muy g uesa). Medida
indi ec a.
Subje i o.
No es especí ico ya que
o as en e medades
ambién p oducen
pé didas de condición
co po al.
Algunos de los ma cado es desc i os an e io men e son poco p ác icos en las g anjas,
equi iendo del en ió de mues as a labo a o ios o incluso de in e sión económica en
ecnología, quedando su aplicación limi ada a la in es igación (P es on e al., 2014). No
obs an e, exis e un sis ema ela i amen e sencillo que in eg a a ios pun os a chequea en el
animal y que puede se ú il pa a ealiza un a amien o, el Fi e Poin Check© (Ba h y an Wyk,
Re isión Bibliog á ica
40
Las acunas de an ígenos na u ales se basan en el uso de an ígenos de supe icie o de
exc eción/sec eción que gene almen e econoce el hospedado du an e su espues a inmune,
y las acunas de an ígenos ocul os, emplean an ígenos que no es án en con ac o con el
hospedado de o ma na u al y que gene almen e p oceden del in es ino del pa ási o, siendo
gene almen e e icaces cuando se a a de pa ási os hema ó agos como H. con o us (New on y
Meeusen, 2003). No obs an e, los an ígenos ocul os equie en de e acunaciones ecuen es
pa a man ene la p o ección a di e encia de los an ígenos na u ales, que se bene ician de las
ein ecciones en el campo (Knox, 2000). Si bien, lo ideal de una acuna es que sea e ec i a en e
a a ios géne os de nema odos gas oin es inales (Klei, 1997), a día de hoy solo exis en acunas
o p o o ipos mono alen es (Smi h y Za lenga, 2006).
En las úl imas décadas, se han iden i icado nume osos an ígenos na u ales que pod ían se
u ilizados pa a elabo a acunas (Smi h y Za lenga, 2006) especialmen e en e H. con o us,
siendo mucho más limi ada la iden i icación de an ígenos que p oduzcan p o ección en e a
o os nema odos gas oin es inales menos p olí icos (New on y Meeusen, 2003). Sin emba go,
el p oblema su ge a la ho a de la come cialización, pues es as moléculas ienen que se segu as
y e icaces an o en animales adul os como en co de os (pues son los más suscep ibles), además
de áciles y ba a as de p oduci (Schallig, 2000). Los p incipales obs áculos en la p oducción
su gen a la ho a de consegui la e sión ecombinan e del an ígeno con la con igu ación e cia ia
adecuada que induzca y man enga en el iempo la espues a inmune, y a la ho a de elegi el
adyu an e adecuado que inc emen e la espues a (Smi h y Za lenga, 2006). Un mayo
en endimien o de los mecanismos de inmunidad pe mi i ía desa olla mejo es diseños de
inmunización (New on y Meeusen, 2003). En 2014 se au o izó la en a en el me cado
aus aliano de la p ime a acuna con an ígenos na i os en e a H. con o us llamada Ba be ax®
(Tabla 3.5), la cual es á indicada, de momen o, pa a con e i p o ección (75-95%) en e H.
con o us en los co de os, siendo necesa io aplica 5 inyecciones subcu áneas con in e alos de
3 a 6 semanas (h p://ba be ax.com.au/ ;
h p://www.wo mboss.com.au/news/a icles/nonchemical-managemen /ba be axa-new-
app oach- o-ba be s-pole-wo m-con ol.php; Smi h e al., 2015).

Re isión Bibliog á ica
41
Tabla 3.5 Ejemplos de an ígenos es udiados como acunas en e a nema odos gas oin es inales.
Re isión Bibliog á ica
42
Dado lo complicado de ob ene esul ados p ome edo es con an ígenos ecombinan es,
cabe des aca la acuna desa ollada po Nisbe e al., 2013, que as es inmunizaciones en
co de os (172-206 días de edad) con un pool de 8 p o eínas ecombinan es de T. ci cumcinc a
(ca hepsin F-1 (Tci-CF-1), as acin-like me allop o einase-1 (Tci-MEP-1), p o eínas con unción
desconocida de 20kDa (Tci-ES20) y ac i a ion-associa ed sec e o y p o ein-1 (Tci-ASP-1),
inmunogeno homólogo al an ígeno de Ancylos oma caninum de T. ci cumcinc a (Tci-SAA-1),
mac ophage mig a ion inhibi o y ac o -1 (Tci-MIF-1), calcium-dependen apy ase-1 (Tci-APY-1)
y un homólogo de TGF(Tci-TGH-2)), más el adyu an e Quil Ay pos e io inoculación múl iple
con L3 de T. ci cumcinc a, obse a on en dos ensayos di e en es, una educción del 70% y del
58% en la media de p oducción de hue os acumulada y una educción del 75% y del 56% de la
ca ga pa asi a ia con espec o a los g upos con ol pa a cada ensayo, sin emba go no se obse ó
di e encias en los g upos de animales más jó enes. Ac ualmen e, con el in de op imiza es e
p ome edo p o o ipo acunal, se dispone de inanciación eu opea den o del p og ama H2020
(Socie al Challenge 2-Food secu i y, sus ainable ag icul u e and o es y, ma ine and ma i ime
and inland wa e esea ch and bioeconomy, Call H2020-SFS-2014-2), denominado PARAGONE:
accines o animal pa asi es (635408), con obje i os, en e o os, de iden i ica las causas de
las a iaciones en las espues as en e indi iduos, las causas de la al a de p o ección en
co de os y op imiza su adminis ación.
O a acuna con esul ados muy in e esan es -en es e caso en e a H. con o us- es la
desa ollada po Fawzi e al., 2014, a pa i de an ígeno denominado Hc23, que es una p o eína
somá ica del es adio adul o de dicho pa ási o. T as la inmunización de co de os con el an ígeno
na i o con el adyu an e, hid óxido de aluminio o una p epa ación inmune modulado a
bac e iana, y pos e io desa ío con 15.000 L3, obse a on educciones supe io es al 70% en el
ecuen o de hue os y del 67% de la ca ga pa asi a ia, esul ados muy espe anzado es. El ensayo
de la e sión ecombinan e de dicho an ígeno ( Hc23) con hid óxido de aluminio y pos e io
desa ío en co de os (Fawzi e al., 2015), p odujo educciones supe io es al 80% de los ecuen os
de hue os en heces y de la ca ga pa asi a ia.
3.3.2.2.5 Selección gené ica
Selecciona animales esis en es supone una al e na i a in e esan e pa a el con ol de los
nema odos gas oin es inales que apo a una solución sos enible a la go plazo al a a se de un
asgo he edable (Bishop y S ea , 2003; Saye s y Sweeney, 2005; Pied a i a e al., 2010 Bishop,
2012) y al que los pa ási os a da ían en adap a se debido al al o núme o de genes, y po an o
“dianas”, que pa icipan en la esis encia (Bishop, 2012). El ecuen o de hue os en heces,
Re isión Bibliog á ica
43
habi ualmen e empleado como indicado de esis encia (Bishop, 2012), iene una he edabilidad
en e 0,2 y 0,4 en o ejas, alo es simila es a los de p oducción leche a o a io de c ecimien o en
bo ino (Kassai, 1999; FAO, 2003; S ea e al., 2007a). Es e alo de he edabilidad es á
in luenciado po la edad y exposición de los animales es udiados, p ecisión del ecuen o, el
núme o de mues as (S ea y Wakelin, 1998), especie de pa ási o y aza o ina (McManus e al.,
2014). Pa a pode mejo a es a cualidad ( esis encia) es necesa io que exis a a iabilidad
gené ica, la cual es á desc i a en e y den o de aza (Vanimise i e al., 2004a; 2004b; S ea e
al., 2007a; Pied a i a e al., 2010, Bishop, 2012). No obs an e, selecciona es a ca ac e ís ica
iene una opinión con o e ida sob e su e ec o en p oduc i idad, pues algunos au o es han
obse ado e ec o nega i o en las p oducciones y o os en cambio no han obse ado ese e ec o
(Pied a i a e al., 2010). En es e sen ido, exis e o o asgo a la ho a de selecciona a los animales,
conocido como esiliencia, que iene de inido como la capacidad de man ene la salud y las
p oducciones du an e la in ección (Bisse y Mo is, 1996). Pese a que se puede es ima a a és
del a io de c ecimien o, anemia, dag sco e y ecuencia de a amien o, es e asgo p esen a
una baja he edabilidad y no educe la con aminación del campo (Bisse y Mo is, 1996). A pesa
de que se ha conseguido educi exi osamen e los a amien os e inc emen a el a io de
c ecimien o seleccionando animales esilien es, esul a complejo pone lo en p ác ica y no
mejo a la esis encia (Bishop, 2012), po lo que no se educe la asmisión de la in ección a o os
animales. De odos modos, disocia en e esis encia y esiliencia como c i e io de selección es,
cuan o menos, con o e ido pues o que, gene almen e, son pa áme os que se inculan en e
sí (S ea , comunicación pe sonal).
La selección median e el ecuen o de hue os es á ampliamen e ex endida y se ha conseguido
es ablece esis encia gené ica en los ebaños (Saye s y Sweeney, 2005; Pied a i a e al., 2010)
al inclui es e asgo en los p og amas de c ía (S ea y Wakelin, 1998). Una mane a sencilla de
mejo a la esis encia del ebaño se ía elimina como ep oduc o es a los animales con mayo es
ecuen os o más suscep ibles (Kassai, 1999) o haciendo c uces con azas esis en es.
Tal y como se desc ibió al inicio de es a e isión bibliog á ica, la FAO omen a la conse ación
de las azas locales, p incipalmen e de zonas opicales y sub opicales, que po su adap ación
a las condiciones medioambien ales, han sido seleccionadas de o ma na u al po su esis encia
a los nema odos gas oin es inales, suponiendo una uen e de ecu sos gené icos. Es as azas
se suelen “desp ecia ” po asocia se a baja p oduc i idad debido, p obablemen e, a las pob es
condiciones en las que se c ían, con escasos apo es nu icionales y/o médicos, pues al
compa a las den o de su en o no con azas más p oduc i as, las azas locales consiguen
mayo es p oducciones (Pied a i a e al., 2010). El c uce de es as azas esis en es con azas más
Re isión Bibliog á ica
44
p oduc i as pod ía apo a mejo as en sus descendencias, sin emba go, es a eo ía jun o con la
explo ación de es as azas en ambien es di e en es es a poco es udiada, equi iéndose una
mayo in es igación (Pied a i a e al., 2010).
El g ado de esis encia conseguido as el c uce de azas suscep ibles y esis en es depende
de la aza, edad y de si la in ección es na u al o a i icial (McManus e al., 2014) y su u ilidad con
ines p oduc i os puede se con o e ida. Ejemplos de c uces en e azas, es el c uce de o inos
de la aza Su olk (suscep ible) con Gul Coas Na i e ( esis en e) del que se ob u o co de os con
mejo ía en esis encia a H. con o us pe o con me mas en los endimien os p oduc i os (Li e
al., 2001). No obs an e, en á eas donde la al a p e alencia pa asi a ia causa impo an es
pé didas, es e c uce pod ía supone una al e na i a (Li e al., 2001). T as el c uce de machos de
la aza Rhön (suscep ible) con hemb as de Me inoland ( esis en e) los co de os p esen an una
mejo ía en esis encia a H. con o us sin e ec o nega i o en la p oduc i idad (Hielsche e al.,
2006). La descendencia del c uce Su olk, Ile de F ance, Texel y Do pe con San a Inés ( esis en e)
u o una esis encia simila a San a Inés, man eniendo ambién las p oducciones (Ama an e e
al., 2009).
Po o o lado, pa a pode selecciona a los indi iduos más esis en es es necesa io,
ob iamen e, iden i ica los, median e ma cado es elacionados con la in ección (ci ados
an e io men e en el apa ado 3.3.2.1) o inmunológicos (P es on e al., 2014) como po ejemplo:
la eosino ilia en sang e pe i é ica (al os ecuen os de eosinó ilos asociados a esis encia),
inmunoglobulinas (IgG1 e IgA) especí ica en sue o, heces y en sali a (ni eles al os asociado a
esis encia- ejemplo come cial: el es pa a de ec a IgA en sali a especí ica del ca bohid a o
la a io de 35kDa Ca LA (Ha ison e al 2003; 2008; h p://www.ca lasali a es .com/) o los
ni eles de la ho mona Gh elin (ho mona egulado a de la saciedad) (P es on e al., 2014). Sin
emba go, es os ma cado es implican pe mi i el desa ollo de la in ección en los animales con
su co espondien e impac o en el endimien o de la explo ación (Kassai, 1999). Pode iden i ica
a a és de ma cado es inna os o gené icos, como los genes asociados a ca ac e es cuan i a i os
(Quan i a i e ai loci – QTL) o al polimo ismo de un único nucleó ido de secuencias de ADN
en e c omosomas homólogos (Single nucleo ide polymo phism SNP) (McManus e al., 2014),
que pe mi an iden i ica a los animales esis en es independien emen e del desa ollo de la
in ección es lo ideal, pues es os ma cado es gené icos pueden p edeci el es a us de esis encia
del animal (Saye s y Sweeney, 2005).
Se han p opues o a ios ma cado es de esis encia con es e p opósi o, ales como el ipo de
sang e (hemoglobina), genes del complejo mayo de his ocompa ibilidad (MHC) y genes del
Re isión Bibliog á ica
45
in e e ón gamma (IFN-) (P es on e al., 2014). En elación al ipo de hemoglobina, algunos
au o es sugie en que animales que ienen hemoglobina (Hb) con alelos AA son más esis en es
en in ecciones con H. con o us y T. ci cumcinc a que los que p esen an HbAB y HbBB (Al ai y
Da gie, 1978; Tiza d, 2009), sin emba go, o os no apoyan es a asociación (Kassai e al., 1990;
G ay, 1997).
El complejo mayo de his ocompa ibilidad se co esponde con ecep o es p esen ado es de
an ígenos, MHC clase I (MHC-I) p esen e en casi odas las células nucleadas y MHC clase II (MHC-
II) que se localizan en las células p esen ado as de an ígenos (Tiza d, 2009). El MHC-II es el que
más se ha asociado a esis encia a nema odos (Lee e al., 2011), encon ándose alelos
especí icos asociados a es a esis encia (S ea e al., 2007b). La a iación den o de es e
complejo, localizado en el c omosoma 20, de e mina esis encia o suscep ibilidad (Lee e al.,
2011). El MHC-II es a codi icado po dos genes, sin emba go se ha p es ado mayo a ención al
HLA-DR que es más polimó ico y ep esen a i o que HLA-DQ, po su ele ada exp esión en las
células p esen ado as de an ígeno (P es on e al., 2014). En es e sen ido se han ealizado
nume osos es udios que elacionan el alelo DRB1 del MHC-II con esis encia en di e en es azas
de o ejas (Lee e al., 2011; Haywa d, 2013), como po ejemplo en e a T. ci cumcinc a en o inos
Sco ish Black ace (Schwaige e al., 1995). O os es udios han encon ado es a asociación con
la egión O a -DYA del MHC clase IIb pa a H. con o us y T. ci cumcinc a (Lee e al., 2011). Con
el uso de chip de ADN (DNA mic oa ay) o PCR se ha obse ado en nume osos es udios es a
asociación con la exp esión a ios genes, po ejemplo el DQB1, DRA y DQA1 del MHC-II, en los
animales esis en es a nema odos gas oin es inales (Lee e al., 2011).
O o de es os ma cado es gené icos es el IFN-, pues se ha desc i o que el polimo ismo en
un alelo en un locus mic osa éli e si uado en el p ime in ón del gen de IFN- (localizado en el
c omosoma 3) ha sido asociado con esis encia a la in ección de T. ci cumcinc a en o ejas Soay
al educi su exp esión o a inidad del ecep o de IFN-, pues su exp esión, ligada a una espues a
inmune ipo Th1, esul a bene iciosa pa a el nema odo gas oin es inal (Col man e al., 2001;
Haywa d, 2013). También se ha obse ado es a asociación en o inos Texel, Romney y Me ino
(Saye s y Sweeney, 2005).
Sin emba go, la esis encia a pa ási os es un asgo poligené ico p oducido po muchos genes
que ienen un e ec o pequeño (C aw o d e al., 2006), po lo que esul a di ícil selecciona
esis encia iden i icando un único gen. Los es udios QTL pod ían es a limi ados po su sesgo en
la a ianza gené ica y se limi an a ela i amen e pocos locus y son di íciles de eplica (Haywa d,
2013). La combinación de mapeo de genes y genes candida os jun o con los a ances en

Re isión Bibliog á ica
46
genómica compa a i a ayuda án a de ec a mejo los cambios gené icos elacionados con la
esis encia (Dominik, 2005)
Los a ances ecnológicos, han pe mi ido desa olla o os ma cado es que aba can más
ampliamen e el genoma (del inglés Genome-wide associa ion s udies GWAS) (Haywa d, 2013).
SNPs, cuyo uso es á ampliamen e ex endido, apo an in o mación de egiones que codi ican o
no p o eínas (inclusi e egiones egulado as), ienen un bajo cos e y se dispone ac ualmen e de
ca álogos de a iación den o de especies, exis iendo pa a ca ac e es p oduc i os en o inos los
chips O ineSNP50 o O ineSNP700 geno yping BeadChip (Illumina®) que pe mi en ca ac e iza
simul áneamen e más de 50.000 SNPs (McManus e al., 2014; P es on e al. 2014). Kempe e
al., 2011 es udia on la posibilidad de usa el chip O ineSNP50 geno yping BeadChip (Illumina®)
como ma cado gené ico del ecuen o de hue os en o inos in ec ados con T. colub i o mis y H.
con o us, ob eniendo un p omedio de 0.40% y 0.08% de la a ianza eno ípica de los ecuen os
espec i amen e, conside ándolo un esul ado consis en e. McRae e al., 2014, es udia on a
a és del mismo chip la asociación de los SNP con esis encia o suscep ibilidad en o inos de
aza Romney y Pe endale in ec ados na u almen e (con p edominio de las especies T.
colub i o mis y T. ci cumcinc a), en los que iden i ica on 14 nue as egiones asociadas con
esis encia y suscep ibilidad.
