EVALUACIÓN DEL ANALIZADOR HEMATOLÓGICO DE
IMPEDANCIA ELÉCTRICA BAKER 9120+ CON SANGRE
DE PERRO Y GATO
J. Pas o , R. Cuenca,
F.
Da naculle a,
L. Viñas, S. La ín.
RESUMEN.
El obje i o de es e abajo es e alua el analizado
hema ológico au omá ico de impedancia eléc ica,
Bake 9120+ (Mena ini Diagnós ica S.A.), con
sang e de pe o y ga o. La p ecisión in a e
in e ensayo y la ep oducibilidad del Bake 9120+ es
excelen e pa a odos los pa áme os en ambas
especies. El a as e y la linealidad del analizado
hema ológico es muy buena pa a odos los
pa áme os, a excepción del ecuen o de plaque as
con sang e elina, debido a la sob eposición de la
población e i oci a ia y plaque a . No es posible
de e mina las di e en es poblaciones leucoci a ias en
ninguna de las dos especies, independien emen e de
la can idad de hemolizan e u ilizado.
La
compa ación
del Bake 9120+ con o o analizado de impedancia
eléc ica en el ecuen o celula y concen ación de
hemoglobina, y con el mé odo manual pa a el alo
hema oc i o, es buena pa a odos los pa áme os. El
ecuen o de e i oci os, leucoci os y la concen ación
de hemoglobina son es ables du an e las 72 ho as
pos ex acción, an o a empe a u a ambien e como
en e ige ación. El ecuen o de plaque as en sang e
de pe o desciende ápidamen e con di e encias
signi ica i as a las 4 ho as pos ex acción en las
mues as e ige adas y a las 24 ho as en las
mues as man enidas a empe a u a ambien e.
Palab as cla e: Analizado hema ológico; Bake 9120+;
E aluación; Almacenamien o; Pe o; Ga o;
Impedancia eléc ica.
INTRODUCCIÓN.
La hema ología animal, ha expe imen ado
du an e es os úl imos años un no able a ance,
debido undamen almen e al con encimien o po
pa e del clínico de la impo ancia que iene el
labo a o io como mé odo complemen a io de
diagnós ico. Es e a ance, es á es echamen e liga-
do a la u ilización de nue os sis emas analí icos.
De odos los análisis de labo a o io, el hemog a-
ma es el más solici ado po el clínico, ya sea pa a
conoce el es ado gene al del animal, e alua la
e olución y p onós ico de una en e medad, la es-
U.D. Pa ología Gene al y Médica
Facul ad de Ve e ina ia
Uni e sidad Au ónoma de Ba celona
08193 Bella e a
ABSTRACT.
An au homa ed blood cell analyse (Bake 9120+)
was e alua ed wi h canine and eline blood. P ecision
and ep oducibili y we e excelen in bo h species o
all he pa ame e s. Ca y-o e and linea i y was e y
good o all he pa ame e s, excep o he pla ele
coun due o he o e lapping be ween e y h ocy e
and pla ele popula ion. The e was no possible o
di e encia e any o he leukocy e popula ions wi h
he Bake 9120+. The compa abili y be ween he
Bake 9120+ and ano he elec ic impedance
analyze o blood cell coun and hemoglobin
concen a ion and he mic ohema oc i me hod o
he haema oc i alue was good o all he
pa ame e s. Red blood cell, whi e blood cell coun
and haemoglobin concen a ion a e s able du ing 72
hou s a e he ex ac ion a 4 "C and 25
oc.
Canine
pla ele coun d opped signi ican ly a 4 hou s pos -
ex ac ion in hose samples s o ed a 4 "C and a e
24 hou s in hose samples a oom empe a u e.
Key wo ds:
Blood cell analyze ; Bake 9120+;
E alua ion; S o age s udy, Dog; Ca , Elec ical
impedance.
pues a a un a amien o o pa a es ablece un diag-
nós ico de ini i o. Pa a ealiza el hemog ama,
podemos u iliza el mé odo adicional basado en
el empleo de cáma as de ecuen o, o mé odos
au oma izados, que cada día an adqui iendo más
impo ancia en e e ina ia debido, no sólo a la
apidez y simpli icación de manejo, sino, unda-
men almen e a la p ecisión y exac i ud de los mis-
mos.
