Evaluación del analizador hematológico de impedancia eléctrica BAKER 9120+ con sangre de perro y gato

EVALUACIÓN DEL ANALIZADOR HEMATOLÓGICO DE IMPEDANCIA ELÉCTRICA BAKER 9120+ CON SANGRE DE PERRO Y GATO J. Pastor, R. Cuenca, F. Darnaculleta, L. Viñas, S. Lavín. RESUMEN. El objetivo de este trabajo es evaluar el analizador hematológico automático de impedancia eléctrica, Baker 9120+ (Menarini Diagnóstica S.A.), con sangre de perro y gato. La precisión intra e interensayo y la reproducibilidad del Baker 9120+ es excelente para todos los parámetros en ambas especies. El arrastre y la linealidad del analizador hematológico es muy buena para todos los parámetros, a excepción del recuento de plaquetas con sangre felina, debido a la sobreposición de la población eritrocitaria y plaquetar. No es posible determinar las diferentes poblaciones leucocitarias en ninguna de las dos especies, independientemente de la cantidad de hemolizante utilizado. La comparación del Baker 9120+ con otro analizador de impedancia eléctrica en el recuento celular y concentración de hemoglobina, y con el método manual para el valor hematocrito, es buena para todos los parámetros. El recuento de eritrocitos, leucocitos y la concentración de hemoglobina son estables durante las 72 horas postextracción, tanto a temperatura ambiente como en refrigeración. El recuento de plaquetas en sangre de perro desciende rápidamente con diferencias significativas a las 4 horas postextracción en las muestras refrigeradas y a las 24 horas en las muestras mantenidas a temperatura ambiente. Palabras clave: Analizador hematológico; Baker 9120+; Evaluación; Almacenamiento; Perro; Gato; Impedancia eléctrica. INTRODUCCIÓN. La hematología animal, ha experimentado durante estos últimos años un notable avance, debido fundamentalmente al convencimiento por parte del clínico de la importancia que tiene el laboratorio como método complementario de diagnóstico. Este avance, está estrechamente ligado a la utilización de nuevos sistemas analíticos. De todos los análisis de laboratorio, el hemograma es el más solicitado por el clínico, ya sea para conocer el estado general del animal, evaluar la evolución y pronóstico de una enfermedad, la resU.D. Patología General y Médica Facultad de Veterinaria Universidad Autónoma de Barcelona 08193 Bellaterra ABSTRACT. An authomated blood cell analyser (Baker 9120+) was evaluated with canine and feline blood. Precision and reproducibility were excelent in both species for all the parameters. Carry-over and linearity was very good for all the parameters, except for the platelet count due to the overlapping between erythrocyte and platelet population. There was not possible to differenciate any of the leukocyte populations with the Baker 9120+. The comparability between the Baker 9120+ and another electric impedance analyzer for blood cell count and hemoglobin concentration and the microhematocrit method for the haematocrit value was good for all the parameters. Red blood cell, white blood cell count and haemoglobin concentration are stable during 72 hours after the extraction at 4 "C and 25 oc. Canine platelet count dropped significantly at 4 hours postextraction in those samples stored at 4 "C and after 24 hours in those samples at room temperature. Key words: Blood cell analyzer; Baker 9120+; Evaluation; Storage study, Dog; Cat, Electrical impedance. puesta a un tratamiento o para establecer un diagnóstico definitivo. Para realizar el hemograma, podemos utilizar el método tradicional basado en el empleo de cámaras de recuento, o métodos automatizados, que cada día van adquiriendo más importancia en veterinaria debido, no sólo a la rapidez y simplificación de manejo, sino, fundamentalmente a la precisión y exactitud de los mismos. En hematología humana se sigue el protocolo propuesto por el International Committee for Siandardization in Haematology(12) para la evaluación de analizadores hematológicos. En vete207 Evaluación del analizador hematológico de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro y gato. J. Pastor et a/. Clínica Veterinaria de Pequeños Animales (Avepa) Vol. 18, n" 4, 1998. rinaria se debe utilizar este protocolo con ligeras modificacionesüê' determinando los siguientes apartados: estudio del agente hemolizante, precisión, reproducibilidad, arrastre, linealidad, comparación con el método utilizado previamente por el laboratorio y estudio de la estabilidad de la sangre (opcional). En veterinaria existen pocas publicaciones sobre evaluación de analizadores hematológicos. Sin embargo, la adquisición