O o ma cado inna o p opues o po P es on e al., 2014 es la eacción cu ánea de
hipe sensibilidad. P es on, 2013, basándose en que la medida de la eacción de
hipe sensibilidad cu ánea se usa como diagnós ico de algunas en e medades y de que es a
ca ac e ís ica ha mos ado se he edable, es udió la eacción de hipe sensibilidad cu ánea as
la inoculación cu ánea de L3 desen ainadas de H. con o us, con el in de encon a asociación
en e la medida de es a eacción y esis encia al pa ási o en o inos con alo de c ía pa a
ecuen o de hue os en heces conocido, pues en una expe iencia an e io obse ó asociaciones
en e es a eacción de hipe sensibilidad cu ánea y pa áme os pa asi ológicos, p ediciendo la
p o ección inducida po la acunación con an ígeno HcsL3. Sin emba go, no obse a on
asociaciones en e las eacciones de hipe sensibilidad y la esis encia a nema odos
gas oin es inales, quizás po la di e sidad de mecanismos de inmunidad que la o eja pod ía
desa olla . Se p ecisan más es udios pa a alida es e mé odo, que apo a ía in o mación,
ela i amen e ácil de ecaba y moni o iza , sob e la espues a inmune (P es on e al., 2014).
Re isión Bibliog á ica
47
3.4 RESPUESTA INMUNE A NEMATODOS GASTROINTESTINALES:
RESISTENCIA A HAEMONCHUS CONTORTUS
Conoce en de alle la compleja espues a inmune en e a los nema odos gas oin es inales,
se ía una in o mación muy ú il pa a pode desa olla nue os á macos o acunas (FAO, 2003;
Pied a i a e al., 2010). Es a espues a comp ende la in e acción de componen es especí icos e
inespecí icos del sis ema inmune (Mille , 1984; Bau is a, 2010), eniendo impo ancia an o la
espues a inmune inna a como la adqui ida (Bau is a, 2010). A la inmunidad inna a se le
econoce un papel c í ico en el desa ollo de la espues a inmune adqui ida, egido po la
ac i ación inicial de es e sis ema (de Vee e al., 2007).
Los nema odos gas oin es inales se han adap ado al hospedado y son capaces de e i a su
espues a inmune sob e i iendo y desa ollándose, es ableciendo un equilib io al p oduci
gene almen e en e medades subclínicas y c ónicas, causando en e medad g a e cuando la
ca ga pa asi a ia/dosis in ec i a es muy ele ada o la in e acción pa ási o-hospedado es á
descompensada, dependiendo es o úl imo de ac o es ambien ales, del hospedado (Tabla 3.6)
y del pa ási o (Salinas, 2007;Tiza d, 2009; Bau is a, 2010).
Tabla 3.6 Fac o es dependien es del hospedado .
Fac o
Desc ipción
Re e encias
Gené ico
Es a desc i a la a iación en esis encia
en e azas y den o de azas.
Saddiqi e al., 2011.
Vanimise i e al.,
2004a, 2004b.
S ea e al., 2007a.
Pied a i a e al.,
2010.
Bishop, 2012.
Edad
Indi iduos jó enes son más suscep ibles.
Asociado a ac o es ho monales y
de iciencia de la espues a inmune celula .
Kassai, 1999.
Salinas, 2007.
Tiza d, 2009.
Bau is a, 2010.
Saddiqi e al., 2011.
Sexo – Es ado
ep oduc i o
Machos más suscep ibles que las hemb as.
Causa aún en es udio, se ha asociado a
in e acciones inmuno-endoc inas y al os
ni eles de es os e ona que p oducen
inmunosup esión o que al e an el
compo amien o y los genes in luenciando
en la suscep ibilidad y esis encia.
Las hemb as en pe ipa os son más
suscep ibles. Se desconoce el mo i o
aunque se asocia a ho monas como la
p olac ina.
Soulsby, 1987.
Fleming, 1993.
Klein, 2004.
Saddiqi e al., 2011.
Haywa d, 2013.
Nu icional
Las die as de icien es p oducen una
espues a inmune de icien e, ag a ando la
si uación los e ec os pa ógenos de los
pa ási os. Se ha obse ado que la
suplemen ación nu icional inc emen a la
esis encia/ esiliencia de los animales.
Knox, 1996.
Walle , 1997b.
Kassai, 1999.
S ain y S ea , 2001.
Saddiqi e al., 2011.
Re isión Bibliog á ica
48
Cuando un pa ási o pene a en el o ganismo, se p oduce una espues a inmune inna a o
inespecí ica, cons i uida po células y moléculas (Tabla 3.7) de ac i ación ápida p esen es
p e iamen e en el o ganismo y que no gene an memo ia inmunológica, cuyo obje i o es
elimina ápidamen e al pa ógeno y epa a los ejidos (Cu uli, 2007). La espues a inmune
adap a i a se hace e ec i a as a ios días, pues se equie e del econocimien o an igénico y la
di e enciación y ac i ación de los lin oci os T y B (González, 2007).
En la espues a inmune ambién pa icipan p o eínas (ci oquinas) libe adas po las células
que les pe mi e comunica se y coo dina se du an e la espues a, las cuales ac úan a dosis bajas
as uni se a ecep o es especí icos en las células diana, y en e ellas encon amos las
in e leuquinas que egulan las elaciones en e los leucoci os; las quimioquinas que ac úan
sob e la ci culación y mig ación de los leucoci os pa icipando en la in lamación; los
in e e ones, los ac o es de nec osis umo al y los ac o es de c ecimien o (Ga cía, 2007).
Tabla 3.7 P incipales componen es de la espues a inmune inna a (Cu uli, 2007).
Tipo
In eg an es
Mecanismo
Ex e nos
Ba e as
ísicas
Piel y supe icies
mucosas.
Impiden la en ada a
a és de la
in eg idad de es as
es uc u as, os,
es o nudo, el
pe is al ismo
in es inal y el mucus.
Ba e as
químicas
Ph, mucus,
sus ancias
an imic obianas,
enzimas.
Ac úan inhibiendo el
desa ollo o
al e ando las
es uc u as del
pa ási o.
Ba e as
biológicas
Mic obio a
au óc ona.
Es ablece
compe encia con los
agen es pa ógenos.
In e nos
Fac o es
solubles
Sis ema del
complemen o,
mediado es de
la in lamación y
ci oquinas.
Fa o ecen
in lamación y
a acción y/o
ac i ación célula .
Células
Mac ó agos,
Neu ó ilos,
Na u al kille .
Fagoci osis.
P esen ación de
an ígenos, acción
e ec o a sob e
pa ógenos.
Libe ación de
ci oquinas.
Una ez el pa ási o alcanza el abomaso se en en an al bajo pH, el cual ole a po su cu ícula,
y al mucus, al que se libe an sus ancias mediado as de la espues a o con ac i idad
an imic obiana que acili an la espues a in lama o ia (de Vee e al., 2007). Al mucus del ac o
gas oin es inal se libe an lec inas, como la galec ina-11 p oducida po las células epi eliales y
Re isión Bibliog á ica
49
p esen e en el mucus 3 días después de la in ección (Dunphy e al., 2000) o la galec ina-14
p oducida y libe ada po los eosinó ilos du an e su ac i ación (Young e al., 2009). Es as
galec inas se unen a de e minados ca bohid a os p esen es en los pa ási os y cambian las
p opiedades del mucus haciéndolo más iscoso, di icul ando la mo ilidad (Mille , 1987; Dunphy
e al., 2000; de Vee e al., 2007; Young e al., 2009) y/o alimen ación de los e mes. P es on,
2013, obse ó que la galec ina-11 se unía a la supe icie de la L4 de H. con o us, pe o no al
es adio L3, inhibiendo su c ecimien o y desa ollo in i o, obse ándose unión de es a galec ina
en la egión a íngea in e i iendo en la alimen ación (P es on e al., 2015).
Una ez supe en es as ba e as, en an en juego mecanismos inna os in e nos que a an de
e i a el es ablecimien o y acción pa ógena del pa ási o, comenzando con la ac i ación y ijación
del complemen o, conc e amen e la ía al e na i a, que conduce a la espues a in lama o ia,
ac i ación de la agoci osis po neu ó ilos/mac ó agos y la ac i ación de los lin oci os B pa a el
inicio de la espues a humo al, en es e úl imo caso a a és del econocimien o del p oduc o
C3d po pa e de ecep o es como po ejemplo el CD21, CD35 y CD81, aunque ambién son
capaces de econoce an ígenos a a és de su ecep o de células B (BCR) (A jona, 2007; Cu uli,
2007; Gibello, 2007). Es os componen es de la ía al e na i a del complemen o se unen a la
supe icie de los pa ógenos o moléculas sec e adas po los pa ási os, a o eciendo la a acción
de células agoci a ias como neu ó ilos y mac ó agos o células e ec o as como los eosinó ilos y
mas oci os (de Vee e al., 2007; Cu uli, 2007; Salinas, 2007).
Los lin oci os B que han econocido un an ígeno, pueden ac ua como células p esen ado as
de an ígenos, p esen ándoselo a a és de moléculas MHC-II a los lin oci os T pa a ac i a los y
ac i a se a ella misma po coes imulación de su ecep o CD40 (se une al CD154) y CD86 (se une
al CD28), lo que le pe mi i á la exp esión de moléculas de supe icie y ecep o es que
coope a an en su ac i ación y ans o mación en célula plasmá ica p oduc o a de
inmunoglobulinas (A jona, 2007).
Los mac ó agos y neu ó ilos ie en mediado es que po encian la in lamación y la epa ación
isula (Cu uli, 2007). La espues a desencadenada po los mac ó agos a encaminada al ipo
Th1 o in acelula que no esul a gene almen e e ec i a con a los nema odos
gas oin es inales, al igual que ampoco es án asociados los neu ó ilos en la ac i idad e ec o a
en e a los e mes (de Vee e al., 2007).
Cabe esal a el papel de los lin oci os T que son células T con un ecep o TCR o mado
po cadenas  y  unido a un g upo de glicop o eínas denominado CD3 necesa io pa a la
ansducción de señales (A jona, 2007), además en umian es se p esen a la molécula de
Re isión Bibliog á ica
56
los días 3-7 pos -inoculación, es deci , en el momen o en el que se p oducía la salida de las L4 a
la luz del abomaso, al iempo que aumen aba la iscosidad del mucus (Robinson e al., 2011).
Se ha podido demos a median e ensayos in i o con la as de H. con o us que la galec ina 11
di icul a la pé dida de la cu ícula de L3 en su muda a L4 y que es a lec ina es capaz de adhe i se
de o ma selec i a a la egión a íngea del es adio L4, educiendo su amaño, p obablemen e al
di icul a la alimen ación del pa ási o (P es on e al., 2015).
3.4.3. RESPUESTA INMUNE FRENTE A ESTADIO ADULTO
La espues a inmune en e a los es adios adul os se mani ies a a a és de la expulsión,
cambios en la mo ología ( educción de la longi ud) y educción de la ecundidad de las hemb as
(Balic e al., 2000b).
Se ha obse ado la expulsión p ima ia, dosis dependien e, de los e mes adul os de
Nema odi us ba us en co de os (Lee y Ma in, 1976; Win e e al., 1997; Balic e al., 2000b),
sin emba go es más ípico que se p oduzca la expulsión de nema odos gas oin es inales como
H. con o us (Ba ge e al., 1985), T. ci cumcinc a (Sea on e al., 1989) y T. colub i o mis (Ba nes
y Dobson, 1990) po el desa ollo de espues a inmune adqui ida a es os pa ási os as
in ecciones la a ias epe idas, a ibuyéndose a una espues a inespecí ica del mecanismo
la a io de expulsión ápida, que incluso puede ex ende se a o as especies de pa ási os adul os
que habi en el mismo nicho (Balic e al., 2000b). Sin emba go, ambién se ha asociado a
inmunidad adqui ida especí ica al es adio adul o independien e del desa ollo de esis encia
la a ia, pues se ha is o que la expulsión de los adul os no se desa olla simul áneamen e con
la expulsión del es adio la a io en animales con inuamen e in ec ados (Ba ge e al., 1985;
Balic e al., 2000b) o po habe se obse ado es a expulsión, acompañado de daños en la cu ícula
y educción de la ecundidad en e mes adul os de T. colub i o mis implan ados
qui ú gicamen e en o inos en ausencia de in ección la a ia (Eme y e al., 1992; Balic e al.,
2000b). En es e sen ido, si bien no ue una expulsión o al de los e mes, González e al., 2008
obse a on educción de la ca ga pa asi a ia (2.4 eces meno ) a los 28 días pos inoculación
(dpi) en o ino Cana ios de Pelo ( esis en e) compa ados con o inos Cana ios (suscep ibles) sin
encon a di e encias en es ablecimien o la a io (7 dpi) en animales inoculados con una única
dosis de 20.000 L3 de H. con o us, po lo que sugie e que la diana de es a aza es el es adio
adul o del pa ási o.
La educción de la longi ud y ecundidad de H. con o us, T. ci cumcinc a y T. colub i o mis se
ha obse ado como una consecuencia de in ecciones la a ias epe idas (Balic e al., 2000b). Se
ha desc i o a asociación en e longi ud y ecundidad en H. con o us (Lac oux e al., 2006; Rowe

Re isión Bibliog á ica
57
e al., 2008) y T. ci cumcinc a (S ea e al., 1995; 1997), lo que se aduce en que la educción
del amaño p oduci á una educción de la ecundidad. La educción de la longi ud y ecundidad
de los adul os se ha asociado en T. ci cumcinc a al e ec o de la IgA local especí ica de L4 (S ea
e al., 1995; 1996), sugi iendo que el con ol de es as a iables end ía luga en es adios p e ios
al adul o (Balic e al., 2000b). Po o o lado, ambién se ha obse ado asociación de la longi ud
de las hemb as adul as y el ecuen o de hue os en heces con la IgA local especí ica del es adio
adul o de H. con o us en o inos Cana io de Pelo a los 28 dpi as una única inoculación con
20.000 L3 de H. con o us, mien as que en el o ino Cana io se obse ó asociación en e la IgA
local especí ica de L3 y la longi ud la a ia, simila a lo desc i o pa a o as azas o inas
(He nández, 2011; He nández e al., 2015). Po o o lado, en es a misma aza o ina CAP, es á
desc i a asociación nega i a en e los lin oci os T y eosinó ilos con la ecundidad (González
e al., 2008; He nández, 2011), po lo que es a se ía la p ime a ez que se implican a esas
poblaciones celula es y la IgA especí ica de adul o en el con ol de la ecundidad en e mes
adul os.
Toda es a in o mación ecalca la complejidad de la espues a inmune en e a los nema odos
gas oin es inales, ya no solo en e a los di e en es es adios pa asi a ios y especies, sino incluso
en e di e en es azas o inas, siendo necesa io es udios que apo en nue a in o mación al
espec o, que pe mi an escla ece los mecanismos incluyendo las espues as inna as que
pa ecen ene un papel mayo del que se pensaba.
Resumen
Resumen
61
4. RESUMEN
Cub i de mane a sos enible la demanda mundial c ecien e de p oduc os animales o iginados
po el c ecimien o demog á ico y económico equie e mejo a los endimien os p oduc i os de
los animales. Los nema odos gas oin es inales debido a su pa ogenia, p oducen pé didas
p oduc i as, po lo que su con ol inc emen a ía los bene icios ob enidos po animal. Sin
emba go, el uso indisc iminado de los an ihelmín icos ha gene ado el desa ollo de esis encias,
p oponiéndose o as al e na i as de con ol que ecogen p ác icas de manejo encaminadas a
mejo a la esis encia/ esiliencia del hospedado y a educi las ca gas con aminan es. El con ol
a a és de la acunación supond ía una al e na i a sos enible, pues con e i ía p o ección, no
deja ía esiduos en los p oduc os y no se gene a ían esis encias. Sin emba go, dada la
complejidad de la espues a pa ási o-hospedado y las di icul ades écnicas en su desa ollo y
p oducción, hace que sea necesa io ealiza más es udios al espec o. Es udia en p o undidad
los mecanismos inmunes de esis encia desa ollada po los hospedado es en e a los
nema odos gas oin es inales, pod ían p opo ciona in o mación pa a iden i ica nue as dianas
a macológicas po enciales.
En es e sen ido, en una esis p e ia de nues o g upo de in es igación se obse ó que la aza
o ina Cana ia de Pelo (CAP) e a más esis en e en inoculaciones expe imen ales a Haemonchus
con o us que los o inos de la aza Cana ia (CAN), concluyendo que la diana de la espues a
inmune es el es adio adul o del pa ási o, pues se encon a on di e encias en pa asi ología (ca ga
pa asi a ia, longi ud y ecundidad de los e mes) a 28 días pos -inoculación (dpi) y no a 7 dpi
(González e al., 2008; He nández, 2011). En es e no edoso mecanismo de p o ección, el
con ol de la longi ud y ecundidad pa ecía es a asociado a la IgA, eosinó ilos y lin oci os T+
(González e al., 2011a; He nández, 2011; He nández e al., 2015). Ra i ica es os mecanismos,
y p o undiza más en la elación que se es ablece en e los pa ási os (en es e caso, nema odos
gas oin es inales) y los o inos esis en es/suscep ibles ue on los p incipales de onan es del
plan eamien o de es a Tesis Doc o al.
Los esul ados a ojados po es e abajo, indican en su p ime capí ulo que an o adul os
como co de os de la aza Cana ia de Pelo son más esis en e en in ecciones na u ales mix as
dónde p edominan T ichos ongylus spp. y Telado sagia ci cumcinc a, sugi iendo esis encia
mul iespecí ica. En el segundo capí ulo, en el que se compa an o inos de ambas azas inoculados
con 20.000 L3 de Haemonchus con o us y sac i icados a 0, 7 y 21 dpi, se obse a on di e encias
signi ica i as en ca ga pa asi a ia a 21 dpi, pe o no en longi ud ni hue os en ú e o en e azas,
lo que sugie e que el con ol de ca ga pa asi a ia en los o inos de aza Cana io de Pelo iene
luga en e los días 7 y 21 dpi y que el con ol de la longi ud iene luga en e los días 21 y 28

Resumen
62
dpi. El análisis po meno izado de la espues a inmune y de sus asociaciones con las a iables
pa asi a ias sugie en que a 7 dpi la aza esis en e (CAP) pod ía econoce más an ígenos
pa asi a ios que la suscep ible (CAN) a a és de las células MHC-II+ localizadas en la mucosa de
abomaso asociada nega i amen e con la ca ga pa asi a ia in amu al. Es o pod ía desencadena
la pos e io expulsión de los e mes a a és de una espues a coo dinada apa en emen e po
los lin oci os CD4+, ac uando los eosinó ilos galec ina 14+ como célula e ec o a.