En hema ología humana se sigue el p o ocolo
p opues o po el
In e na ional Commi ee o
Sianda diza ion in
Haema ology(12)
pa a la e a-
luación de analizado es hema ológicos. En e e-
207
E aluación
del
analizado hema ológico de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o
y
ga o.
J.
Pas o
e a/.
Clínica Ve e ina ia de Pequeños Animales (A epa) Vol. 18, n" 4, 1998.
ina ia se debe u iliza es e p o ocolo con lige-
as modi icacionesüê' de e minando los siguien-
es apa ados: es udio del agen e hemolizan e,
p ecisión, ep oducibilidad, a as e, linealidad,
compa ación con el mé odo u ilizado p e iamen-
e po el labo a o io y es udio de la es abilidad de
la sang e (opcional).
En e e ina ia exis en pocas publicaciones sob e
e aluación de analizado es hema ológicos. Sin
emba go, la adquisición de un analizado he ma o-
lógico ep esen a una in e sión muy impo an e
pa a las clínicas o labo a o ios, po lo que, exis e
la necesidad de un es udio en p o undidad de las
ca ac e ís icas de los di e en es analizado es
hema ológicos con sang e de di e en es especies
animales.
El obje i o de es e abajo es e alua el analiza-
do hema ológico au omá ico de impedancia eléc-
ica Bake 9120+ (Mena ini Diagnós ica, S.A.)
con sang e de pe o y ga o.
MATERIAL Y MÉTODOS.
Ca ac e ís icas écnicas del
analizado hema ológico Bake
9120+.
El Bake 9120+ es un analizado hema ológico
au omá ico que u iliza el sis ema de impedancia
eléc ica pa a el ecuen o celula y cálculo del
olumen celula . De e mina la concen ación de
hemoglobina median e el mé odo calo imé ico
de la cianome ahemoglobina y dispone de una
se ie de disc iminado es en el canal leucoci a io
que pe mi e di e encia 5 subpoblaciones: lin oci-
os, monoci os, g anuloci os, eosinó ilos y
basó i-
los.
El Bake 9120+ pe mi e abaja con sang e
o al o con plasma ico en plaque as. El ango de
ecuen o debe se modi icado pa a cada especie
animal siguiendo las especi icaciones del ab ican-
e. En el es udio ealizado po noso os, los dis-
c iminado es ue on colocados en las siguien es
localizaciones:
Pe o:
• Recuen o de plaque as:
- Disc iminado 1
--7
misma localización que
en humana.
- Disc iminado 2
--7
24. O I.
• Recuen o de e i oci os:
- Disc iminado 1
--7
misma localización que
en humana.
- Disc iminado 2
--7
misma localización que
en humana.
• Recuen o de leucoci os:
- Disc iminado
1
--7
30
I.
- Disc iminado 2
--7
misma localización que
en humana.
Ga o:
• Recuen o de plaque as:
- Disc iminado
1
--7
misma localización que
en humana. '
, - Disc iminado 2
--7
20.4 I.
• Recuen o de e i oci os:
- Disc iminado 1
--7
22 I.
- Disc iminado 2
--7
misma localización que
en humana.
• Recuen o de leucoci os:
- Disc iminado
1
--7
30
I.
- Disc iminado 2
--7
misma localización que
en humana.
Cuando abajamos con el modo de sang e com-
ple a, el analizado hema ológico Bake 9120+
aspi a un olumen de 80 ll de sang e pa a eali-
za au omá icamen e dos diluciones, una pa a el
ecuen o de e i oci os y plaque as y, o a pa a el
ecuen o de leucoci os y la de e minación de la
concen ación de hemoglobina. A es a úl ima dilu-
ción se le añade au omá icamen e 1.9 mi de
hemolizan e (amonio cua e na io) que lisa los e i-
oci os pe mi iendo el ecuen o de células nuclea-
das y la, de e minación de la concen ación de
hemoglobina. Es e analizado hema ológico dis-
pone de un ansduc o con una abe u a de 60
mic as pa a el ecuen o de e i oci os y plaque as
y de 100 mic as pa a el ecuen o de leucoci os.