de un analizador he matológico representa una inversión muy importante para las clínicas o laboratorios, por lo que, existe la necesidad de un estudio en profundidad de las características de los diferentes analizadores hematológicos con sangre de diferentes especies animales. El objetivo de este trabajo es evaluar el analizador hematológico automático de impedancia eléctrica Baker 9120+ (Menarini Diagnóstica, S.A.) con sangre de perro y gato. MATERIAL Y MÉTODOS. Características técnicas del analizador hematológico Baker 9120+. El Baker 9120+ es un analizador hematológico automático que utiliza el sistema de impedancia eléctrica para el recuento celular y cálculo del volumen celular. Determina la concentración de hemoglobina mediante el método calorimétrico de la cianometahemoglobina y dispone de una serie de discriminadores en el canal leucocitario que permite diferenciar 5 subpoblaciones: linfocitos, monocitos, granulocitos, eosinófilos y basófilos. El Baker 9120+ permite trabajar con sangre total o con plasma rico en plaquetas. El rango de recuento debe ser modificado para cada especie animal siguiendo las especificaciones del fabricante. En el estudio realizado por nosotros, los discriminadores fueron colocados en las siguientes localizaciones: Perro: • Recuento de plaquetas: - Discriminador 1 --7 misma localización que en humana. - Discriminador 2 --7 24. O fI. • Recuento de eritrocitos: - Discriminador 1 --7 misma localización que en humana. - Discriminador 2 --7 misma localización que en humana. • Recuento de leucocitos: - Discriminador 1 --7 30 fI. - Discriminador 2 --7 misma localización que en humana. Gato: • Recuento de plaquetas: - Discriminador 1 --7 misma localización que en humana. ' , - Discriminador 2 --7 20.4 fI. • Recuento de eritrocitos: - Discriminador 1 --7 22 fI. - Discriminador 2 --7 misma localización que en humana. • Recuento de leucocitos: - Discriminador 1 --7 30 fI. - Discriminador 2 --7 misma localización que en humana. Cuando trabajamos con el modo de sangre completa, el analizador hematológico Baker 9120+ aspira un volumen de 80 fll de sangre para realizar automáticamente dos diluciones, una para el recuento de eritrocitos y plaquetas y, otra para el recuento de leucocitos y la determinación de la concentración de hemoglobina. A esta última dilución se le añade automáticamente 1.9 mi de hemolizante (amonio cuaternario) que lisa los eritrocitos permitiendo el recuento de células nucleadas y la, determinación de la concentración de hemoglobina. Este analizador hematológico dispone de un transductor con una abertura de 60 micras para el recuento de eritrocitos y plaquetas y de 100 micras para el recuento de leucocitos. El analizador hematológico Baker 9120+ fue calibrado con sangre control humana (Haem-QC plus Diff, Biochem Immunosystems, USA). Como control de calidad se procedió al análisis diario de sangre control de valores normales (Haem-QC plus Diff, Biochem Immunosystems, USA). Estudio del agente hemolizante. Se utilizó sangre de 5 animales clínicamente sanos, determinándose el recuento de leucocitos con diferentes concentraciones de hemolizante (1.9,1.75,1.5,1.25 y 1 mi). Los diferentes resultados se compararon mediante una t de Student para datos apareados. Precisión. Para determinar la precisión intraensayo e interensayo en sangre de perro y gato se utilizaron 5 208 Evaluación del analizador hematològica de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro y gato. J. Pastor et al. Clinica Veterinaria de Pequeños Animales (Avepa) Vol. 18, n" 4, 1998. muestras de sangre de cada especie procedentes de animales clínicamente sanos, Estas muestras se analizaron por triplicado en tres lotes sucesivos cambiando el orden de análisis y procediendo al lavado de los transductores con el diluyente y apagado del analizador durante 15 minutos entre cada uno de los lotes, Las muestras fueron analizadas en total 9 veces, El cálculo de la precisión intraensayo e interensayo se realizó mediante un análisis de variancia de dos vías con interacciones, teniendo en cuenta el animal y la replica de análisis, Se calculó: • El coeficiente de variación de la precisión intraensayo (%): CV = -'.jr-M-s-qr-e-Si-du-a-l--*100 Media • El coeficiente de variación de la precisión interensayo (%): Msqbatch + ((U*N) - 1Msqresidual) CV = -'-(U_*N-'-) * 100 Media Donde "msqresidual" es la varianza residual de la muestra, "msqbath" es la varianza según réplica, "U" es el número de casos y "N" es el número de réplicas. Reproducibilidad. Para el cálculo de la reproducibilidad se analizaron seis