Los capí ulos e ce o y cua o, con i man la hipó esis de que los lin oci os T+ y los eosinó ilos
con olan la ecundidad. Así, en el e ce capí ulo se obse ó que los animales a los que se le
adminis ó el an icue po CC15 (an i-WC1, una subpoblación de los lin oci os T), lo que
p odujo una educción signi ica i a de la población de los lin oci os T/WC1+ an o en sang e
pe i é ica como en la mucosa de abomaso, p esen a on e mes signi ica i amen e más la gos y
p olí icos a pesa de que cuan i a i amen e no exis ie on di e encias en el ecuen o de
eosinó ilos e inmunoglobulina A (IgA), lo que sugie e que es a población lin oci a ia pod ía es a
ac uando como coo dinado a de la espues a. Finalmen e, en el cua o capí ulo, se analiza el
e ec o de la adminis ación subcu ánea de la in e leuquina 5 ecombinan e o ina ( IL-5o ), as
la que se gene ó IgG especí icas en e a dicha in e leuquina. Los animales que ecibie on dicha
IL-5o , p esen a on un mayo núme o de e mes, que ue on además signi ica i amen e más
la gos y p olí icos. Sin emba go, a pesa de es a di e encias pa asi ológicas, no se obse a on
di e encias signi ica i as en los ecuen os de eosinó ilos sanguíneos o de mucosa abomasal y de
los ni eles de IgA en e g upos, lo que sugie e, po un lado la impo ancia de dicha in e leuquina
pa a la ac i ación de los eosinó ilos, y po o o el papel de dicha población en el con ol de la
ca ga, longi ud y ecundidad de los e mes. Has a donde conocemos, es la p ime a ez que se
adminis a una ci oquina ecombinan e en o inos con el in de gene a an icue pos que
pe mi an alo a su uncionalidad.
Es os esul ados, en su conjun o, sugie en un mecanismo de con ol de Haemonchus
con o us, no desc i o has a el momen o, que iene luga en e a es adio adul o del pa ási o y
en el que se con ola inicialmen e la ca ga pa asi a ia y pos e io men e la longi ud y ecundidad.
Summa y
Summa y
65
5. SUMMARY
A o d in a sus ainable manne he g owing global demand o animal p oduc s, caused by
demog aphic and economic g ow h, equi es imp o ing animal p oduc ion. Gas oin es inal
nema odes, due o i s pa hogenesis, cause p oduc ion losses, so hei con ol would inc ease
he p oduc i e p o i s o each animal. Howe e , indisc imina e use o an helmin ics has
gene a ed he de elopmen o esis ance, sugges ing use o managemen o in eg a ed con ol
o helmin h pa asi es ha includes al e na i e p ac ices o imp o e he hos
esis ance/ esilience, he e o e educing in ec i e bu dens. The con ol h ough accina ion
would be a sus ainable al e na i e because i would p o ec , wi hou lea ing esidues in he
p oduc s and esis ance would no be gene a ed easily agains i . Howe e , gi en he complexi y
o he pa asi e-hos esponse and echnical di icul ies in i s de elopmen s and p oduc ions; i
will be need u he s udies. Deep analysis o he esis ance immune mechanisms de eloped by
he hos s agains gas oin es inal nema odes could p o ide in o ma ion o iden i y po en ial
new d ug a ge s.
In his sense, in a p e ious Thesis ca ied ou wi hin ou esea ch g oup i was showed ha
Cana ia Hai B eed sheep (CHB) was mo e esis an , in expe imen al in ec ions wi h
Haemonchus con o us, han Cana ia sheep (CAN), concluding ha he a ge o his immune
esponse was he adul s age o his pa asi e, because di e ences in pa asi ology (wo m bu den,
leng h and ecundi y) we e ound a 28 days pos -inocula ion (dpi) bu no a 7 dpi (González e
al., 2008; He nández, 2011). In his no el mechanism o p o ec ion, he con ol o wo m leng h
and ecundi y seemed o be associa ed wi h IgA, eosinophils and T cells (González e al.,
2011a; He nández, 2011; He nández e al., 2015). To p o e hese mechanisms and deepen in o
he ela ionship es ablished be ween pa asi es (in his case, gas oin es inal nema odes) and
esis an /suscep ible sheep we e he main igge s o his Thesis.
Resul s p esen ed on he i s chap e o his s udy indica e ha bo h CHB adul s and lambs
a e mo e esis an in p edominan ly T ichos ongylus spp. and Telado sagia ci cumcinc a
na u al mixed in ec ions sugges ing mul i-speci ic esis ance. In he second chap e , animals o
bo h b eeds we e inocula ed wi h 20,000 L3 o Haemonchus con o us and slaugh e ed a 0, 7
and 21 dpi. Signi ican di e ences in wo m bu den a 21 dpi bu no in leng h o eggs in u e us,
we e obse ed be ween b eeds, i sugges s ha he CHB b eed sheep con ol wo m bu den
be ween 7 and 21 dpi and he wo m leng h be ween 21 and 28 dpi. The de ailed analysis o he
immune esponse and hei associa ions wi h pa asi ic a iables sugges ha he esis an b eed
(CHB) could ecognize mos pa asi e an igens ha suscep ible (CAN) h ough MHC-II+ cells
Ma e ial y Mé odos
72
T as el cop ocul i o de las heces de es os animales, anscu ido el pe iodo p epa en e y as
comp oba la p esencia de hue os en las heces de los co de os de aza Cana ia inoculados, la
ob ención de las L3 de H. con o us se lle ó a cabo median e el mé odo de Bae mann. El
an ígeno somá ico L3 se ob u o as some e 106 L3 en PBS (Tabla 6.3) a es ciclos de 20 min en
congelación a -80 ºC y descongelación a empe a u a ambien e. Pos e io men e se
homogeneiza on con ul asonidos (UP100H, Hielsche ) y mecánicamen e (Ul a u ax T8, IKA®
We ke) a 4 ºC. El homogeneizado esul an e se cen i ugó a 18.000 g (Cen i uge MPW-65R,
MPW) du an e 30 min a 4 ºC, conse ándose el sob enadan e a -20 ºC has a su uso como
an ígeno la a io (mé odo adap ado de Lac oux e al., 2006).
Con el in de ob ene an ígeno somá ico de e mes adul os, as el sac i icio de es os
animales, se ecogió el con enido abomasal y se mezcló con una solución de aga (Sigma) al 1,7
% (p/ ) en agua des ilada a 43 ºC. Es a mezcla se e ió sob e un paño y, as la geli icación, se
incuba on e icalmen e en una cube a con PBS a 37 ºC du an e 90 min. Los e mes iables
ue on desp endiéndose del gel, ecogiéndose en el ondo de la cube a. Pos e io men e ue on
some idos a la ados con sucesi os pases en PBS pa a elimina los posibles es os de aga .
Finalmen e, el an ígeno SA de H. con o us se ob u o as la homogeinización mecánica
(Ul a u ax T18, IKA® We ke) y con ul asonidos (UP100H, Hielsche ) de los e mes adul os en
PBS a 4 ºC. El homogeneizado se cen i ugó a 4.500 g (Cen i uge MPW-65R, MPW) du an e 20
min a 4 ºC, conse ándose el sob enadan e a -20 ºC.
Tabla 6.3 Reac i os p epa ación PBS.
REACTIVO
FÓRMULA
CONCENTRACIÓN
Clo u o de sodio
NaCl (Sigma)
0.123M
Fos a o de po asio
monobásico
KH2PO4 (Sigma)
0.003M
Fos a o disódico
Na2HPO4 (Sigma)
0.01M
En ambos an ígenos la concen ación de p o eínas se de e minó median e el ki Pie ce BCA
(P o ein Assay Ki , The mo Scien i ic).
6.7 ANÁLISIS DE INMUNOABSORCIÓN LIGADO A ENZIMAS (E.L.I.S.A.)
Los ni eles de inmunoglobulinas especí icas de mucus, sue o y/o sob enadan e de cul i o
lin oci a io de cada animal, ue on de e minados median e el análisis de inmunoabso ción
ligado a enzimas (Enzyme Linked Immunoso ben Assay -ELISA). Las placas (Cos a 3369, Co ning)
se incuba on con el an ígeno SA o L3 diluido en ampón ca bona o a pH 9,6 (Tabla 6.4) du an e
24 h a 4 ºC. T as es a incubación se ealiza on es la ados de 5 min con PBS - ween20 (Sigma)
al 0,05 % ( / ) pa a elimina el an ígeno no ijado.

Ma e ial y Mé odos
73
Tabla 6.4 Reac i os pa a la p epa ación de bu e ca bona o.
REACTIVO
FÓRMULA
CONCENTRACIÓN
Bica bona o de sodio
NaHCO3
8,4%
Ca bona o de sodio
NaCO3
18,2%
Agua des ilada
H2O
Has a comple a 100ml
El bloqueo de las eacciones inespecí icas se ealizó median e incubación du an e 45 min a
37 ºC con una solución de albúmina sé ica bo ina al 3 % (p/ ) en PBS, as lo que se epi ie on
los la ados. Las mues as se diluye on en PBS azida de sodio (Sigma) al 0,02 % (p/ ) incubándose
1 h a 37 ºC, seguido pos e io men e de o os es la ados.
Pa a el e elado de la eacción, se añadió el conjugado abbi an i-sheep IgA (Be hyl
Labo a ies INC o AVIVA Sys em Biology Co p.) en PBS, y se incubó 45 min a 37 ºC. Pa a elimina
el conjugado no ijado, se ealiza on o os es la ados. A con inuación, se añadió el sus a o de
la eacción, compues o po 12,2 ml de ácido cí ico (VWR) al 2,1 % (p/ ), 12,8 ml de os a o
sódico (Me ck) al 2,8 % (p/ ), 10 mg de OPD (O-Phenylene Diamine, Sigma) y 35 l de H2O2
(Pan eac), incubándose ap oximadamen e 8 min en oscu idad. Finalmen e, la eacción se enó
median e la adición de 50 l de una solución de ácido sul ú ico (Pan eac) 2 M, dejándolo ac ua
5 min, p ocediéndose a la lec u a de las placas en un lec o de placas de ELISA (Mul iskan Ascen )
a una longi ud de onda de 492 nm.
Como con ol nega i o se u ilizó la mues a, pe inen e según el caso, de un animal no
inoculado y, como con ol posi i o, mues a de un animal p e iamen e inoculado. Las
condiciones de concen ación de an ígeno y diluciones de mues as y conjugado u ilizadas, se
desc ibe en cada capí ulo.
6.8 HISTOLOGÍA
Las mues as de abomaso se deshid a a on y se in il a on con pa a ina median e un
p ocesado isula (Leica TP1050), as lo cual, se incluye on en un bloque de pa a ina y se
co a on con un mic ó omo con un g oso de 5 m. Pos e io men e, es os co es se
despa a ina on y se hid a a on median e pases en una ba e ía de xilol, e anol 100 º, 96º y 70 º
y po úl imo en agua des ilada. Los co es se iñe on con hema oxilina-eosina (Tabla 6.5) pa a
con abiliza los eosinó ilos y los leucoci os globula es, y con azul de oluidina (Tabla 6.6) pa a
con abiliza los mas oci os. Una ez eñidos se p ocedió nue amen e al deshid a ado (dos pases
de 2 min en e anol de 70 º, 96 º y 100 º y en Xilol) y al mon aje en medio DPX (Pan eac).
Las células de las dis in as poblaciones celula es se con abiliza on en 20 campos de 0,0688
mm² a 400 aumen os (40x- 10x) (Olympus BH2) en una zona si uada sob e lámina p opia, pa a
Ma e ial y Mé odos
74
los eosinó ilos, y en la zona apical de la mucosa, pa a los leucoci os globula es (Figu a 6.1). Los
mas oci os se con abiliza on en 20 campos sob e la lámina p opia y en 20 en la zona apical de la
mucosa, conside ándose en los análisis es adís icos la suma de ambas á eas. El esul ado de
cada población se exp esó en células/mm².
Figu a 6.1 Zonas delimi adas dónde se ealiza on los ecuen os.
Tabla 6.5 Hema oxilina-eosina.
REACTIVO
TIEMPO
Hema oxilina de Ha is
15 min
H2O
ACLARADO
Alcohol clo híd ico
4 s
H2O
ACLARADO
Agua Amoniacal
10 s
H2O
15 min
Eosina
4 min
Tabla 6.6 Azul de Toluidina.
REACTIVO
TIEMPO
Azul de Toluidina
(1%)
45 s
Alcohol 96º
Acla ado - Tiempo
de e minado po
con ol posi i o
6.9 INMUNOHISTOQUÍMICA
Las mues as congeladas a -20 ºC ue on p ocesadas con un g oso de 4 m con ayuda de un
c iomic o omo (F igocu N 2800, Reiche Jung). Es os co es de ejidos ijados en po aobje os
a ados p e iamen e con Poli-L- lisina, se deja on seca du an e 30 min y se conse a on a -80
ºC has a su p ocesado. An es de empeza la écnica, los co es se a empe a on a 4 ºC du an e
20 min y se ija on en e anol 100 % (Pan eac) – 1 % H2O2 (Pan eac) du an e 10 min en agi ación.
Pos e io men e se ealiza on 3 la ados de 5 min en agi ación en PBS. T as seca los po aobje os,
se p ocedió al bloqueo de las eacciones inespecí icas median e 30 min de incubación en cáma a
húmeda a empe a u a ambien e con sue o no mal de conejo (Dako) diluido en PBS al 1 %. Los
Ma e ial y Mé odos
75
po aobje os se incuba on pos e io men e du an e 90 min en cáma a húmeda a empe a u a
ambien e con el an icue po p ima io diluido en RPMI 1640 (BioWhi ake ®, Lonza) con Sue o
Fe al Bo ino (SFB) al 5 %. Pos e io men e se epi ie on los 3 la ados en PBS y se seca on los
po aobje os. A con inuación se incuba on las mues as con an icue po secunda io polyclonal
abbi an i-mouse immunoglobulins (IgG) bio inyla ed (Dako), diluido a 1:20 en RPMI-SFB 5 %, y
se incubó du an e 30 min en las mismas condiciones que el an icue po p ima io. Se ealiza on
los 3 la ados en PBS y se seca on los po aobje os, p ocediendo a con inuación a incuba 60 min
en cáma a húmeda y oscu idad a empe a u a ambien e con el complejo a idina-bio ina-
pe oxidasa (ABC, Vec o ) al 1 % en PBS. T as dos la ados en PBS, los co es se incuba on 10 min
con 1 pa e de ampón TRIS y 9 pa es de solución salina (Tabla 6.7) en agi ación a empe a u a
ambien e y se e ela on con 3,3’ – diaminobenzidine e a-hyd ochlo ide hyd a e (Sigma -
Ald ich), diluida 0,035 % (p/ ) en TRIS 0,1 % H2O2. La con a inción se ealizó sume giendo los
po aobje os du an e 0.5 min en hema oxilina de Ha is. T as deshid a a los ejidos, se p ocedió
al mon aje de los mismos en medio DPX.
Las células de las dis in as poblaciones celula es inmunoma cadas ue on con abilizadas po
dos pa ólogos en 20 campos de 0,0688 mm² a 400 aumen os (40x - 10x) (Olympus BH2) en 20
campos sob e la lámina p opia y 20 en la zona apical de la mucosa - zona delimi ada en Figu a
6.1. El esul ado de cada población se exp esó en células/mm². La exp esión de galec ina 11 se
de e minó a 10x en la zona apical de la mucosa, alo ando con una escala de 0 a 4, dónde 0 no
p esen a células ma cadas y 4 es el ejido con mayo ma caje.
Tabla 6.7 Composición ampón TRIS/Solución salina.
REACTIVO
FÓRMULA
CANTIDAD
TRIS (Sigma)
C4H11NO3
60,57g – 500ml dH2O
Ácido clo híd ico (Pan eac) 1N
HCl
Añadi al an e io 350-400ml
has a ajus a a pH 7.6 y
en asa a 1 li o
Clo u o de Sodio
NaCl
8,5 g – 1 li o dH2O
6.10 ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA – WESTERN BLOTTING
La elec oinmuno ans e encia se ealizó con el in de de e mina el econocimien o de las
acciones p o eicas del an igénico somá ico adul o po pa e de la IgA del mucus o
sob enadan e de las células sec e o as de an icue pos (ASC) cul i adas in i o. Pa a ello, se
hicie on elec o o esis del ma cado LMW Calib a ion Ki o SDS (Ame sham Biosciences) y del
an ígeno de SA de H. con o us en un gel SDS-PAGE bajo condiciones de educción ( as some e
las mues as du an e 1 min a 100 ºC) en geles de poliac ilamida al 10 % (Tabla 6.8), a 4 ºC – 100
V cons an e u ilizando una cube a de elec o o esis Mini P o ein® Sys em Te a Cell and
Powe Pac HV™ (BioRad) en ampón ese o io (Tabla 6.8). La ans e encia se ealizó sob e una
Ma e ial y Mé odos
76
memb ana de ni ocelulosa BioT ace®NT (Li e Sciences, Pall Co po a ion) a 100 V cons an e
du an e 1 h a 4 ºC (BioRad) en ampón de ans e encia (Tabla 6.8). La ans e encia se e i icó
iñendo con solución de Ponceau (Sigma) la memb ana. Pos e io men e, la memb ana se co ó
en i as de 6 mm y se la a on 3 eces con PBS con eniendo ween20 (Sigma) 0,05 % ( / ) du an e
5 min. T as es os la ados, se bloquea on las eacciones inespecí icas con albúmina sé ica bo ina
(Albumin F ac ion V om bo ine se um, Me ck) al 3 % (p/ ) incubándose du an e 1 h a 37 ºC,
seguido de 3 nue os la ados. A con inuación, se añadió las mues a (mucus o sob enadan e de
cul i o lin oci a io) y se incubó a 4 ºC oda la noche en agi ación, as lo que se ealiza on o os
3 la ados en PBS- ween20 (Sigma). El conjugado ( abbi an i-sheep IgA, A i a Sys ems Biology
Co p) se incubó du an e 1 h a 37 ºC en agi ación. Pa a elimina el conjugado no ijado a la
memb ana se ealiza on 3 la ados en PBS y se p ocedió al e elado con el ki AEC S aining
(Sigma) du an e 10 min, de nue o en agi ación. La eacción se enó sume giendo las i as en
agua des ilada. Se u iliza on mues as ob enidas de un animal inoculado como con ol posi i o
y un animal sin inocula como con ol nega i o.