El analizado hema ológico Bake 9120+ ue
calib ado con sang e con ol humana (Haem-QC
plus Di , Biochem Immunosys ems, USA). Como
con ol de calidad se p ocedió al análisis dia io de
sang e con ol de alo es no males (Haem-QC
plus Di , Biochem Immunosys ems, USA).
Es udio del agen e hemolizan e.
Se u ilizó sang e de 5 animales clínicamen e
sanos, de e minándose el ecuen o de leucoci os
con di e en es concen aciones de hemolizan e
(1.9,1.75,1.5,1.25 y 1 mi). Los di e en es esul-
ados se compa a on median e una de S uden
pa a da os apa eados.
P ecisión.
Pa a de e mina la p ecisión in aensayo e in e -
ensayo en sang e de pe o y ga o se u iliza on 5
208
E aluación del analizado hema ològica de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o
y
ga o.
J.
Pas o e al. Clinica Ve e ina ia de Pequeños Animales (A epa) Vol. 18, n" 4, 1998.
mues as de sang e de cada especie p oceden es
de animales clínicamen e sanos, Es as mues as se
analiza on po iplicado en es lo es sucesi os
cambiando el o den de análisis y p ocediendo al
la ado de los ansduc o es con el diluyen e y apa-
gado del analizado du an e 15 minu os en e
cada uno de los lo es, Las mues as ue on anali-
zadas en o al 9 eces, El cálculo de la p ecisión
in aensayo e in e ensayo se ealizó median e un
análisis de a iancia de dos ías con in e acciones,
eniendo en cuen a el animal y la eplica de análi-
sis, Se calculó:
• El coe icien e de a iación de la p ecisión
in aensayo (%):
CV
=
-'.j -M-s-q -e-Si-du-a-l--*100
Media
• El coe icien e de a iación de la p ecisión in e-
ensayo (%):
Msqba ch
+
((U*N) - 1Msq esidual)
CV
=
-'-(U_*N-'-) * 100
Media
Donde "msq esidual" es la a ianza esidual de
la mues a, "msqba h" es la a ianza según épli-
ca, "U" es el núme o de casos y "N" es el núme-
o de éplicas.
Rep oducibilidad.
Pa a el cálculo de la ep oducibilidad se analiza-
on seis eces 5 mues as sanguíneas de cada
especie animal. Es as mues as ue on colocadas
al aza en e las mues as analizadas du an e 6
ho as de abajo. Cada análisis de una mues a
es aba sepa ado, como mínimo, po una mues a
di e en e.
La ep oducibilidad se calculó median e un aná-
lisis de a ianza, hallándose el coe icien e de
a iación (%):
CV
=~
Msq esidual
*
100
Media
Donde la "msq esidual" es la a ianza esidual.
A as e.
Pa a la de e minación del a as e exis en a ias
écnicas. Noso os hemos u ilizado una mues a
con alo es al os seguida del diluyen e del analiza-
do . La mues a de alo es al os ue ob enida
median e cen i ugación a 3000 pm du an e 5
minu os y sepa ación de pa e del plasma. El
a as e se calculó según la ó mula de B ough on
e a/.(3):
A as e
=
B1-B3
*
100
B3-A3
Donde Al, AI2, A3 son los alo es al os y B1,
B2, B3 los alo es del diluyen e en o den de
ob ención. El esul ado se exp esa como po cen-
aje.
Linealidad.
La linealidad se es udió pa iendo de una mues-
a con los alo es más al os posibles pa a cada
pa áme o. Es a mues a la ob u imos cen i u-
gando la sang e ecogida en EDTA K
3
a 3000
pm du an e 10 minu os. A con inuación, ealiza-
mos 6 diluciones con el plasma del mismo animal.
El plasma se analizó po iplicado con el analiza-
do hema ológico pa a conoce qué in e e encias
o qué can idad de cada elemen o de la sang e
podía apo a . U ilizamos mic opipe as de p eci-
sión pa a ealiza las diluciones del 50, 25,
12.25, 6.12, 3.06 y 1.53%. Cada dilución ue
analizada po duplicado. La linealidad se es udió
median e el coe icien e de co elación de Pea son
ob enido a pa i de una ec a de eg esión sim-
ple.
Compa ación.