veces 5 muestras sanguíneas de cada especie animal. Estas muestras fueron colocadas al azar entre las muestras analizadas durante 6 horas de trabajo. Cada análisis de una muestra estaba separado, como mínimo, por una muestra diferente. La reproducibilidad se calculó mediante un análisis de varianza, hallándose el coeficiente de variación (%): CV =~ Msqresidual * 100 Media Donde la "msqresidual" es la varianza residual. Arrastre. Para la determinación del arrastre existen varias técnicas. Nosotros hemos utilizado una muestra con valores altos seguida del diluyente del analizador. La muestra de valores altos fue obtenida mediante centrifugación a 3000 rpm durante 5 minutos y separación de parte del plasma. El arrastre se calculó según la fórmula de Broughton et a/.(3): Arrastre = B1-B3 * 100 B3-A3 Donde Al, AI2, A3 son los valores altos y B1, B2, B3 los valores del diluyente en orden de obtención. El resultado se expresa como porcentaje. Linealidad. La linealidad se estudió partiendo de una muestra con los valores más altos posibles para cada parámetro. Esta muestra la obtuvimos centrifugando la sangre recogida en EDTA K 3 a 3000 rpm durante 10 minutos. A continuación, realizamos 6 diluciones con el plasma del mismo animal. El plasma se analizó por triplicado con el analizador hematológico para conocer qué interferencias o qué cantidad de cada elemento de la sangre podía aportar. Utilizamos micropipetas de precisión para realizar las diluciones del 50, 25, 12.25, 6.12, 3.06 y 1.53%. Cada dilución fue analizada por duplicado. La linealidad se estudió mediante el coeficiente de correlación de Pearson obtenido a partir de una recta de regresión simple. Comparación. Se analizaron 30 muestras de perro y gato, comparando los resultados obtenidos mediante el analizador automático de impedancia eléctrica Baker 9120+ con los obtenidos con un analizador hematológico semiautomático de impedancia eléctrica, Sysmex F-SOO (TOA Instruments). Se compararon los resultados de los dos analizadores en los siguientes parámetros: recuento de eritrocitos, concentración de hemoglobina, recuento de leucocitos y recuento de plaquetas. Se utilizó la técnica del microhematocrito para determinar el valor hematocrito y, a partir de este valor y los resultados obtenidos en el recuento de eritrocitos con el Sysmex F-SOO, se calculó el VCM. La comparación entre el Baker 9120+ con los otros métodos se estudió mediante una recta de regresión y el coeficiente de correlación de Pearson. 210 Evaluación del analizador hemalològico de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro y galo. J. Pastor et al. Clínica Veterinaria de Pequeños Anímales (Avepe) Vol. 18, n" 4, 1998. Tabla I. Estudio del efecto de la concentración del hemolizante con sangre de perro, expresado como la media (desviación estándar). 1.9 mi 1.75 mi 1.50 mi 1.25 mi hemolizante hemolizante hemolizante hemolizante Perro Recuento de leucocitos (10 3 /[11) 14.39 (6.79) 15.61 (7.07) 16.28 (6.63) 17.24 (7.18)" Diferenciación poblaciones No No No No Gato Recuento de leucocitos (10 3 /¡.t.I) 11.50 (2.82) 13.55 (4.31) 16.05 (2.19)· 41.50 (19.33)· Diferenciación poblaciones No No No No • Indica diferencias estadísticamente significativas (p<0.05) respecto al recuento de leucocitos inicial obtenido con 1.9 mi de hemolizan e. Tabla Il. Resultados de la precisión intraensayo e interensayo y de la reproducibilidad del analizador hematológico de impedancia eléctrica Ba elW 9120+ con sangre de perro y gato. . ..... "y 1 Parámetro Perro Perro Perro Gato Gato Ga~ ;;~ '¿}.9J P. Intra (%) P. Inter (%) Reprod. (%) P. Intra (%) P. Inter (%) Reprod" (%) Recuento de eritrocitos (10 6 /[11) 1.32 1.59 2.01 2.65 3.62 2.16 Concentración de hemoglobina (g/di) 1.23 1.27 1.56 2.5 233 1.9 Valor hematocrito (%) 1.31 1.43 1.87 2.68 2.75 2.11 VCM(f1) 0.17 0.35 0.31 0.33 0.37 0.44 CHCM (g/di) 1.28 1.26 1.35 1.28 1.85 1.52 HCM (pg) 1.35 1.44 1.51 1.52 1.76 1.41 RDW(f1) 3.68 4.59 4.96 l,O 0.97 0.88 Recuento de leucocitos (10 3 /[11) 2.78 2.93 2.35 3.89 5.1 3.76 Recuento de plaquetas (10 3 /[11) 4.02 4.49 4.48 VPM(f1) 2.09 2.45 3.23 P. inter = precisión interensayo; P. intra = precisión intraensayo; Repor.