Ma e ial y Mé odos
77
Tabla 6.8 Reac i os pa a la p epa ación de los geles y ampones necesa ios pa a la
elec oinmuno ans e encia.
PREPARACIÓN GELES
REACTIVOS
FÓRMULA
GEL SEPARADOR
10 % (ML)
GEL CONCENTRADOR
5 % (ML)
Agua des ilada
H2O
7,37
3,4
Poliac ilamida 30%
-
6,25
0,83
Bu e T is
-
4,75 (1.5M pH 8.8)
0,63 (1M pH6.8)
SDS (Sigma) 10%
C12H25NaO4S
0,187
0,05
APS (Me ck) 10%
(NH4)2S2O8
0,187
0,05
TEMED (Sigma)
C6H16N2
0,0075
0,005
POLIACRILAMIDA 30 %
REACTIVO
FÓRMULA
CANTIDAD
Ac ilamida (Sigma)
C3H5NO
23,04 g
Bis- ac ilamida (sigma)
C7H10N2O2
0,64 g
Agua des ilada
H2O
80 ml
BUFFER TRIS
REACTIVO
FÓRMULA
1.5 M pH 8.8
1M pH 6.8
SDS (Sigma)
C12H25NaO4S
1g
1 g
TRIS (Sigma)
C4H11NO3
45,5 g
15,1 g
Agua des ilada
H2O
En asa 250 ml
En asa 250 ml
0.5 M TRIS – HCl pH6.8
REACTIVO
FÓRMULA
CANTIDAD
TRIS (Sigma)
C4H11NO3
6 g
Agua des ilada
H2O
50 ml
Ácido clo híd ico (Pan eac)
1M
HCl
Has a ajus a pH -
en asa con H2O has a
100ml
TAMPÓN DE CARGA
REACTIVO
FÓRMULA
CANTIDAD
TRIS (Sigma)- HCl (Pan eac)
-
2,.5 ml
Glice ol (Sigma)
C3H8O3
2 ml
2 - Me cap oe anol (Bio-Rad)
HOCH2CH2SH
1 ml
SDS (Sigma) 10%
C12H25NaO4S
4 ml
Azul de B omo enol (Sigma)
0.05% p/
C19H9B 4NaO5S
0.5 ml
TAMPÓN RESERVORIO pH8.3
REACTIVO
FÓRMULA
CANTIDAD
Glicina (Sigma)
C2H5NO2
14.4 g
TRIS (Sigma)
C4H11NO3
3 g
SDS (Sigma)
C12H25NaO4S
1 g
Agua des ilada
H2O
1 l
TAMPÓN TRANSFERENCIA
REACTIVO
FÓRMULA
CANTIDAD
Glicina (Sigma)
C2H5NO2
14.4 g
TRIS (Sigma)
C4H11NO3
3 g
Agua des ilada
H2O
430 ml
Me anol (Pan eac)
CH4O
200 ml
Agua des ilada
H2O
372 ml
6.11 PROCESADO DE IMAGEN
Se cap u ó la imagen de la elec oinmuno as e encia o Wes e n Blo ing con un sis ema de
documen ación de geles (BioRad Molecula Image® GelDoc™ XR+ Imaging Sys em) y
pos e io men e se p ocesa on con el p og ama Image Lab™ (So wa e e sión 2.0.1 BioRad). El

Ma e ial y Mé odos
78
eco e y o ganización de las i as que se mues an en las dis in as imágenes se ealizó con el
p og ama Adobe Pho oshop CS4 Ex ended Ve sión 11.0.
6.12 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Pa a el análisis es adís ico de los da os se u ilizó el so wa e IBM SPSS S a is ics e sión 17
pa a el análisis es adís ico. Los da os co espondien es con el ecuen o de hue os ecales (HGH)
se analiza on as modi ica los median e su ans o mación loga í mica (LOG10+1). Las
compa aciones de a iables hema ológicas en e g upos se ealiza on u ilizando el modelo
gene al lineal (GLM) de medidas epe idas. Po su pa e, los da os pa asi ológicos (ca ga de
e mes, hue os en ú e o, HGH) y de las inmunoglobulinas especí ica se analiza on aplicando el
modelo lineal gene alizado conside ando una dis ibución gamma loga í mica, añadiendo 0,1 a
cada da o de la a iable cuando algún da o enía alo igual a 0 po eque imien os del análisis.
La longi ud de los e mes se analizó ambién con el modelo lineal gene alizado pe o
conside ando una dis ibución no mal lineal. En el análisis es adís ico de las a iables longi ud y
hue os en ú e o se in odujo la a iable animal como co a iable. Se de e mina on los
coe icien es de co elación de Spea man y de eg esión en e las a iables pa asi ológicas,
inmunológicas y/o celula es. P obabilidades con alo es p≤0,05 se conside a on
es adís icamen e signi ica i as.
Capí ulo I
Resumen
s
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
81
CAPÍTULO I. DIFERENCIAS EN SUSCEPTIBILIDAD EN INFECCIONES
NATURALES POR NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN
OVINOS CANARIOS DE PELO Y CANARIOS
1. RESUMEN
Conoce la epidemiología de los pa ási os gas oin es inales pe mi i á es ablece p og amas
de con ol indi idualizados y sos enibles, op imizando el uso de a amien os p e en i os,
llegando quizás, a p escindi de ellos en algunas si uaciones epidemiológicas conc e as.
Ac ualmen e, en nume osas pa es del mundo, los a amien os no son o almen e e icaces po
las esis encias que han desa ollado los pa ási os. Ins au a medidas de con ol al e na i as o,
en su de ec o, a amien os selec i os de aquellos animales que ealmen e lo necesi an, es una
opción plausible, dejando que el es o de animales desa ollen la inmunidad adqui ida y
es ablezcan un equilib io con los pa ási os, pe mi iendo además poblaciones en e ugio que
diluyan los posibles genes esis en es a an ihelmín icos de los pa ási os. En la isla de G an
Cana ia se explo an dos azas o inas, la aza Cana ia (CAN-suscep ible) y la Cana ia de Pelo (CAP-
esis en e), en las que se ha comp obado expe imen almen e que ienen di e encias en
é minos de esis encia a la in ección po Haemonchus con o us (H. con o us), lo que pod ía
se ele an e a la ho a de es ablece a amien os p e en i os. Además, a pesa del pequeño
amaño de la isla, hay impo an es di e encias clima ológicas que pod ían modula de o ma
impo an e la ca ga y la dis ibución de las dis in as especies pa asi a ias en e las dis in as
explo aciones o inas. Po odo ello, se ealizó un es udio epidemiológico de las in ecciones po
nema odos gas oin es inales en e los años 2008 y 2010 en dos g anjas donde con i en ambas
azas o inas, ubicadas una en el Es e a una al i ud de 380 m sob e el ni el del ma (“ emplado-
mode ada”) y la o a en el Su a 147 m de al i ud (“desie o seco”), po lo que se a a de dos
á eas climá icas o almen e di e en es. En o al, se ealiza on 1.299 análisis cop ológicos, con
dos mues eos en cada es ación del año. T ichos ongylus spp. ue el géne o p edominan e,
seguido po las especies Telado sagia ci cumcinc a y, con meno p e alencia, H. con o us en
ambas g anjas.
Los esul ados ob enidos mos a on di e encias en e g anjas en la dinámica de exc eción de
hue os y se obse a on ambién di e encias signi ica i as en los hue os eliminados en e azas,
siendo ambién la aza CAP más esis en e que la CAN en in ecciones na u ales.
Ma e ial y Mé odos
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
88
3.3 PROCESADO DE LAS MUESTRAS DE HECES
El ecuen o de hue os en heces se lle ó a cabo po medio del mé odo de McMas e
modi icado. En algunos mues eos, con las heces que sob a on de cada ecuen o se p epa ó un
“pool” y se cul i a on a empe a u a ambien e du an e 12 días pa a consegui la eclosión de los
hue os y el desa ollo la a io has a el es adio 3, con olando la humedad y emo iendo
egula men e pa a e i a la p oli e ación de hongos. La ecupe ación de las la as se ealizó po
medio del mé odo de Bae mann, con un il ado pos e io (modi icado de MAFF, 1989). La
iden i icación la a ia de nema odos gas oin es inales se ealizó siguiendo las guías desc i as
po an Wyk e al., 2004, u ilizando pa a ello un mic oscopio in e ido (Olympus CKX41) con
cáma a de o os digi al acoplada (P ogRes C12PLUS) que pe mi ió oma las medidas de longi ud
o al y aina de la cola y isualiza la o ma de la “cabeza”. En o al se iden i ica on en cada uno
de los mues eos seleccionados, como mínimo 30 la as elegidas al aza .
3.4 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
La a iable Recuen o de Hue os en Heces (HPG) se ans o mó median e Log10+1 pa a
ap oxima los da os a una dis ibución no mal. El es es adís ico usado pa a el análisis ue el
Modelo Lineal Gene al (GLM) Uni a ian e, eniendo en cuen a como a iables LogEPG o cada
géne o/especie pa ási a (T ichos ongylus spp., Telado sagia ci cumcinc a, o Haemonchus
con o us) según el caso y, como ac o es ijos es ación, aza y año (es a úl ima a iable solo en
la g anja 1). En la g anja 2, la escasa p oducción de hue os en es a egión más á ida, supuso una
meno can idad de la as iden i icadas, po los que no se pudo ealiza el GLM pa a la
iden i icación la a ia. Pa a la g anja 1, con el in de pode ealiza el GLM de la iden i icación,
se usiona on los dos mues eos de cada es ación en una sola a iable. P obabilidades p≤0,05
se conside a on es adís icamen e signi ica i as.

Resul ados
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
89
4. RESULTADOS
4.1 GRANJA 1
4.1.1 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas den o de es ación y de año
Se obse ó ecuen o de hue os en heces signi ica i amen e mayo en el o ino CAN con
espec o a CAP en P ima e a 1 y en In ie no 1 en 2008, en In ie no 2 y P ima e a 1 en 2009 y
en In ie no 2 en el año 2010 (Figu a 4.1a, 4.1b, 4.1c).
Figu a 4.1 Rep esen ación g á ica de los ecuen os de hue os en heces ans o mados a Log10+1 (HPG) de las
dis in as azas (CAP y CAN) jun o con las condiciones de empe a u a máxima-mínima y p ecipi aciones de la zona
en el momen o de la oma de mues as. * Indica p≤0,05 y ** p≤0,01.
0
5
10
15
20
25
30
35
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
In ie no 1 In ie no 2 P ima e a 1 Ve ano 1
HPG (Log10+1)
2010
G anja 1
LogHPG CAP
LogHPG CAN
P ecipi ación
(mm)
Tempe a u a
Máxima (ºC)
Tempe a u a
Mínima (ºC)
0
5
10
15
20
25
30
35
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
P ima e a 1P ima e a 2 Ve ano 1 Ve ano 2 O oño 1 O oño 2 In ie no 1
HPG (Log10+1)
2008
G anja 1 LogHPG CAP
LogHPG CAN
P ecipi ación
(mm)
Tempe a u a
Máxima (ºC)
Tempe a u a
Mínima (ºC)
*
**
0
5
10
15
20
25
30
35
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
In ie no 2 P ima e a 1 P ima e a 2 Ve ano 2 O oño 1 O oño 2
HPG (Log10+1)
2009
G anja 1 LogHPG CAP
LogHPG CAN
P ecipi ación
(mm)
Tempe a u a
Máxima (ºC)
Tempe a u a
Mínima (ºC)
**
**
**
Resul ados
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
90
4.1.2 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas en e años y es aciones
Sin dis inción en años y es aciones, CAN p esen ó signi ica i amen e más hue os que CAP
(p=0,000). A su ez, den o de año, sin dis ingui es aciones, CAN p esen ó signi ica i amen e
más hue os en heces que CAP du an e 2008 y 2009. Den o de es aciones, di e enciando aza
pe o no año, se obse ó un inc emen o signi ica i o en la p oducción de hue os en CAN con
espec o a CAP, a lo la go de odo el o oño e in ie no.
4.1.3 Di e encias en los ecuen os de hue os den o de azas
Den o de aza, CAP no p esen a di e encias signi ica i as en e años. Den o de es aciones
sin conside a el año, en P ima e a 1 se con abiliza on más hue os que el es o de es aciones,
si bien es as di e encias no ue on signi ica i as. En e es aciones den o de año, se obse ó un
inc emen o signi ica i o de los ecuen os de hue os en P ima e a 1 con espec o In ie no 1,
In ie no 2 y Ve ano 1 en el año 2010. Es deci , el inicio de la p ima e a es el momen o en el que
suelen exc e a más hue os de pa ási os los animales de es a aza en es a explo ación.
Po o o lado CAN p esen ó a modo gene al un ecuen o de hue os mayo en 2009 espec o
a 2010. En cuan o a es aciones sin conside a el año como ac o , p esen ó un mayo ecuen o
de hue os In ie no 2, siendo solo es adís icamen e signi ica i o con espec o a P ima e a 2. Sin
emba go den o de año, sólo se obse ó un inc emen o signi ica i o de in ie no 2 con espec o
in ie no 1 en el año 2010.
4.1.4 Iden i icación La a ia
El géne o y especies de nema odos gas oin es inales p edominan es ue on T ichos ongylus
spp., Telado sagia ci cumcinc a y Haemonchus con o us. Dada la baja p e alencia (8-10%), no
se u ie on en cuen a en el análisis de los da os la iden i icación de la as de Coope ia cu icei
(una ocasión) y de Bunos omum spp. (dos ocasiones). El géne o p edominan e ue
T ichos ongylus spp. en odos los mues eos, con una p e alencia casi siemp e supe io al 50%
(Figu a 4.2), seguido po Telado sagia ci cumcinc a y Haemonchus con o us.
T ichos ongylus spp. globalmen e, no p esen a di e encias signi ica i as en su ecuencia de
apa ición en e años y ampoco en e es aciones. En e es aciones den o de año ampoco
p esen a di e encias signi ica i as desde el pun o de is a es adís ico.
Telado sagia ci cumcinc a, sin conside a las es aciones como ac o , mos ó p e alencias
signi ica i amen e mayo es el año 2008, en compa ación con los años 2009 y 2010. Aunque no
ue es adís icamen e signi ica i o (p=0.092), 2010 p esen ó mayo p e alencia que 2009. Es
deci , la p esencia del pa ási o a ió signi ica i amen e en e años. Den o de es aciones, sin
Resul ados
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
91
ene en cuen a el año, se obse a on p e alencias signi ica i amen e mayo es en P ima e a.
Tan o en In ie no como en Ve ano ue on ambién signi ica i amen e mayo es que en O oño,
siendo po an o es a es ación en la que se de ec ó con menos ecuencia es e pa ási o.
Haemonchus con o us no mos ó di e encias signi ica i as en e años sin conside a las
es aciones. Del mismo modo, no mos ó di e encias signi ica i as en e es aciones sin ene en
cuen a año. Tampoco mos ó di e encias en e es aciones den o de año. Es deci ,
es adís icamen e no ue on signi ica i as las pequeñas luc uaciones en su p e alencia.
Figu a 4.2 Rep esen ación g á ica en columnas del % de la as del géne o T ichos ongylus spp., y de las especies
Telado sagia ci cumcinc a y Haemonchus con o us ob enidas as la iden i icación la a ia de los cop ocul i os de
la g anja 1 en los mues eos de los años 2008, 2009 y 2010, con ep esen ación en líneas y pun os de las condiciones
de empe a u a máxima-mínima (ºC) y p ecipi aciones (mm) en el momen o del mues eo. La ba a neg a en la
base del g á ico indica la sepa ación en e años.
4.2 GRANJA 2
4.2.1 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas den o de es ación
Los ecuen os de hue os en heces ue on signi ica i amen e mayo es en el o ino CAN, con
espec o a CAP, en In ie no 1, Ve ano 2 y O oño 1. (Figu a 4.3). Al analiza los da os de los
ecuen os de hue os en heces de los co de os, se obse ó un inc emen o signi ica i o en la aza
CAN con espec o a CAP en Ve ano 2 y O oño 1.
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100
% La as L3
G anja 1
Haemonchus
con o us
Telado sagia
ci cumcinc a
T ichos ongylus
spp
P ecipi ación
(mm)
Tempe a u a
Máxima (ºC)
Tempe a u a
Mínima(ºC)
2008
2009
2010
Resul ados
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
92
Figu a 4.3 Rep esen ación g á ica de los ecuen os de hue os en heces ans o mados a Log10+1 (HPG de las
dis in as azas (CAP y CAN) jun o con las condiciones de empe a u a máxima-mínima y p ecipi aciones de la zona
en el momen o de la oma de mues as. * Indica p≤0,05 y ** p≤0,01.
4.2.2 Di e encias en los ecuen os de hue os en e azas y es aciones
Globalmen e los o inos de aza CAN p esen a on mayo es ecuen os de hue os que los CAP
(p=0,000). En e es aciones, la que iene un ecuen o mayo es O oño 1, siendo es e inc emen o
signi ica i o con espec o In ie no 2, P ima e a 1, P ima e a 2, Ve ano 1 y O oño 2. Aunque la
di e encia no es signi ica i a es adís icamen e, las es acion que meno ecuen o p esen ó ue
P ima e a 1.
4.2.3 Di e encias en los ecuen os de hue os den o de azas
Den o de aza, CAP - apenas exc e a on hue os en es a explo ación- no mos ó di e encias
signi ica i as en e es aciones. Po o o lado, pa a CAN el O oño 1 esul ó se la es ación que
mayo es ecuen os p esen ó, siendo es adís icamen e supe io es con espec o In ie no 2,
P ima e a 1, P ima e a 2, Ve ano 1 y O oño 2. Den o de es a aza, In ie no 2 ue la es ación en
la que meno , aunque no es adís icamen e signi ica i o, ecuen o de hue os en heces se
egis ó.
4.2.4 Iden i icación La a ia
El géne o de nema odos gas oin es inal p edominan e ue T ichos ongylus spp. seguido de
la especie Telado sagia ci cumcinc a. Mucho más es igial ue la p esencia de Haemonchus
con o us (Figu a 4.4).