Se analiza on 30 mues as de pe o y ga o,
compa ando los esul ados ob enidos median e el
analizado au omá ico de impedancia eléc ica
Bake 9120+ con los ob enidos con un analizado
hema ológico semiau omá ico de impedancia
eléc ica, Sysmex
F-SOO
(TOA Ins umen s). Se
compa a on los esul ados de los dos analizado es
en los siguien es pa áme os: ecuen o de e i o-
ci os, concen ación de hemoglobina, ecuen o de
leucoci os y ecuen o de plaque as. Se u ilizó la
écnica del mic ohema oc i o pa a de e mina el
alo hema oc i o y, a pa i de es e alo y los
esul ados ob enidos en el ecuen o de e i oci os
con el Sysmex
F-SOO,
se calculó el VCM.
La compa ación en e el Bake 9120+ con los
o os mé odos se es udió median e una ec a de
eg esión y el coe icien e de co elación de Pea son.
210
E aluación del analizado hemalològico de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o
y
galo.
J.
Pas o e al. Clínica Ve e ina ia de Pequeños Anímales (A epe) Vol. 18, n" 4, 1998.
Tabla
I.
Es udio del e ec o de la concen ación del hemolizan e con sang e de pe o, exp esado como la media (des iación es ánda ).
1.9 mi 1.75 mi 1.50 mi 1.25 mi
hemolizan e hemolizan e hemolizan e hemolizan e
Pe o
Recuen o de leucoci os (10
3
/[11)
14.39 (6.79) 15.61 (7.07) 16.28 (6.63) 17.24 (7.18)"
Di e enciación poblaciones No No No No
Ga o
Recuen o de leucoci os (10
3
/¡. .I)
11.50 (2.82) 13.55 (4.31) 16.05 (2.19)· 41.50 (19.33)·
Di e enciación poblaciones No No No No
• Indica di e encias es adís icamen e signi ica i as (p<0.05) espec o al ecuen o de leucoci os inicial ob enido con 1.9 mi de hemolizan e.
Tabla Il. Resul ados de la p ecisión in aensayo e in e ensayo y de la ep oducibilidad del analizado hema ológico de impedancia eléc ica Ba elW
9120+ con sang e de pe o y ga o. .
..... "y
1
Pa áme o Pe o Pe o Pe o Ga o Ga o Ga~ ;;~
'¿}.9J
P. In a
(%)
P. In e
(%)
Rep od.
(%)
P. In a
(%)
P. In e
(%)
Rep od"
(%)
Recuen o de e i oci os (10
6
/[11)
1.32 1.59 2.01 2.65 3.62 2.16
Concen ación de hemoglobina (g/di) 1.23 1.27 1.56 2.5 233 1.9
Valo hema oc i o
(%)
1.31 1.43 1.87 2.68 2.75 2.11
VCM( 1) 0.17 0.35 0.31 0.33 0.37 0.44
CHCM (g/di) 1.28 1.26 1.35 1.28 1.85 1.52
HCM (pg) 1.35 1.44 1.51 1.52 1.76 1.41
RDW( 1) 3.68 4.59 4.96 l,O 0.97 0.88
Recuen o de leucoci os (10
3
/[11)
2.78 2.93 2.35 3.89 5.1 3.76
Recuen o de plaque as (10
3
/[11)
4.02 4.49 4.48
VPM( 1) 2.09 2.45 3.23
P. in e = p ecisión in e ensayo; P. in a = p ecisión in aensayo; Repo .= ep oducibilidad; VCM = olumen co puscula medio; CHCM = con-
cen ación de hemoglobina co puscula media; HCM = hemoglobina co puscula media; RDW = ancho de dis ibución del his og ama de e i-
oci os; VPM = olumen plaque a medio.
Almacenamien o.
Se es udió la es abilidad de las mues as de sang e
ecogidas en EDTA K
3.
Se ecogie on dos mues as
de cada animal, una pa a almacena a empe a u a
ambien e (es u a a 25°C) y o a a empe a u a de
e ige ación (ne e a a 4
OC).
Las mues as se
homogeneiza on du an e 5 minu os en un agi ado
o a o io de bandeja an es de se analizadas. Se
analiza on po duplicado a las O, 2, 4, 6, 8, 12, 24,
36, 48, 60 y 72 ho as pos ex acción.