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0,2
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1
1,2
1,4
1,6
1,8
In ie no 1 In ie no 2 P ima e a 1P ima e a 2 Ve ano 1 Ve ano 2 O oño 1 O oño 2
HPG (Log10+1)
2008
G anja 2
LogHPG CAP
LogHPG CAN
P ecipi ación
(mm)
Tempe a u a
Máxima (ºC)
Tempe a u a
Mínima (ºC)
**
**
**
Resul ados
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
93
Figu a 4.4 Rep esen ación g á ica en columnas de la iden i icación la a ia ob enida as el cop ocul i o de las heces
ecogidas en la g anja 2 en los mues eos del año 2008.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
P ima e a 1 O oño 1
% La as L3
G anja 2
Haemonchus con o us
Telado sagia ci cumcinc a
T ichos ongylus spp

Discusión
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
94
5. DISCUSIÓN
Los ecuen os de hue os en heces (HGH) son u ilizados como indicado de esis encia a
pa ási os po su elación con la ca ga pa asi a ia (Macchioni e al., 2007). En es e sen ido, en
es udios compa ados en e algunas azas o inas se ha obse ado esis encia a nema odos
gas oin es inales, ya sea en in ecciones na u ales o expe imen ales. En e los ejemplos, se
pueden des aca a la Red Maasai compa ada con Do pe (Mugambi e al. 1996, 1997, 2005;
Bake a al. 2004) S -C oix con Do se (Gamble y Zajac, 1992; Bu ke y Mille , 2004), San a Inés
compa ada con Ile F ance y Sul olk (Ama an e e al. 2004) Ba bados Black Belly con INRA 401
(G une e al. 2003; Aumon e al., 2003; Te e e e al., 2007a), la Flo ida Na i e con Rambouille
(Radhak ishnan e al., 1972; Ama an e e al., 1999), Texel con Su olk (Good e al., 2006),
Ka ahdin compa ada con mes izos de Do se y de Do pe (Vanimise i e al., 2004b) Gul Coas
Na i e con Sul olk (Mille e al., 1998) Lohi compa ada con Thalli y Kachhi (Saddiqi e al., 2010)
o C iolla Lanada con Co iedale (B ica ello e al., 2004). En es a línea, nues o g upo demos ó
que los o inos de la aza Cana io de Pelo son más esis en es que los o inos de la aza Cana ia
en inoculaciones expe imen ales con Haemonchus con o us (González e al., 2008). Con el in
de obse a si es as di e encias en e azas ambién es aban p esen es en in ecciones na u ales,
se ealizó es e es udio de campo en el que, e ec i amen e, se obse ó que los o inos de aza
CAP p esen a on meno es HGH que los o inos de la aza CAN, demos ándose que ambién son
más esis en es en in ecciones na u ales. Es a di e encia en HGH no solo se obse ó en los
indi iduos adul os, sino que ambién se obse a on di e encias signi ica i as en los HGH de los
co de os, como se desc ibió en el apa ado de esul ados de la g anja 2, lo que sugie e que los
co de os ambién son más esis en es. Es e enómeno ambién es á desc i o en co de os de
o as azas esis en es como Ba bados Black Belly (G une e al., 2003), Red Maasai (Mugambi
e al., 1996), Flo ida Na i e (Radhak ishnan e al., 1972) y/o Gul Coas Na i e (Li e al., 2001),
lo que pod ía suge i una espues a más emp ana a la in ección po nema odos
gas oin es inales de lo desc i o en la bibliog a ía en azas come ciales (Smi h e al., 1985).
Ac ualmen e, las esis encias po pa e de los pa ási os a los di e en es a amien os desc i as
en a ios países ( an Wyk e al., 1999; Ba ley e al., 2003; Če ňanská e al., 2006; Coles e al.,
2006; Ál a ez-Sánchez e al., 2006; Ceza e al., 2010; Saeed e al., 2010; Ma ínez-Vallada es
e al., 2013a; Lyndal-Mu phy e al., 2014; Liébano-He nández e al., 2015; Van den B om e
al., 2015) es án comp ome iendo las p oducciones ganade as, po lo que es ablece un
adecuado calenda io de a amien o y/o es ablece medidas de con ol al e na i as, en e los
que se encuen a la selección de azas/indi iduos esis en es, pod ía pe mi i ala ga la ida ú il
de los á macos. Aplica un a amien o co ec o iene g an impo ancia y selecciona los
Discusión
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
95
c i e ios a segui en es os a amien os se á undamen al. Así Ped ei a e al., 2006, obse a on
que las g anjas que adminis aban a amien os an ihelmín icos basados en la expe iencia del
g anje o p esen a on mayo es ecuen os de hue os en heces que aquellas que los aplican
siguiendo el c i e io e e ina io o basados en la ecomendación come cial.
Molina e al., 1997, basándose en el abajo de Rod íguez-Ponce e al., 1995 y López-Gómez
y López-Gómez, 1959, desc iben 4 zonas con di e encias clima ológicas en la isla en un es udio
epidemiológico ealizado en g anjas de cab as de G an Cana ia. En base a es a desc ipción, la
g anja 1 encuad a ía den o de la zona de empe a u a “ emplada y sua e” y la g anja 2 es a ía
ubicada en un clima de “desé ico seco” con empe a u as más ele adas y meno es
p ecipi aciones. Obse ando la e olución de la pa asi ología a lo la go de los es años de
mues eo de la g anja 1, sin ene en cuen a las es aciones, solo hubo di e encias en los
ecuen os de hue os en e azas en el año 2008 y 2009, quizás po que el mues eo del año 2010
no ue comple o. En odo caso, y aunque debe alida se en el u u o, es o sugie e que los planes
de a amien os quimiop o ilác icos debe ían amolda se a las condiciones conc e as de cada
año. Po o o lado, compa ando azas den o de es aciones sin ene en cuen a los es años en
la g anja 1, CAN p esen ó ecuen os signi ica i amen e mayo es en O oño e In ie no con
espec o a CAP, co espondiendo con los pe iodos con mayo es p ecipi aciones (Figu a 4.1), lo
que a o ece ía la pa asi osis, haciendo más e iden e la di e encia en la
suscep ibilidad/ esis encia. Además, es e pe iodo coincide con la época de pa os en la aza
CAN. Compa ando las dos g anjas en el año 2008, la aza CAP en la g anja 2 iene un ecuen o
de 4±2 hpg en e a los 10±4 hpg de la g anja 1, no obs an e, a pesa de que son ecuen os muy
bajos po la esis encia de es a aza, y pese a no exis i di e encias signi ica i as po la a iación
indi idual, sugie e que las di e encias climá icas No e-Su a o ecidas po la o mación del ma
de nubes que sua izan las empe a u as y a o ecen la e ención de la humedad y
p ecipi aciones en la zona No e de la isla, in luyen en el ciclo de los pa ási os. Es os esul ados
con as an con los de Molina e al., 1997, que obse a on que los animales de la zona desé ica
p esen a on mayo es ca gas que los animales de la zona de empe a u as sua es, sin emba go
no se puede hace una compa a i a di ec a con es e es udio, pues los hospedado es y la a iable
pa asi ológica cuan i icada - e mes adul os- son di e en es. Algo simila sucede con los o inos
de aza CAN en la g anja 2, sal o un pico de exc eción de hue os obse ado en es a g anja más
me idional, que pod ía a ibui se a la in oducción de animales del municipio de Valleseco, con
mucha más plu iome ía. Es os mo imien os de animales son una cons an e en los modelos de
p oducción adicionales a aigados en las islas.
Discusión
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
96
Las di e encias en e azas obse adas en ambas g anjas en las p e alencias apa ecen en los
momen os en los que aumen an los ecuen os de hue os de nema odos gas oin es inales en la
aza CAN y coinciden con inc emen os de las p ecipi aciones, con descensos de las empe a u as
y con el pe ipa o (Figu as 4.1 y 4.3), po lo que ienen luga cuando las condiciones son más
a o ables pa a los pa ási os (P oc e y Gibbs, 1968; O’Conno e al., 2006). Visualizando los
ecuen os en cada aza, los ecuen os en la aza CAP se man u ie on bajos (<50 hue os po
g amo en la g anja 1 – Figu a 4.1– y <10 en la g anja 2 – Figu a 4.3) y no se obse a on di e encias
in e anuales, lo que sugie e que los a amien os en es a aza pod ían limi a se, y se debe ía
alo a si es as pequeñas ca gas ealmen e p oducen pe didas p oduc i as que compensen los
cos es de los a amien os en aquellas es aciones del año dónde se p oducen los picos pun uales
(Figu a 4.1) como es el caso de la P ima e a en la g anja 1 (2010) y, de la misma mane a, es muy
dudosa la necesidad de a amien os en la g anja 2. Es deci , dependiendo de la zona de c ía del
ganado, pod ía modi ica se el plan quimiop o ilác ico en g anjas que explo en CAP.
Po el con a io en los o inos CAN, los ecuen os son algo más ele ados, aunque ambién
bas an e bajos si se compa an con o os es udios ealizados con o as azas en o as si uaciones
geog á icas (Mugambi e al., 1997; Bake e al., 2004; Ama an e e al., 2004). Aunque se
debe ían es ima las consecuencias que es as ca gas pueden ene en los endimien os
p oduc i os de los animales de es a aza, en caso de aplica a amien os con end ía p e eni
el inc emen o en los ecuen os expe imen ados en la g anja 1 – y po an o en la egión de clima
“ emplado-sua e”- a p incipios del in ie no y, a inales del e ano en la g anja 2 -clima más seco.
De odos modos, como se discu ió an e io men e, con iene señala que el pico que se obse a
en la Figu a 4.3 en la g anja 2, pudo a o ece se po la in oducción de animales sin despa asi a
p oceden es de una explo ación si uada en un municipio de la zona No e de la isla (más
húmeda) en Ve ano 2 (inicio del pico – Figu a 4.3), iéndose p obablemen e los pa ási os
a o ecidos po las condiciones climá icas y isiológicas (pe ipa o) de los animales. O a
obse ación que no debe pasa desape cibida, es la caída de ecuen os en ambas azas en
In ie no 1 de 2010 en la g anja 1, que pod ía suge i la adminis ación de un a amien o
an ihelmín ico que el ganade o no haya comunicado.
Los p incipales géne os/especies pa ási as iden i icadas as el cop ocul i o ue on
T ichos ongylus spp., T. ci cumcinc a y H. con o us. La p esencia de es as es especies en
elación con los bajos ecuen os de hue os en heces en CAP con espec o a CAN, sugie en que
la aza CAP pod ía se esis en e ambién a T ichos ongylus spp. y a Telado sagia ci cumcinc a.
En es e sen ido, G une e al., 2003 demos a on que los co de os Ba bados Black Belly,
econocidos como esis en es a in ecciones po Haemonchus con o us, son ambién esis en es
Discusión
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
97
a T ichos ongylus colub i o mis y, en meno medida, a Telado sagia ci cumcinc a. T abajos
expe imen ales u u os pe mi i án cons a a si, al y como es os da os sugie en, los o inos de
aza CAP son más esis en es que los CAN a in ecciones expe imen ales po T ichos ongylus spp
o po T. ci cumcinc a.
Es bien conocido que la humedad y empe a u a son ac o es de e minan es pa a el
desa ollo y supe i encia de los es adios de ida lib e de es as especies pa ási as. O’Conno e
al., 2006, ci an a modo de esumen como empe a u as óp imas pa a el desa ollo desde el
hue o no emb ionado has a el es adio in ec an e L3 de T. colub i o mis, de 22 a 33ºC, siendo
ap oximadamen e en e 25 y 30ºC el mejo ango; pa a T. ci cumcinc a de 16 a 30ºC,
conside ándose ap oximadamen e en e 21 y 25ºC el mejo ango y, pa a H. con o us de 25 a
37ºC, siendo ap oximadamen e el ango de empe a u as más adecuado en e 31 y 34ºC; si bien
las es especies se en a ec adas po la desecación, los es adios p e-in ec an es de H. con o us
son los más suscep ibles a es a (O’Conno e al., 2006). Po o o lado Lea hwick, 2013, a a és
de un modelo ma emá ico usando como base de da os a ias e e encias bibliog á icas, es imó
que la empe a u a óp ima de T. colub i o mis es 18ºC, de T. ci cumcinc a es 16ºC y de H.
con o us es 22ºC. En es e sen ido, la g anja 1 y la g anja 2 siemp e se man u ie on den o de
es os angos, si bien la g anja 2 p esen ó siemp e las mayo es empe a u as y p ác icamen e sin
p ecipi aciones odo el año, lo que iene e lejado en los bajos ecuen os de hue os en heces
en es a g anja. La al a de heladas y la p o ección a la insolación que supone la b uma que
p oducen los alisios, pueden explica que exis an pa ási os odo el año en la g anja 1, y po an o,
en explo aciones ubicadas en el á ea de empe a u as “ emplada y sua e”. El p incipal ac o
que modula las ca gas pa asi a ias en es as dos egiones geog á icas ha sido la plu iosidad y
como consecuencia la humedad, al y como obse a on Ma ínez-Vallada es e al., 2013b o
como sugie en O’Conno e al., 2006, quienes conside an que en egiones con climas de
empe a u as cálidas, es la humedad el p incipal ac o que modula el desa ollo de las ases de
ida lib e a la o ma in ec an e.
En la g anja 1 T ichos ongylus spp. ue el géne o p edominan e a lo la go de los mues eos,
seguido po luc uaciones en la p e alencia de T. ci cumcinc a y H. con o us (Figu a 4.2), si bien
la única especie que mos ó di e encias signi ica i as en e años a lo la go del es udio ue T.
ci cumcinc a, siendo más ecuen e en la es ación de P ima e a y en el año 2008, a lo la go de
los o os dos años luc úa, pa eciendo que aumen a su p e alencia cuando las p ecipi aciones
son bajas, simila a lo obse ado po Molina e al., 1997, quizás po la meno dependencia a la
humedad en compa ación con H. con o us y, en meno medida, T ichos ongylus spp.
(O’Conno e al., 2006). Po o o lado, H. con o us pa ece luc ua con las empe a u as y
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
In oducción
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
104
2. INTRODUCCIÓN
La esis encia en e a nema odos gas oin es inales se ca ac e iza po una educción en la
ecundidad, del amaño de los e mes y de la ca ga pa asi a ia. La ecundidad se ha
co elacionado posi i amen e con la longi ud y ca ga pa asi a ia en Telado sagia ci cumcinc a
(S ea e al., 1995; S ea y Bishop, 1999; S ea e al., 1999) con longi ud en in ecciones po H.
con o us (Rac li e y Lejamb e, 1971; Lac oux e al., 2006; Rowe e al., 2008). La educción en
la longi ud de los e mes, y en consecuencia de su ecundidad (S ea y Bishop, 1999), es á
asociado p incipalmen e a la p oducción local de IgA especí ica o ien ada a e apas la a ias del
pa ási o en in ecciones po T. ci cumcinc a (S ea e al., 1996; Ma ínez Vallada es e al., 2005).
En in ecciones po H. con o us, la IgA especí ica en e a es adios la a ios se asocia igualmen e
a educciones en la longi ud de los e mes (Lac oux e al., 2006) y a la ecundidad (Gill e al.,
1993a; S ain y S ea , 2001; Ama an e e al., 2005). Sin emba go, las educciones en las ca gas
pa asi a ias se suelen incula con educciones en el es ablecimien o la a io, ya sea median e
un echazo a dío, mediado po los eosinó ilos –p obablemen e median e mecanismos ADCC
(An ibody Dependen Cell media ed Ci o oxici y)- (Rainbi d e al., 1998; Balic e al., 2000a;
2000b; 2006; Nisbe e al., 2015) u o o de espues a más ápida, inculado a los leucoci os
globula es, que impedi ía a las la as pene a la mucosa, enómeno conocido como
au ocu ación (Balic e al., 2000a; 2000b; 2002).
En es udios p e ios, se ha cons a ado que no hay di e encias en el desa ollo de la in ección
expe imen al con H. con o us a los 7 dpi en e dos azas o inas au óc onas cana ias, el o ino
CAP y el CAN, que sí son e iden es, con di e encias signi ica i as a los 28 dpi en ca ga pa asi a ia,
longi ud y ecundidad de los e mes (González e al., 2008; He nández, 2011). Es o con as a
con la in o mación ecopilada en o as azas o inas come ciales, en las que se ha es ipulado que
es el es adio la a io (L3) con a el que se es ablece la espues a p o ec o a. El obje i o de es e
abajo es cons a a si en un pun o an e io -21 dpi- de la in ección expe imen al con 20.000 L3
de H. con o us, se obse an di e encias en e azas en la e olución de la in ección que pe mi an
aco a mejo el momen o en el que se es ablecen los mecanismos p o ec o es de la aza
esis en e CAP, así como ca ac e iza es a espues a p o ec o a, incluyendo la p oducción de
inmunoglobulinas en los nódulos lin á icos locales, las poblaciones celula es de la pa ed del
abomaso y la capacidad del mucus del abomaso pa a educi la mo ilidad de los pa ási os.

CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Ma e ial y Mé odos
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
105
3. MATERIAL Y MÉTODOS
3.1 ANIMALES Y DISEÑO EXPERIMENTAL
Diecinue e co de os machos de la aza CAP y dieciocho de la aza CAN ue on adqui idos en
el momen o del des e e en g anjas de G an Cana ia y alojados en las ins alaciones de la Facul ad
de Ve e ina ia de la Uni e sidad de Las Palmas de G an Cana ia (España) has a
ap oximadamen e el año de edad. Los animales se alimen a on con una ación come cial de
g anulado pa a o inos y agua ad libi um du an e odo el pe iodo expe imen al. A su llegada a
las ins alaciones, se despa asi a on con le amisol (Cy e , Fo Dodge, España) a la dosis
ecomendada (1 ml/10 kg de peso co po al), man eniéndose lib es de pa ási os has a el inicio
de la expe iencia. Ca o ce animales de la aza CAP y ece de la aza CAN ue on inoculados
in a uminalmen e con 20.000 L3 de H. con o us con el in de ep oduci in ecciones p e ias
e ec uadas po nues o g upo (González e al., 2008; He nández, 2011). Cinco animales sin
in ec a de cada aza ue on sac i icados como con oles; 6 animales de la aza CAP y 5 de la aza
CAN ue on sac i icados a los 7 dpi y, 8 animales de cada aza ue on sac i icados a los 21 dpi.
Tal y como se ha desc i o de alladamen e en el capí ulo de ma e ial y mé odos, se u ilizó la cepa
de H. con o us donada po los D es. Knox y Ba ley (Mo edun Resea ch Ins i u e, Edimbu go,
Reino Unido).
3.2 MUESTRAS SANGUÍNEAS
Siguiendo el p ocedimien o desc i o en el capí ulo gene al de Ma e ial y Mé odos, se ex ajo
sang e a los animales los días 0, 7, 14 y 21 dpi pa a la hema ología y la ob ención de sue o.
3.3 ANÁLISIS COPROLÓGICOS
Se oma on heces di ec amen e del ec o desde el día 16 pi has a el día p e io al sac i icio
pa a el ecuen o de hue os median e la écnica de McMas e modi icado (MAFF, 1989).
3.4 RECOGIDA DE MUESTRAS TRAS EL SACRIFICIO
T as el sac i icio de los animales se aisla on los abomasos, se oma on mues as de ejido de
la cu a u a mayo y se ab ie on pa a ecoge mues as de con enido abomasal, mucus y
mucosa, al y como se desc ibe en el capí ulo de Ma e ial y Mé odos.
3.5 ANÁLISIS PARASITOLÓGICOS
Se con abiliza on los e mes de las alícuo as y se midie on alea o iamen e 30 e mes a los 7
dpi y 30 e mes hemb as a los 21 dpi, de las que ambién se con abiliza on los hue os in aú e o,
siguiendo el p ocedimien o desc i o en el capí ulo de Ma e ial y Mé odos. La suma de las la as
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Ma e ial y Mé odos
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
106
ob enidas as la diges ión o in amu ales y las la as localizadas en la luz del abomaso
co esponde con ca ga pa asi a ia de la Tabla 4.1.
3.6 CULTIVO DE CÉLULAS SECRETORAS DE ANTICUERPOS (ASC)
T as obse a asociaciones nega i as en e la IgA de mucus especí ica de e mes adul os y la
longi ud en los o inos Cana ios de Pelo en una expe iencia p e ia en la que se sac i ica on los
animales a los 28 dpi (He nández, 2011), se p opone alo a si hay di e encias cuan i a i as y
cuali a i as en el econocimien o an igénico de los animales esis en es a pa i de los
sob enadan es de cul i o de lin oci os de los nódulos lin á icos abomasales en los dos momen os
del sac i icio, que ep esen an la p oducción especí ica de inmunoglobulinas en e a dos
es adios pa asi a ios di e en es (la a ios/adul os). Pa a ello, as el sac i icio de los animales se
ecogió un nódulo lin á ico abomasal pa a el cul i o lin oci a io. Una ez que se e i ó la g asa
de los nódulos lin á icos, se mace a on con ayuda del émbolo de una je inguilla y se la a on es
eces en RPMI 1640 suplemen ado (Tabla 3.1) cen i ugando a 250g (Mix asel P Selec a®)
du an e 20 minu os, en condiciones de es e ilidad. Pos e io men e, as ajus a la concen ación
a 5x106 células/ml, los lin oci os se cul i a on en medio RPMI 1640 suplemen ado du an e 96
ho as (37ºC; 5% de CO2) en placas de cul i o celula (Cos a ® 3526, Co ning Inco po a ed) de 24
pocillos. Finalmen e se ecogió el sob enadan e, p e ia cen i ugación a 1500g (Mix asel P
Selec a®) du an e 3 minu os, y se almacenó a -20ºC has a su uso (mod. Bowles e al. 1995).
Tabla 3.1 Suplemen ación del medio RPMI 1640.
REACTIVO
PROPORCIÓN
Penicilina/es ep omicina
2%
L-glu amina
1%
Sue o Fe al Bo ino Inac i ado (SFB)
10%
3.7 ANÁLISIS DE INMUNOABSORCIÓN LIGADO A ENZIMAS (E.L.I.S.A.)
Los ni eles de IgA e IgG especí icas en mucus y A.S.C., ue on de e minados median e el
análisis de E.L.I.S.A. siguiendo el p o ocolo desc i o en el capí ulo de Ma e ial y Mé odos. Las
condiciones especí icas seguidas en es e abajo se ecogen en la Tabla 3.2.
Tabla 3.2 Relación de condiciones pa a el an ígeno, mues a y conjugado según de e minación.
MUESTRA
INMUNOGLOBULINA
CONCENTRACIÓN
ANTÍGENO
DILUCIÓN
MUESTRA
DILUCIÓN
CONJUGADO
Mucus
IgA
g/ml L3
1:2
1:100

g/ml SA
1:5
1:100

IgG
5g/ml L3
1:5
1:1000
5g/ml SA
1:5
1:1000
ASC
IgA
g/ml L3
1:1
1:100
g/ml SA
1:1
1:100
IgG
g/ml L3
1:1
1:1000
g/ml SA
1:1
1:1000
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Ma e ial y Mé odos
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
107
3.8 ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA
La elec oinmuno ans e encia de an ígeno SA con los ASC se ealizó con el in de alo a el
econocimien o de acciones p o eicas del an ígeno po pa e de la IgA p oducida localmen e.
Pa a ello, se ealizó la écnica al y como es á desc i a en el capí ulo de Ma e ial y Mé odos. Las
condiciones especí icas seguidas en es e capí ulo se ecogen en la Tabla 3.3.
Tabla 3.3 Relación de condiciones pa a el an ígeno, mues a y conjugado.
MUESTRA
CONCENTRACIÓN
ANTÍGENO
DILUCIÓN
MUESTRA
DILUCIÓN
CONJUGADO
Sob enadan e
de A.S.C.
1,5g/l SA
1:1
1:500 IgA
3.9 PROCESADO DE IMAGEN
Se cap u ó la imagen de la elec oinmuno ans e encia con un ansiluminado de luz
ul a iole a (BioRad Molecula Image® GelDoc™ XR+ Imaging Sys em) y pos e io men e se
p ocesa on las imágenes con el p og ama Image Lab™ (So wa e e sion 2.0.1 BioRad). El co e
y o ganización de las i as que se mues an en la igu a 4.6 se ealizó con el p og ama Adobe
Pho oshop CS4 Ex ended Ve sión 11.0.
3.10 HISTOLOGÍA E INMUNOHISTOQUÍMICA
Las mues as de abomaso omadas as el sac i icio ue on p ocesadas (capí ulo Ma e ial y
Mé odos) y se iden i icó y con abiliza on en la mucosa del abomaso los eosinó ilos, leucoci os
globula es, lin oci os T+,WC1+, CD4+, CD8+, CD1+, CD2+, CD5+, MHC-II+, CD45RA+, galec ina 11+
y galec ina 14+.
3.11 ENSAYO DE MIGRACIÓN LARVARIA (LMIA)
El ensayo de mig ación la a ia (Ko ze e al., 2006) se ealizó con el in de alo a la ac i idad
inhibi o ia del mucus. Inicialmen e se incubó du an e 24 ho as a 37ºC con humedad, en una
placa de 96 pocillos (Cos a ® 3596, Co ning Inco po a ed) y po duplicado, 50 l de una mezcla
o mada po las L3 de H. con o us (ap oximadamen e 50 la as/25 l) suplemen ada con
an o e icina B (25 μg/ml) y penicilina/es ep omicina (100U/ml y 100 μg/ml) con el mucus (25
l) – con abilizándose las la as po pocillo an es de deposi a el mucus. Pa alelamen e, se
p epa ó y se man u o a empe a u a ambien e la placa de la ado y, ambién a empe a u a
ambien e pe o en condiciones de humedad, la placa de mig ación con il o Millipo e
Mul isc een®- MESH 20 μm (Millipo e). Los pocillos de la placa de la ado con enían 250 l de
una mezcla con las mismas condiciones que la placa de incubación a excepción de las la as. En
la placa de mig ación, sob e el il o a a és del cual an a mig a las la as, se dispensó 75
l/pocillo de aga (0.125% p/ , Sigma). Pasadas las 24 ho as, se añadie on 170 μl de la solución
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Ma e ial y Mé odos
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
108
de cada pocillo de la placa de la ado en la base de la placa de mig ación. Se colocó la placa de
los il os sob e es a y se incubó a 37ºC du an e 2 ho as con el in de que el aga se equilib a a
con la solución. T as es a incubación, se añadió los 50 μl de la placa de incubación a la placa de
los il os con el aga , espe ando po supues o el o den de los pocillos, la ando pos e io men e
cada pocillo de la placa de incubación con 50 μl de la placa de la ado pa a ecupe a las posibles
la as que hayan podido queda en ellos. La placa de mig ación con las la as se incubó 24 ho as
a 37ºC con humedad. Pasadas las 24 ho as de incubación, se ealizó la lec u a, con abilizando
las la as que hayan mig ado a a és del aga y il o y, po an o, se encuen en deposi adas
en la base de las placas de mig ación.
Figu a 3.1 Rep esen ación inal de un pocillo de la placa de mig ación.
3.12 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Se u ilizó el so wa e IBM SPSS S a is ics e sión 17 pa a el análisis es adís ico. El animal CAP
52, pe enecien e al g upo 7 dpi, se desca ó del análisis es adís ico po su des iación de la
endencia de la aza, alo a ípico (Ou lie ). Los da os del ecuen o de hue os en heces a día 20
dpi (HGH20) se analiza on as no maliza los p e ia ans o mación a LOG10+1. Los da os de
ca ga pa asi a ia, hue os en ú e o, HGH20 y de las inmunoglobulinas se analiza on aplicando el
modelo lineal gene alizado conside ando una dis ibución gamma loga í mica y el mé odo de
es imación New on Raphson con escala X2 de Pea son, sal o la IgA de mucus especí ica SA que
se analizó con el mé odo Híb ido. Pa a pode aplica la dis ibución gamma, a aquellas a iables
en la que algún da o u ie a alo 0, se añadió 0.1 a odos los da os de la a iable. En el modelo
de la a iable hue os en ú e o se in odujo la a iable “animal” como co a iable. La longi ud de
los e mes se analizó aplicando el modelo lineal gene alizado sob e odas las mediciones
e ec uadas, pe o conside ando una dis ibución no mal lineal y el mé odo de es imación Híb ido
e inco po ando la a iable “animal” como co a iable. Los ecuen os de células de los abomasos
se analiza on po medio del modelo gene al lineal (GLM) uni a ian e. Las compa aciones de
Mucus+ L3+ An o e icina B –
Penicilina/es ep omicina
sob e el Aga
Aga sob e el il o
L3 que han mig ado
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Ma e ial y Mé odos
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
109
hema oc i o, p o eínas plasmá icas y eosinó ilos en sang e se ealiza on u ilizando el GLM de
medidas epe idas. LMIA ue analizado median e una p ueba no pa amé ica, conc e amen e
median e la U de Mann Whi ney. Las asociaciones en e las dis in as a iables se alo a on
median e la de e minación de los coe icien es de co elación de Spea man en e da os
pa asi ológicos, inmunológicos y/o celula es ob enidos y median e análisis de eg esiones en e
a iables. P obabilidades p≤0,05 se conside a on es adís icamen e signi ica i as.

CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Resul ados
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
110
4. RESULTADOS
4.1 PARASITOLOGÍA
No se obse a on di e encias signi ica i as en e azas a los 7 dpi ni en las ca gas ni en la
longi ud de las la as (Tabla 4.1). A los 21 dpi los o inos CAP mos a on educciones signi ica i as
en los ecuen os de e mes al compa a los con los CAN. Aunque inicialmen e se obse an
di e encias aciales en longi ud y ecundidad, es as pa ecen debe se a la a iabilidad indi idual
pues desapa ecen es as di e encias en e azas cuando se incluye la a iable ca egó ica animal
como co a iable (Tabla 4.1).
Uno de los animales de aza CAP (#52) mos ó una esis encia excepcional espec o al es o
de animales que se puso especialmen e de mani ies o con una ex ao dina ia educción de la
longi ud de sus la as a los 7 dpi que midie on en p omedio, an sólo 2.8 mm, mien as que la
media del siguien e animal que albe gó los e mes más co os ue de 4.367 mm. Tal y como se
señaló an e io men e, es e animal se conside ó un ou lie y no se incluyó en el análisis
es adís ico.
Tabla 4.1 Pa áme os pa asi ológicos (Media ± E o Es ánda de la Media) ob enidos de mues as
ecogidas en el sac i icio a 7 y 21 dpi. HPG20= Recuen o de hue os en heces Log10+1 a los 20 dpi.
Longi ud (mm). * Indica p≤0.05, ** p≤0.01.
MEDIAS PARASITOLOGÍA
G upo
Va iable Pa asi ológica
CAP
CAN
7dpi
Ca ga pa asi a ia
(% dosis in ec i a)
5005 1291
(25 %)
5803  546
(29%)
Longi ud
4,80  0,04
5,04  0,05
21dpi
Ca ga pa asi a ia
(% dosis in ec i a)
1110±547*
(5.6%)
3280±848*
(16.4%)
Longi ud
13,44±0.22
14,30±0.16
HPG20
0**
1,6±0,47**
Hue os en ú e o
20±3
63±4
4.2 HEMATOLOGÍA
En gene al, se obse a que los o inos CAP ienen el hema oc i o más ele ado que los o inos
CAN incluso sin es a pa asi ados, siendo es as di e encias signi ica i as a los 7 dpi en el g upo
con ol y a los 0 y 21 dpi en el g upo inoculado (Figu a 4.1a. No a: no se ep esen an es as
di e encias en el g á ico). Las pé didas en hema oc i o ue on en p omedio supe io es (7%) en
la aza más suscep ible que en la aza esis en e (3.5%) a los 21 dpi, pe o ue on muy simila es
a los 7 y 14 dpi. De hecho, la educción sólo ue signi ica i a en la aza CAN. Los hema oc i os de
los animales de las dos azas a los 21 dpi se asocia on nega i amen e, aunque no
signi ica i amen e, con la ca ga pa asi a ia (CAP, = -0.566; CAN, = -0.683), pe o no con la
longi ud (CAP, = -0.096; CAN = 0.259).
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Resul ados
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
111
Las p o eínas ( igu a 4.1b) ambién expe imen a on un descenso, aunque no
es adís icamen e signi ica i o, que ue más p onunciado en la aza CAN que en la CAP a lo la go
de la in ección y se co elaciona on nega i amen e con la ca ga pa asi a ia (CAP =-0,749*; CAN
=-0,567) en ez de con la longi ud.
Los eosinó ilos ( igu a 4.1c) expe imen a on un pico a los 7 dpi en la aza CAN y a los 14 dpi
en la aza CAP. Los o inos CAN man u ie on una eosino ilia lige amen e supe io que la aza
CAP, si bien las di e encias en e las azas no ue on signi ica i as.
Figu a 4.1 Rep esen ación g á ica del hema oc i o, p o eínas plasmá icas (g/dl) y de los eosinó ilos en
sang e pe i é ica (cel/l), en ambos g upos con ol e in ec ados (7 y 21 dpi) pa a ambas azas.
6
6,5
7
7,5
8
0dpi 7dpi 14dpi 21dpi
P o eínas plasmá icas
(g/dl)
Con ol CAP
Con ol CAN
In ec ado CAP
In ec ado CAN
23
28
33
38
43
0dpi 7dpi 14dpi 21dpi
Hema oc i o
Con ol CAP
Con ol CAN
In ec ado CAP
In ec ado CAN
0
200
400
600
800
1000
1200
0dpi 7dpi 14dpi 21dpi
Eosinó ilos en sang e
(cell/l)
Con ol CAP
Con ol CAN
In ec ado CAP
In ec ado CAN
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Resul ados
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
112
4.3 INMUNOGLOBULINAS (IgAm e IgGm) EN MUCUS
No se obse a on di e encias signi ica i as en e azas en los ni eles de IgA del mucus (IgAm)
con ninguno de los an ígenos (L3 y SA) analizados (Figu as 4.2a y 4.2c), aunque se de ec a on
mayo es abso bancias cuando se an igena on las placas con an ígeno de L3 en el o ino CAN
mien as que en la aza CAP, es as ue on supe io es al an igena con an ígeno SA. Sin emba go,
sí se obse a on inc emen os signi ica i os den o de azas pa a la IgA especí ica de ambos
an ígenos, conc e amen e en e los 0 y 21 dpi (IgAmL3: pCAP=0,008 pCAN=0,000; IgAmSA: pCAP= 0,000
pCAN=0,024) y ambién en e los 7 y 21 dpi (IgAmL3: pCAP y CAN=0,000; IgAmSA: pCAP y CAN= 0,000) en ambas
azas (Figu a 4.2a y 4.2c).
Los o inos de aza CAN p oduje on signi ica i amen e más can idad de IgG del mucus (IgGm)
especí ica, an o en e a an ígenos L3 como SA, que los o inos CAP a los 21 dpi (Figu a 4.2b y
4.2d). Al igual que sucedió con la p oducción de IgAm, se inc emen a on los ni eles de ambas
inmunoglobulinas den o de aza a medida que p og esaba la in ección, obse ándose
di e encias en e el día 0 y 21 dpi (IgGmL3 pCAP=0,003 pCAN=0,000; IgGmSA pCAP y CAN=0,000) y en e el 7
dpi y 21 dpi (IgGmL3 pCAP=0,001 pCAN=0,000; IgGmSA pCAP y CAN=0,000) (Figu a 4.2b y 4.2d).
Figu a 4.2 Ni el de IgAm (a y c) e IgGm (b y d) especí ica en e a an ígeno L3 (a y b) y SA (c y d). * Indica
di e encias signi ica i as en e azas p≤0,05, ** p≤0,01.
A los 7 dpi, la IgGmSA se asoció nega i amen e con la as in amu ales ob enidas as la
diges ión de la mucosa en los o inos CAP, no obse ándose dicha asociación en los CAN (Tabla
CAP
CAN
CAP
CAN
**
*
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Resul ados
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
113
d)
4.3- Figu a 4.3c y 4.3d). Po el con a io, a los 21 dpi, IgAmSA e IgGmSA se asocia on
nega i amen e con las a iables longi ud y hue os en ú e o sólo en los o inos CAN (Tabla 4.3).
Tabla 4.3 Coe icien e de co elación de Spea man en e ni eles IgAm e IgGm (L3 y SA) y a iables
pa asi ológicas en CAP y CAN a los 7 y 21 dpi. HPG= hue os po g amo. * Indica p≤0,05, ** p≤0,01.