Pa a el es udio es adís ico del almacenamien o,
se u ilizó el p ocedimien o de Bon e oni pa a
compa aciones múl iples y con as es a pos e io-
i. Los esul ados ob enidos nos in o man de la
exis encia o no de di e encias es adís icamen e
signi ica i as espec o la mues a inicial.
RESULTADOS.
Es udio del agen e hemolizan e.
Los esul ados ob enidos en el es udio del hemo-
lizan e es án esumidos en la Tabla I. Al u iliza la
concen ación de 1 mI de hemolizan e no se ob u-
o un his og ama adecuado en ninguna de las dos
especies. En las mues as caninas y elinas se obse -
ó un aumen o p og esi o del ecuen o de leucoci-
os al disminui la can idad de hemolizan e con di e-
encias signi ica i as al u iliza 1.25 y 1.5 mI de
hemolizan e espec i amen e. No se di e encia-
on las poblaciones leucoci a ias en ninguna de
las dos especies independien emen e de la can i-
dad de hemolizan e u ilizada.
P ecisión.
Los esul ados ob enidos es án esumidos en la
Tabla Il. El pa áme o más p eciso ue la de e mi-
nación del olumen co puscula medio (VCM) de
los e i oci os. La p ecisión del ecuen o celula
ue in e io al 5%, a excepción de la p ecisión
in e ensayo del ecuen o de leucoci os con sang e
de ga o, que p esen ó un alo de 5.1%.
Rep oducibilidad.
La Tabla Il mues a los esul ados ob enidos en el
es udio de la ep oducibilidad del Bake 9120+. Los
. .
211
E aluación del analizado hema olágico de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o yga o. J. Pas o e al. Clínica Ve e ina ia de Pequeños Animales (A epa) Vol. 18, n" 4, 1998.
Tabla III.
A as e del analizado hema ológico Bake 9120+ con
sang e de pe o
y
ga o.
Pe o Ga o
A as e
(%)
A as e
(%)
Recuen o de e i oci os
Concen ación de hemoglobina
Valo hema oc i o
Recuen o de leucoci os
Recuen o de plaque as
0.24
O
0.38
0.54
1.9
0.40
O
0.27
0.64
1428
alo es ob enidos en la ep oducibilidad son simila es
a los hallados pa a la p ecisión in a e in e ensayo.
A as e.
El a as e es in e io al
1
%en odos los pa á-
me os (Tabla III).
Linealidad.
La linealidad del Bake 9120+ es excelen e en
odos los pa áme os en el ango es udiado, con
>
0.99 pa a aquellos que son dependien es de la
dilución. Los índices e i oci a ios pe manecie on
cons an es con independencia de la dilución. El
ango es udiado pa a cada pa áme o con sang e
canina ue de 0.08 a6.76 x106/¡. l pa a el ecuen-
o de e i oci os, de 0.1 a18.8 g/di pa a la con-
cen ación de hemoglobina, de 0.5 a42.3% pa a
el alo hema oc i o, de 0.6 a48.7 x10
3
/1..L1pa a
el ecuen o de leucoci os y de 14 a254 x10
3
/¡. 1
pa a el ecuen o de plaque as. En sang e elina el
ango es udiado ue de 0.25 a16.755 x10
6
/¡. 1
pa a el ecuen o de e i oci os, de 0.1 a20.48 g/di
pa a la concen ación de hemoglobina, de 1.9 a
64% pa a el alo hema oc i o y de 0.9
a
76.5 x
10
3
/¡. l pa a el ecuen o de leucoci os.
Compa ación.
Las Figs.
1
y 2 mues an los esul ados de la
compa ación en sang e de pe o y ga o. La com-
pa ación en e los dos analizado es ue muy
buena pa a odos los pa áme os con > 0.9, a
excepción del VCM que p esen a alo es acep a-
bles (
=
0.64 con sang e canina y
=
0.60 con
sang e elina).
Almacenamien o.
En las Figs. 3 y 4 se mues an los esul ados
ob enidos en el es udio de almacenamien o. El
as e isco mues a el pun o en el que se ob u ie on
di e encias es adís icamen e signi ica i as espec-
o los alo es del iempo O.