COEFICIENTE DE CORRELACIÓN DE SPEARMAN
Ca ga Pa asi a ia
Longi ud
Hue os en Ú e o
HPG20
CAP
CAN
CAP
CAN
CAP
CAN
CAP
CAN
21dpi
IgAmL3
-0,214
0,429
0,048
-0,679
0,167
-0,571
.
0,454
IgAmSA
-0,571
0,214
-0,238
-0,786*
-0,167
-0,893**
.
0,233
IgGmL3
-0,048
0,190
0,286
-0,679
0,548
-0,679
.
0,415
IgGmSA
-0,190
-0,095
0,262
-0,821*
0,476
-0,786*
.
0,073
Figu a 4.3 Dispe sión g á ica en e IgAmSA y longi ud de los e mes a los 21 dpi (a y b) e IgGmSA con
la as In amu ales a 7 dpi (c y d) en CAP y CAN, espec i amen e.
COEFICIENTE DE CORRELACIÓN DE SPEARMAN
Ca ga Pa asi a ia
La as In amu ales
La as Luminales
Longi ud
CAP
CAN
CAP
CAN
CAP
CAN
CAP
CAN
7dpi
IgAmL3
0,200
-0,300
-0,800
0,100
0,200
-0,400
0,700
-0,300
IgAmSA
-0,500
-0.100
-0,100
0,000
-0,500
0,000
0,400
0,600
IgGmL3
0,400
-0,100
-0,600
0,300
0,400
-0,200
-0,100
0,500
IgGmSA
-0,100
-0,300
-0,900*
0,500
-0,100
-0,500
0,600
0,300
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Resul ados
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
120
Tabla 4.6. Recuen os medios (media ± EEM) de las poblaciones celula es T+, T+/WC1+, CD2+, CD4+,
CD8+, CD1+, CD5+, MHC-II+, CD45RA+, Eosinó ilos, Galec ina-14, Leucoci os Globula es y Galec ina-11, de
las mues as de ejido de abomaso ob enidas as el sac i icio en ambos g upos. EEM: E o Es ánda de
la Media. Las di e encias signi ica i as en e azas se ep esen an con as e iscos, donde * indica p≤0,05
y ** p≤0,01. Mismo colo indica di e encias signi ica i as en e g upos den o de azas pa a cada
población celula .
MEDIA POBLACIONES CELULARES ABOMASO
+
T/WC1+
CD5+
G upo
Raza
Apical
Basal
To al
Apical
Basal
To al
Apical
Basal
To al
Con ol
CAP
Media±EEM
41±9
17±4
58±9
11±2
7±1
18±3
29±5
17±10
46±15
CAN
44±15
14±3
58±13
14±1
7±1
21±2
29±15
20±6
49±19
7 dpi
CAP
Media±EEM
78±19
49±16
127±32
28±9
11±1
39±10
145±51*
69±13
213±58
CAN
70±13
41±10
111±23
22±9
15±6
36±12
63±15*
65±4
128±16
21 dpi
CAP
Media±EEM
52±13*
46±7
98±14*
14±3
16±4
30±7
115±18
83±19
197±35
CAN
93±8*
62±9
155±15*
15±2
12±4
25±7
85±22
49±14
132±33
CD4+
CD8+
CD2+
G upo
Raza
Apical
Basal
To al
Apical
Basal
To al
Apical
Basal
To al
Con ol
CAP
Media±EEM
7±5
1±0
9±4
130±32
57±16
187±40
3±1
1±1
4±0
CAN
4±1
3±1
7±1
163±43
69±17
231±59
8±6
7±5
15±11
7 dpi
CAP
Media±EEM
52±11**
57±8**
100±16**
132±26
87±24
219±50
36±14
23±15
59±15
CAN
13±4**
8±1**
21±4**
113±22
66±10
179±30
25±6
17±8
42±11
21 dpi
CAP
Media±EEM
24±6*
22*±5*
45±10*
245±49*
97±18**
343±66*
52±9
12±3*
64±10
CAN
9±2*
10*±1*
19±3*
145±36*
38±4**
183±39*
54±7
37±9*
91±13
Al analiza las co elaciones en e las poblaciones celula es y las ca gas pa asi a ias a los 7
dpi, se pueden des aca las asociaciones nega i as y signi ica i as obse adas en la aza CAN
en e los lin oci os CD4+ (CAN, = -0.9* ; CAP = 0.359) y los lin oci os T/WC1+ apicales (CAN,
= -0.9*; CAP =-0.1) y los ecuen os in amu ales de la as, en e los CD2+ basales y los
ecuen os luminales de la as (CAN, = -1**; CAP, = 0.3) y en e los CD1+ y la longi ud, ambién
en la aza suscep ible (CAN, = -1**; CAP = -0.5). La única asociación nega i a y signi ica i a
obse ada en es a ase de la in ección po es adios inmadu os de H. con o us en la aza
esis en e CAP ue en e el MHC-II+ basales y las ca gas pa asi a ias in amu ales (CAN, = -0.4;
CAP, = -1**).
CD1+
MHC-II+
CD45RA+
G upo
Raza
Apical
Basal
To al
Apical
Basal
To al
Apical
Basal
To al
Con ol
CAP
Media±EEM
56±26*
56±22
111±47*
32±9
19±5
51±14
4±3
3±2
7±3
CAN
20±5*
29±9
49±14*
37±13
35±10
72±22
7±5
6±4
12±9
7 dpi
CAP
Media±EEM
28±9
34±7
61±14
91±35
60±19
151±50
17±7**
11±4*
28±10**
CAN
12±3
27±5
38±4
62±16
49±15
111±28
4±1**
2±1*
6±2**
21 dpi
CAP
Media±EEM
23±5
30±6
54±9
47±3
32±2*
79±4*
6±1
4±1
9±2
CAN
46±7
41±5
87±11
78±13
72±13*
150±23*
6±1
4±1
10±2
Eosinó ilos
Galec ina 14
Leucoci os
Globula es
Galec ina 11
G upo
Raza
Basal
Apical
Apical
Basal
To al
Con ol
CAP
Media±EEM
3±1
1±0
12±7
4±2
16±9
3±2
0,75±0,25
CAN
12±10
3±1
7±1
4±3
10±3
3±0
0,80±0,20
7 dpi
CAP
Media±EEM
46±7*
2±1*
19±4
17±5
36±6
4±1
1,60±0,25
CAN
119±38*
5±2*
23±8
36±16
59±23
3±1
1,40±0,51
21 dpi
CAP
Media±EEM
93±9
4±1
16±4
29±10
45±12
4±1
1,25±0,25
CAN
70±18
4±0
19±4
46±27
62±29
5±2
1,38±0,26

CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Resul ados
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
121
A los 21 dpi, des acan las asociaciones nega i as obse adas en la aza CAP en e los lin oci os
T + (CAN, = -0.323; CAP, = -0.738*) y los eosinó ilos, conc e amen e la población galec ina-
14+ (CAN, = -0.429; CAP, = -0.766*) y los hue os en ú e o. Las células galec ina-14+, ambién
se asocia on nega i amen e con la longi ud de los e mes (CAN, = -0.029; CAP, = -0.814*) y
con la ca ga pa asi a ia (CAN, = 0.19; CAP, = -0.826*) en la aza esis en e CAP. En es a aza,
los lin oci os T CD4+ se co elaciona on de o ma nega i a con las ca gas pa asi a ias (CAN, = -
0.024; CAP, = -0.929*). En la aza CAN, sólo los lin oci os T  WC1+ se asocia on nega i amen e
con la longi ud (CAN, = -0.757*; CAP, = -0.323).
4.6 ENSAYO DE MIGRACIÓN LARVARIA (LMIA)
No se obse a on di e encias en e azas en el núme o de la as que a a esa on la
memb ana du an e el ensayo (Figu a 4.7), así como ampoco en e g upos den o de aza.
Figu a 4.7 Rep esen ación en diag ama de ba as del po cen aje de la as, incubadas du an e 24 ho as
con mucus del abomaso ob enido as el sac i icio de los animales a los 0, 7 y 21 dpi, que a a iesan el
il o de la placa de ensayo.
CAP
CAN
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
122
4. DISCUSIÓN
La esis encia en e a nema odos gas oin es inales se ca ac e iza po un bajo ecuen o de
hue os en heces (HGH) asociado con una educción de la longi ud, ca ga pa asi a ia y hue os en
ú e o en los e mes (Rac li e y Lejamb e, 1971; S ea y Bishop, 1999; Lac oux e al., 2006). En
publicaciones p e ias de nues o g upo (González e al., 2008; 2011a), se obse ó en o inos de
la aza CAP, en elación a los o inos CAN, una educción en la exc eción de hue os y en el
ecuen o y longi ud de e mes a los 28 días as la adminis ación expe imen al de una única
dosis de 20.000 L3 de H. con o us, conside ando po ello a la CAP más esis en e. Sin emba go,
no se encon a on di e encias en los ecuen os ni en la longi ud de la as a los 7 dpi (González
e al., 2008; He nández, 2011). Es os esul ados sugie en que el con ol de los pa ási os en es a
aza se es ablece en e los 7-28 dpi; lo que con as a con la bibliog a ía p e ia, que sos iene que
los es adios la a ios de H. con o us son la diana p incipal de los mecanismos de esis encia en
los ejidos (Balic e al., 2000a; 2002). Con el in de delimi a el momen o del ciclo del pa ási o
en el hospedado en el que se es ablece es e con ol en la aza CAP, se ealizó es e segundo
ensayo con sac i icios a los 0, 7 y 21 dpi siguiendo el mismo p o ocolo de in ección. De modo
que, al igual que la expe iencia p e ia, no hubo di e encias en pa asi ología en e azas a los 7
dpi, pe o sí disminuyó la ca ga pa asi a ia en la aza CAP a los 21 dpi, sugi iendo que el con ol
de es a a iable pa asi ológica iene luga en e los 7 y 21 dpi, con olando es a aza la longi ud
y la ecundidad en e los 21 y 28 dpi.
La bibliog a ía ecoge la expulsión de los e mes adul os, cambios en la mo ología y
educción de la ecundidad como mecanismos de esis encia en e al es adio adul o del pa ási o
(Balic e al., 2000b). La expulsión de e mes adul os es á desc i a en H. con o us en umian es,
sin emba go equie e de una de e minada dosis de L3 e in ecciones epe idas y gene almen e
es á asociado a al os ecuen os de leucoci os globula es en los ejidos, la c eación po pa e de
las células e ec o as de un mic oambien e con óxicos y ac o es pa alizan es que al e en la
ep oducción y mo ilidad de los pa ási os, o po el daño que pudie an causa los eosinó ilos en
las la as, conside ándose, en cualquie caso, un e ec o indi ec o de la inmunidad adqui ida
gene ada en e las la as (Balic e al., 2000b). Sin emba go, en es a expe iencia no hubie on
di e encias en e azas en el es ablecimien o la a io ni en su desa ollo (es imado po la
longi ud) pe o si en el núme o de e mes adul os a los 21 dpi. Cu iosamen e, den o de azas, la
educción en el núme o de e mes no es signi ica i a a los 21 dpi, pe o sí lo ue a 28 dpi en la
aza CAP en una expe iencia an e io (He nández, 2011; da os no publicados). Todo es o
co obo a que la aza CAP es capaz de egula las ca gas de e mes adul os an es que el
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
123
es ablecimien o la a io y al a a se de inoculaciones únicas es a p o ección pa ece es a
inculada a la inmunidad inna a.
Como se ha obse ado en o as azas esis en es (Mugambi e al., 1996; Bahi a han e al.,
1996; Ama an e e al., 2004; Vanimise i e al., 2004b) la aza CAP p esen a un mayo
hema oc i o que la CAN (Figu a 4.1a) (González e al., 2008; He nández, 2011), indicando mayo
esiliencia a la in ección po pa ási os hema ó agos, como H. con o us, lo que pa ece un
mecanismo de adap ación isiológica. El hema oc i o y las p o eínas plasmá icas se asocia on
nega i amen e con la ca ga pa asi a ia y no con la longi ud, lo que pod ía explica que el con ol
se es ablezca sob e la ca ga pa asi a ia en es e pe iodo de la in ección. Las pé didas de sang e
son signi ica i amen e mayo es en e azas a los 21 dpi, po lo que si conside amos que las L4
son ya hema ó agas, a i ica ía que la diana en es a aza son los es adios adul os. La eosino ilia
se asocia al desa ollo de inmunidad, po lo que, como e a de espe a , los eosinó ilos de sang e
p esen an ecuen os supe io es en los animales in ec ados que en los con oles debidos a la
pa asi osis (Gill, 1991; Balic e al., 2000b). Los picos de eosinó ilos obse ados en cada aza, a
los 7 dpi en la aza CAN y a 14 dpi en la aza CAP, coinciden con los desc i os en una expe iencia
an e io (He nández, 2011), aunque en es e abajo la aza CAN p esen ó mayo es ecuen os de
eosinó ilos en sang e que la aza CAP. En odo caso, es as di e encias no ue on signi ica i as en
ninguno de los ensayos.
La espues a inmune humo al en e a H. con o us es á inculada a la IgA e IgG1 especí icas
(Gill e al., 2000, Schallig e al., 2000), dónde los inc emen o de es as inmunoglobulinas en las
concen aciones en el sue o y en el mucus se asocian con la esis encia a la haemonchosis (Gill
e al., 1993a). Dado que es e pa ási o habi a la supe icie de la mucosa del abomaso, e i ica la
espues a local se á más ep esen a i o que a ni el sis émico (Schallig, 2000), pues nos
pe mi i á alo a el econocimien o de los an ígenos e apa-especí icos del pa ási o, exp esados
du an e ese momen o de la in ección (Bowles e al., 1995), si bien la IgA se abso be y alcanza la
ci culación (de Cisne os e al., 2014).
Aunque la IgG p esen a mayo concen ación en la sang e, su pequeño amaño le pe mi e
pene a en los ejidos in lamados pa a con ac a con acilidad con los an ígenos ex años
(Tiza d, 2002). Es a inmunoglobulina alcanza la mucosa del abomaso y en a en con ac o con el
pa ási o, po lo que los ni eles de es a inmunoglobulina en el mucus pod ían e leja aún mejo
su espues a que en el plasma (Cu ain y Ande son, 1971; Muñoz-Guzman e al., 2006). Aun así,
la IgG sé ica se ha asociado con educciones en ca gas pa asi a ias y hue os en heces en
in ecciones po H. con o us (Muñoz-Guzman e al., 2006). Aunque el mecanismo de p o ección
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
124
no es á del odo cla o, se ha obse ado que la IgG de sue os de cab as inmunizadas es capaz de
uni se selec i amen e a la cu ícula, es oma y po o exc e o de T ichos ongylus colub i o mis in
i o, po lo que pod ía comp ome e la alimen ación de los pa ási os (Bo je e al., 1985). Uno
de los an ígenos a los que se une es a inmunoglobulina pod ía se el denominado Ca La, pues
as la incubación de L3 de T. colub i o mis con sue o o mucus de animales inmunizados y su
pos e io inoculación en animales no inmunizados p odujo educción del es ablecimien o
la a io, obse ándose la unión de la IgG en dicho an ígeno; sin emba go es e e ec o no se
ep odujo con L3 de H. con o us o T. ci cumcinc a (Ha ison e al., 2008), lo que e idencia la
complejidad de las espues as inmunes p o ec o as en e a los ichos ongilidos.
Aunque en es a expe iencia los o inos CAP p esen a on meno es ca gas pa asi a ias, los
o inos CAN p oduje on más can idad de IgG especí ica de an ígenos L3 y SA a los 21 dpi en el
mucus. La p oducción en los nódulos lin á icos de es a inmunoglobulina en e a los dos
an ígenos no a ió en e azas. Es e esul ado pa ece desca a que es a inmunoglobulina sea la
esponsable del con ol de la ca ga pa asi a ia en es a aza y en es as inoculaciones únicas. Sin
emba go, se obse a una asociación nega i a en e la IgGmSA y los ecuen os de la as
in amu ales en la aza CAP (Tabla 4.3) que pod ían suge i que cuali a i amen e, los animales
de es a aza econocen epí opos que se inculan especí icamen e con la p o ección, aunque es e
aspec o no se pueda cons a a en es a expe iencia. Además, no se obse a es a misma
asociación con las la as luminales. En las dos azas se obse a on asociaciones nega i as en e
IgG especí icas y longi ud; en la aza de pelo a los 7 dpi al analiza la IgG especí ica de las L3
ob enida as el cul i o de los nódulos lin á icos y, en la aza más suscep ible la asociación
nega i a de la IgG no sólo con la longi ud de los e mes, sino ambién con los hue os
in au e inos a los 21 dpi, es ando en es e caso implicada la IgG especí ica de e mes adul os
del mucus. La p esencia de ecep o es en supe icie pa a las Igs en los eosinó ilos a o ece ía su
deg anulación al ededo de las la as en la mucosa gás ica causándoles al e aciones
uncionales/mo ológicas (Rainbi d e al., 1998; Balic e al., 2000b; 2006) que explica ían la
educción en su núme o (CAP) o la asociación nega i a de la longi ud de los e mes. En el u u o,
con end ía analiza especí icamen e el iso ipo IgG1 – inculado a p o ección (Gill e al., 1993a)-
además de la IgG o al que hemos es udiado en es e abajo, con el in de p ecisa más su papel
en las espues as p o ec o as de la aza CAP.
El con ol de la longi ud de los pa ási os se ha asociado a la IgA del mucus especí ica de
es adios la a ios, an o en T. ci cumcinc a (Smi h e al., 1985; S ea e al., 1995) como en H.
con o us (S ain y S ea , 2001), pa ási o en el que ambién se ha inculado con educciones en
las ca gas pa asi a ias an o en azas esis en es (San a Inés) como suscep ibles (Ile de F ance)
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
125
(Ama an e e al., 2005). Una mayo p oducción de IgA especí ica es á asociada a esis encia a
T. ci cumcinc a (S ain e al., 2002). Al cuan i ica an o la IgA especí ica en mucus como la
ob enida en los sob enadan es del cul i o de los lin oci os p oceden es de los nódulos lin á icos
abomasales (L3 y SA) pa a ambas azas, no se obse a on di e encias signi ica i as en e azas a
los 21 dpi, que si ue on e iden es -en un abajo p e io ealizado po nues o g upo de
in es igación- a los 28 dpi en la IgAmSA, cuando los e mes ecogidos en la aza CAP e an más
co os (He nández, 2011; He nández e al., 2015). Sin emba go, pa ece que la IgA especí ica de
la aza CAN p esen a mayo a inidad po el an ígeno L3 y la IgA especí ica de la aza CAP po el
an ígeno SA (Figu a 4.2 y 4.4), al y como sucedió en el expe imen o an e io (He nández, 2011;
He nández e al., 2015).
A los 7 dpi, la única asociación nega i a signi ica i a que se obse ó ue en e la IgA de
an ígeno SA ob enida de los sob enadan es de los lin oci os de los nódulos lin á icos abomasales
de la aza suscep ible CAN y la ca ga pa asi a ia. Es e da o es simila al desc i o po Ama an e
e al., 2005 y sugie e que el es ablecimien o de la espues a inmuni a ia en la aza suscep ible
CAN es simila al desc i o en o as azas o inas en e al es adio L3.
A los 21 dpi, la IgA especí ica SA, se asoció nega i amen e con las a iables longi ud y hue os
en ú e o únicamen e en la aza CAN. Es posible que en es e momen o de la in ección, en la
p ime a e apa de los e mes adul os, es as asociaciones se deban al e ec o de una inmunidad
di igida en e al es adio pa asi a io L4 (S ea e al., 1995; 1999), p obablemen e po
econocimien o de an ígenos compa idos en e ambos es adios pa asi a ios (Kei h e al.,
1990). Resul a muy in e esan e que en la aza esis en e, a los 21 dpi, no se obse a an
asociaciones en e IgA especí ica SA – an o del mucus como de los sob enadan es de los cul i os
de los lin oci os de nódulos lin á icos abomasales- y la longi ud a di e encia de la ue e
asociación nega i a encon ada a los 28 dpi en animales de es a misma aza some idos a una
inoculación expe imen al idén ica (He nández, 2011; He nández e al., 2015). Es o pa ece
e leja que el con ol de la longi ud –hay di e encias signi ica i as en e azas a los 28 dpi pe o
no a los 21 dpi- se es ablece con pos e io idad al día 21 pi, y pa ece consolida que el es adio
adul o es la diana de la espues a en la in ección po H. con o us en la aza CAP.
Las di e encias obse adas en las asociaciones en e IgA de mucus especí ico de e mes
adul os (somá ico y exc e o sec e o ) y la longi ud de los e mes a los 28 dpi en ambas azas
(He nández, 2011; He nández e al., 2015), sugie en un pa ón de econocimien o an igénico
di e en e en e azas, especialmen e in e esan e en la espues a en e al an ígeno SA, que no
se había inculado p e iamen e con p o ección. Pa a comp oba lo, se ealizó una

CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
126
elec oinmuno ans e encia de an ígeno SA de H. con o us, u ilizando pa a ello los
sob enadan es ob enidos as el cul i o de los lin oci os p oceden es de los nódulos lin á icos
en es a expe iencia. La Figu a 4.6 mues a un pa ón de econocimien o de p o eínas an igénicas
di e en e en e azas; siendo los o inos de la aza esis en e CAP los que p esen an un mayo
núme o de bandas, an o a los 7 como a los 21 dpi, econociendo especí icamen e p o eínas de
en e 48 y 86kDa (Tabla 4.5), no econocidas po los CAN o los con oles, con la excepción de la
p o eína 68kDA que ue econocida po el animal #CAN13, y las p o eínas 52 y 54kDa,
econocidas po el con ol #CAP64. Bowles e al., 1995 ob u ie on sob enadan es de nódulos
lin á icos locales en animales inoculados y pos e io men e desa iados, que econocie on
p o eínas de 50 y 55 KDa del an ígeno SA de H. con o us. Po an o, los animales de aza CAP
pa ecen econoce más p o eínas de an ígeno SA que los o inos CAN y que lo obse ado po
o os au o es en o as azas, lo que es consis en e con los da os p e ios que suge ían que el
es adio adul o es la diana en la espues a p o ec o a de es a aza y pod ía debe se en pa e a
una mayo capacidad de econocimien o de epí opos po pa e de los animales de es a aza.
Además, los animales que han econocido p o eínas con pesos molecula es de 84 y 86kDa,
albe gaban los e mes más co os a los 7 y 21 dpi. También, algunos de los animales que
econocie on esas dos bandas, p esen a on una ca ga pa asi a ia meno . El econocimien o de
bandas a los 7 dpi en la aza esis en e u ilizando un an ígeno somá ico de e me adul o, sugie e
puedan habe epí opos compa idos en e es adios pa asi a ios (Kei h e al., 1990), pudiendo
se p o eínas al amen e conse adas, lo que pod ía explica su econocimien o en una única
inoculación.
Es os esul ados indican que no sólo es impo an e la can idad de IgA especí ica, sino ambién
econoce las p o eínas co ec as pa a p oduci una espues a inmuni a ia adecuada, siendo
ele an e la a iabilidad indi idual den o de la aza (Zajac e al., 1990; Balic e al., 2000b). En
es e expe imen o, la a iabilidad indi idual se e leja cuando en la es adís ica se obse aban
di e encias en longi ud de los e mes en e azas cuando se desca a la co a iable "animal".
Zhou e al., 2005 han suge ido que a iaciones gené icas en la IgA se pod ía asocia a
p o ección/suscep ibilidad. O os au o es han encon ado esul ados simila es den o de
ebaño en es udios de campo, aunque luego es a a iabilidad gené ica explica poco las
a iaciones en los HGH, al menos en in ecciones mix as con Nema odi us spp. y nema odos del
O den S ongylida cuando el análisis se ealiza en e ebaños (Lin e al., 2009). En in ecciones
po T. ci cumcinc a es la a iación en la can idad de IgA especí ica p oducida, la que modula la
longi ud (S ea e al., 1995) y, po an o, la ecundidad. Conside ando es os esul ados, algunas
p o eínas pod ían se ú iles en la iden i icación p ecoz de animales esis en es den o de un
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
127
ebaño, incluso en inoculaciones únicas, an es de que se es ablezcan di e encias cuan i a i as
en la p oducción de la IgA especí ica en in ecciones po H. con o us.
Es posible que las dos inmunoglobulinas, IgA e IgG, ac úen conjun amen e, quizás median e
la neu alización o inac i ación de enzimas me abólicas que comp ome an el me abolismo,
capacidad mo o a, c ecimien o o ep oducción de los e mes (Gill e al., 1993a) o po la
o mación de inmunocomplejos en el es oma (Bo je e al., 1985).
Balic e al., 2000a obse a on que la espues a inmune celula en e a la in ección p ima ia
–en la que no se gene a p o ección en azas come ciales- con H. con o us, es á ca ac e izada
du an e el es adio la a io po el eclu amien o de eosinó ilos, lin oci os CD4+ y T/WC1+ y
células B, mien as que du an e la in ección con el es adio adul o se inc emen a el núme o de
mas oci os. En es e es udio, dónde se analiza on a ias poblaciones celula es (Tabla 4.6), an es
de la inoculación sólo se obse a on di e encias signi ica i as en los ecuen os en e azas en las
células CD1+ (moléculas p esen ado as de an ígenos p esen e en células dend í icas), lo que
pod ía indica una mayo capacidad inna a de la aza CAP a la ho a de econoce an ígenos. Sin
emba go, es as di e encias aciales desapa ecen a medida que a anza la in ección.
En gene al, as la inoculación las poblaciones celula es se inc emen a on en ambos g upos.
La aza CAP mos ó un inc emen o de los lin oci os CD4+ y CD45RA+, inc emen os obse ados en
inoculaciones simila es en o inos CAP (He nández, 2011) y en o as azas o inas (Balic e al.,
2000a; 2002). Los aumen os expe imen ados po es as poblaciones celula es a los 7 dpi en los
o inos CAN no ue on, sin emba go, signi ica i os. No se disponía de an icue pos que
econocie an la molécula de supe icie CD25+ (ma cado de ac i ación de lin oci os T y B (Tiza d,
2002; 2009), po lo que no se puede con i ma que es as células es u iesen ac i as. De hecho,
no se co elaciona on nega i amen e con ninguna de las a iables pa asi ológicas analizadas a
los 7 dpi. El inc emen o obse ado en la población CD5+ de la mucosa del abomaso en la aza
esis en e p obablemen e e leja el inc emen o de la subpoblación CD4+ al p esen a se es a
molécula de di e enciación celula en esa subpoblación lin oci a ia (Tiza d, 2002; 2009).
Cu iosamen e en la aza suscep ible si se obse a on asociaciones nega i as en e los CD4+ y
T/WC1+ apicales con las la as in amu ales y en e las células CD2+ basales con las la as
luminales. Si bien en e azas no se obse a on di e encias pa a es as a iables pa asi ológicas,
es á desc i o el papel de los lin oci os CD4+ en la exp esión de esis encia gené ica en e H.
con o us, iéndose a ec ado el con ol de la ca ga y de hue os en heces al educi es a
población celula en animales en los que la espues a p o ec o a se o ien a al es adio la a io
L3 (Gill e al., 1993b). La posible pa icipación ac i a de los lin oci os CD4+ en es a aza
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
128
suscep ible pod ían explica la eosino ilia (Tabla 4.6). A los 7 dpi, CAP solo mos ó asociación
nega i a en e MHC-II+ basales (molécula inculada con la p esen ación de an ígenos) y las
ca gas pa asi a ias in amu ales, asociación que ambién obse ó He nández, 2011, aunque en
su caso no ue signi ica i a ( =-0,5). Es e da o puede se in e esan e po que pe mi e elaciona
esa asociación con las in e acciones obse adas en el mismo momen o de la in ección en e la
a iable pa asi ológica la as in amu ales con la IgA y la IgG especí icas del mucus. De hecho,
la IgGmSA, la IgAmL3 y IgAmSA se asocian posi i a y ue emen e con las células MHC-II+ ( =1**-
da o no mos ado an e io men e), lo que pod ía suge i que se p oduce una p esen ación de
an ígenos en el momen o in amu al del es adio la a io que a a condiciona pos e io men e
la ca ga pa asi a ia.
A los 21 dpi ambién se obse a on di e encias en e azas en los ecuen os de las poblaciones
celula es. En la aza CAN se inc emen a on los T+, MHC-II y CD2+, sin emba go es as
poblaciones no se co elaciona on nega i amen e con las dis in as a iables pa asi ológicas
es udiadas. La aza CAP, po el con a io, mos ó ecuen os signi ica i amen e mayo es que la
aza suscep ible de lin oci os CD4+ y CD8+, es ando la población CD4+ asociada nega i amen e
con la ca ga pa asi a ia, además en es a e apa se p odujo un inc emen o signi ica i o (den o
de aza) de los eosinó ilos en abomaso, los cuales, a a és del ecuen o de la galec ina 14+ -
p o eína especí ica de eosinó ilos, conside ada ma cado de ac i idad de los mismos (Young e
al., 2009)- se asocia on nega i amen e con las a iables ca ga pa asi a ia, longi ud y hue os en
ú e o. Los eosinó ilos galec ina 14+ basales y los lin oci os CD4+ apicales asocia on posi i amen e
en e sí ( =0,898** -no publicado), lo que e ue za el papel de es as dos poblaciones en el
con ol de la ca ga en una espues a conjun a. La a iable pa asi ológica hue os en ú e o
ambién asoció nega i amen e con los lin oci os T+. Es a asociación en e la ecundidad y los
lin oci os T y eosinó ilos han sido desc i as en es a aza (He nández, 2011; González e al.,
2011a). La galec ina 14 puede p omo e la adhesión celula y cambia las p opiedades del mucus
(Young y Meeusen, 2004; Young e al., 2009), lo que acili a ía la eliminación de los e mes,
es ando implicadas en las espues as inmuni a ias inna a y adap a i a (Young y Meeusen, 2004)
en e H. con o us. Es án desc i as asociación nega i as de es a lec ina con ca ga pa asi a ia a
los 2 dpi en o ejas de azas suscep ibles as inoculaciones se iadas y desa ío con H. con o us,
si bien su papel no es á aún del odo cla o (Robinson e al., 2011).
Las asociaciones obse adas en e las poblaciones celula es y las dos azas, sugie en una ez
más que la CAN o ien a sus espues as en e apas más emp anas de la in ección, mien as que
la aza esis en e la di ige en e a es adios p eadul os-adul os (González e al., 2008) en
animales p imoin ec ados median e un mecanismo inmune único no desc i o en la bibliog a ía,
CAPÍTULO I. Di e encias en suscep ibilidad en in ecciones na u ales
Discusión
CAPÍTULO II. Con ol de la ca ga de e mes an es que la longi ud
129
pues los leucoci os globula es, población celula que no p esen ó inc emen os ni asociación con
los esul ados pa asi ológicos en es e expe imen o ni en es udios p e ios de nues o g upo
(He nández, 2011), han sido inculados con la expulsión ápida de los e mes en animales
inmunizados (Balic e al.,2000b; Balic e al., 2002).
Igualmen e impo an e esul a la ciné ica de los eosinó ilos en el abomaso, pues es os
aumen an en la mucosa del abomaso a los 7 dpi en la aza suscep ible pa a pos e io men e
disminui , ajus ándose a lo desc i o en la bibliog a ía (Balic e al., 2000b), mien as que en la
aza esis en e su núme o se inc emen a has a los 21 dpi y se man ienen cons an es a los 28 dpi
(González e al., 2011a; He nández, 2011) aco de a la diana pa asi ológica p opues a pa a cada
aza. Aunque se ha inculado a es as células con la expulsión la a ia en o ejas sensibilizadas
(Balic e al., 2002), los esul ados de es e es udio sugie en que en la aza CAP ambién se ían
impo an es en inoculaciones simples.
Es conocido el e ec o del mucus en los mecanismos de expulsión de los nema odos
gas oin es inales (Balic e al., 2000b). Con el in de de e mina su e ec o en es e modelo se
ealizó el ensayo de inhibición de la mig ación la a ia del mucus. Sin emba go, ni a los 7 ni a los
21 dpi se obse a on di e encias en e azas. No obs an e, la endencia ue di e en e en e azas,
con mayo inhibición de mig ación la a ia a los 7 dpi en la aza CAN y mayo inhibición a los 21
dpi en la aza CAP, lo que pa ece cohe en e con su es adio pa asi a io diana, al y como se ha
suge ido has a aho a. El po cen aje de la as con mo ilidad inhibida en la aza CAN a los 7 dpi
ue del 48%, en e al 22% de CAP; a 21 días la inhibición en CAP ue del 44% y en CAN del 37%.
En un ensayo an e io (González e al., 2011b) sí se obse a on di e encias en e azas en la
inhibición la a ia po pa e del mucus a los 28 dpi, po lo que quizás la modi icación del
ambien e del abomaso pod ía se esponsable de p o ección en la aza CAP. Es posible que es os
cambios di icul en, no solo la pe manencia del e me en el abomaso, sino ambién la
ep oducción y el desa ollo, consiguiendo, que las ca gas en la aza CAP sean más bajas y los
e mes menos la gos y ecundos (Balic e al., 2000b; González e al 2008; He nández, 2011).
Un mecanismo que se ha desc i o in oluc a a la galec ina-11, p oducida especí icamen e po las
células epi eliales, que es capaz de uni se especí icamen e a la egión a íngea de las L4 de H.
con o us, comp ome iendo p obablemen e, su alimen ación y desa ollo (P es on, 2013;
González e al., 2015).
En conclusión, la aza CAP es capaz de con ola la ca ga pa asi a ia en e los días 7 y 21 pi,
mien as que la longi ud y ecundidad de los e mes en e los 21 y 28 dpi as una única
inoculación de 20.000 L3 de H. con o us, lo que sugie e que en es e mecanismo de esis encia
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238
Ag adecimien os
Ag adecimien os
241
11. AGRADECIMIENTOS
No sé si e aco da ás de ese momen o en el que decidis e que ibas a se de mayo , en mi caso
yo e a an pequeñi a que mon aba en un iciclo, en el que una cue da ama ada al olan e hacía
de iendas de “mi caballo”; desde an pequeñi a decidí se “médico de animales”. Du an e odos
los años de mi o mación ecibí el apoyo de mi amilia, de mi pad e y de mi mad e que con su
es ue zo me ayuda on a que ese sueño se hicie a ealidad y a los que es oy eno memen e
ag adecida, muchísimas g acias.
Son muchas las pe sonas que de un modo u o o me han ayudado o apoyado du an e el
desa ollo de mi esis doc o al así que espe o no ol ida me de nadie.
Du an e es os años no solo c ecí p o esionalmen e, sino ambién c ecí en lo pe sonal; aquí
engo que ag adece le a mi di ec o D . Jo ge F ancisco González Pé ez el iempo que me ha
dedicado, los consejos y palab as de apoyo cuando la si uación se o cía o el econocimien os
cuando las cosas salían bien. G acias po ayuda me y escucha me siemp e que e necesi é,
g acias po con ia en mí.
A mis codi ec o es, el D . Jose Manuel Molina Caballe o y el D . F ancisco Rod íguez Guisado
quie o ag adece les el conocimien o que me apo a on y la ayuda p es ada cuando eque í de
su expe iencia, g acias.
Ag adece a las “chicas del labo a o io”, que si bien pa ece un í ulo de película, ealmen e
pod ía se lo con odas las i encias que u imos en e esas cua o pa edes y ue a de ellas,
muchas g acias po odo Adassa, A an zazu, Da inia, Jessica, Lei e, Lo ena, So aya y Yaiza. Y
como e a de espe a , no puede habe chicas, sin “chicos del labo a o io”, A idany, Alejand o,
Ál a o, Fe nando, Se gio y Ye ay, quienes además de da me apoyo “logís ico” cuando hacía
al a, siemp e enían un chis e pa a ameniza la mañana, g acias po odo. También engo que
ag adece a Sa a, Ca los y Robe o po la ayuda p es ada.
A Li a, Ma ía, Ma isol y Ta a que con su ca iño y p eocupación hacían que en los pasillos me
sin ie a como en casa. Be na do, Juan, Luis, San iago, Se a ín y Ven u a que siemp e me
ayuda on en odo lo que es u o en sus manos cuando los necesi é con los animales. Ca melo,
Ca men, Loli y Luisa que con solo una llamada me daban soluciones a cualquie cosa que
necesi a a de las ins alaciones de la Facul ad de Ve e ina ia de la Uni e sidad de Las Palmas de
G an Cana ia. A Ped o Cas o, Es he y Es ella po p epa a me disoluciones, ealiza me los
pedidos y un sin ín de cosas con las que me ayuda on, g acias.