El ecuen o de e i oci os, leucoci os y la con-
cen ación de hemoglobina son es ables du an e
las 72 ho as pos ex acción de la sang e, inde-
pendien emen e de la empe a u a de almacena-
mien o y la especie animal.
Con sang e canina las p ime as di e encias es a-
dís icamen e signi ica i as se de ec an a las 4
ho as pos ex acción, en el ecuen o de plaque-
as, en la sang e almacenada en e ige ación, ya
las 24 ho as en la mues a almacenada a empe-
a u a ambien e. El VCM de las mues as a em-
pe a u a ambien e aumen a con di e encias signi-
ica i as a las 24 ho as. El ancho de dis ibución
del his og ama de e i oci os es es able has a las
36 ho as y 60 ho as en las mues as almacenadas
a empe a u a ambien e y e ige ación, espec i-
amen e. El alo hema oc i o es es able has a las
72 ho as pos ex acción.
Con sang e elina no se de ec an di e encias sig-
ni ica i as en ningún pa áme o has a las 24 ho as
pos ex acción de la sang e, momen o en el que
aumen a el ancho de dis ibución de los e i oci os
a las dos empe a u as de almacenamien o y el
VCM en las mues as almacenadas a empe a u a
ambien e. A las 36 ho as el alo hema oc i o de
las mues as a empe a u a ambien e ya no es ia-
ble, así como la CHCM. El alo hema oc i o de
las mues as en e ige ación es es able has a las
72 ho as.
DISCUSIÓN.
El analizado hema ológico de impedancia eléc-
ica Bake 9120+ p esen a una p ecisión muy
buena en el ecuen o de e i oci os en las dos
especies, siendo és a mucho mejo que la que se
ob iene con el mé odo manual que es de ap oxi-
madamen e el 12%(13).En el ecuen o de leucoci-
os se ob ienen alo es de p ecisión lige amen e
supe io es a los del ecuen o de e i oci os, coin-
cidiendo con lo obse ado po o os au o esü>.
16),
pe o es a p ecisión es mejo que la del mé odo
manual que se si úa en el 16%(1,33). El coe icien-
e de a iación del ecuen o de plaque as del
Bake 9120+ con sang e canina es mucho mejo
que la p ecisión del mé odo manual (CV de un
20%) y la del sis ema Unope e de Bec on
Dickinson (CV de un 11%)(24).
Con sang e elina no es posible ealiza el
ecuen o de plaque as debido a la sob eposición
de las
poblaciones
de e i oci os y plaque as, sien-
do imposible pa a el analizado he ma o lógico
encon a un pun o de in lexión que sepa e las
212

E aluación del analizado hema olágico de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o
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e al.
Clinica Ve e ina ia de Pequeños Animales (A epa) Vol. 18, nO4, 1998.
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1.
Compa ación del Bake 9120+ con el mé odo manual o un analizado hema ológico semiau omá ico con sang e canina (n=30),
Analizado semiau omá ico
214
E aluación del analizado hema olágico de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o
y
ga o. J. Pas o e
al.
Clinica Ve e ina ia de Pequeños Anima es (A epa) Vol. 18, n" 4, 1998.
Analizado semiau omá ico
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Mé odo del mic ohema oc i o
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Analizado semiau omá ico
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Fig.
2.
Compa ación del Bake 9120+ con el mé odo manual o un analizado hema ológico semiau omá ico con sang e elina (n=30).
215
E aluación del analizado hema ològico de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o
y
ga o. J. Pas o e
01.
Clinica Ve e ina ia de Pequeños Animales (A epa) Vol. 18, n" 4, 1998.
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Fig. 3. Almacenamien o de la sang e canina (media de 5 animales). El as e isco indica la p esencia de di e encias signi ica i as (p<O,05) espec o al iempo O.
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E aluación del analizado hema olégico de impedancia eléc ica Bake 9120+ con sang e de pe o
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Pas o e al. Clinica Ve e ina ia de Pequeños Animales (A epa) Vol. 18, n" 4, 1998.
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4.
Almacenamien o de la sang e elina (media de 5 animales). El as e isco indica la p esencia de di e encias signi ica i as (p<O,05) espec o al iempoO.
218
72
72
72
72