= reproducibilidad; VCM = volumen corpuscular medio; CHCM = concentración de hemoglobina corpuscular media; HCM = hemoglobina corpuscular media; RDW = ancho de distribución del histograma de eritrocitos; VPM = volumen plaquetar medio. Almacenamiento. Se estudió la estabilidad de las muestras de sangre recogidas en EDTA K 3. Se recogieron dos muestras de cada animal, una para almacenar a temperatura ambiente (estufa a 25°C) y otra a temperatura de refrigeración (nevera a 4 OC). Las muestras se homogeneizaron durante 5 minutos en un agitador rotatorio de bandeja antes de ser analizadas. Se analizaron por duplicado a las O, 2, 4, 6, 8, 12, 24, 36, 48, 60 y 72 horas postextracción. Para el estudio estadístico del almacenamiento, se utilizó el procedimiento de Bonferroni para comparaciones múltiples y contrastes a posteriori. Los resultados obtenidos nos informan de la existencia o no de diferencias estadísticamente significativas respecto la muestra inicial. RESULTADOS. Estudio del agente hemolizante. Los resultados obtenidos en el estudio del hemolizante están resumidos en la Tabla I. Al utilizar la concentración de 1 mI de hemolizante no se obtuvo un histograma adecuado en ninguna de las dos especies. En las muestras caninas y felinas se observó un aumento progresivo del recuento de leucocitos al disminuir la cantidad de hemolizante con diferencias significativas al utilizar 1.25 y 1.5 mI de hemolizante respectivamente. No se diferenciaron las poblaciones leucocitarias en ninguna de las dos especies independientemente de la cantidad de hemolizante utilizada. Precisión. Los resultados obtenidos están resumidos en la Tabla Il. El parámetro más preciso fue la determinación del volumen corpuscular medio (VCM) de los eritrocitos. La precisión del recuento celular fue inferior al 5%, a excepción de la precisión interensayo del recuento de leucocitos con sangre de gato, que presentó un valor de 5.1%. Reproducibilidad. La Tabla Il muestra los resultados obtenidos en el estudio de la reproducibilidad del Baker 9120+. Los .r. 211 Evaluación del analizador hematolágico de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro ygato. J. Pastor et al. Clínica Veterinaria de Pequeños Animales (Avepa) Vol. 18, n" 4, 1998. Tabla III. Arrastre del analizador hematológico Baker 9120+ con sangre de perro y gato. Perro Gato Arrastre (%) Arrastre (%) Recuento de eritrocitos Concentración de hemoglobina Valor hematocrito Recuento de leucocitos Recuento de plaquetas 0.24 O 0.38 0.54 1.9 0.40 O 0.27 0.64 1428 valores obtenidos en la reproducibilidad son similares a los hallados para la precisión intra e interensayo. Arrastre. El arrastre es inferior al 1 %en todos los parámetros (Tabla III). Linealidad. La linealidad del Baker 9120+ es excelente en todos los parámetros en el rango estudiado, con r > 0.99 para aquellos que son dependientes de la dilución. Los índices eritrocitarios permanecieron constantes con independencia de la dilución. El rango estudiado para cada parámetro con sangre canina fue de 0.08 a6.76 x106/¡.tl para el recuento de eritrocitos, de 0.1 a18.8 g/di para la concentración de hemoglobina, de 0.5 a42.3% para el valor hematocrito, de 0.6 a48.7 x10 3 /1..L1para el recuento de leucocitos y de 14 a254 x10 3 /¡.t1 para el recuento de plaquetas. En sangre felina el rango estudiado fue de 0.25 a16.755 x10 6 /¡.t1 para el recuento de eritrocitos, de 0.1 a20.48 g/di para la concentración de hemoglobina, de 1.9 a 64% para el valor hematocrito y de 0.9 a 76.5 x 10 3 /¡.tl para el recuento de leucocitos. Comparación. Las Figs. 1 y 2 muestran los resultados de la comparación en sangre de perro y gato. La comparación entre los dos analizadores fue muy buena para todos los parámetros con r > 0.9, a excepción del VCM que presenta valores aceptables (r = 0.64 con sangre canina y r = 0.60 con sangre felina). Almacenamiento. En las Figs. 3 y 4 se muestran los resultados obtenidos en el estudio de almacenamiento. El asterisco muestra el punto en el que se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas respecto los valores del tiempo O. El recuento de eritrocitos, leucocitos y la concentración de hemoglobina son estables durante las 72 horas postextracción de la sangre, independientemente de la temperatura de almacenamiento y la especie animal. Con sangre canina las primeras diferencias estadísticamente significativas se detectan a las 4 horas postextracción, en el recuento de plaquetas, en la sangre almacenada en refrigeración, ya las 24 horas en la muestra almacenada a temperatura ambiente. El VCM de las muestras a temperatura ambiente aumenta con diferencias significativas a las 24 horas. El ancho de distribución del histograma de eritrocitos es estable hasta las 36 horas y 60 horas en las muestras almacenadas a temperatura ambiente y refrigeración, respectivamente. El valor hematocrito es estable hasta las 72 horas postextracción. Con sangre felina no se detectan diferencias significativas en ningún parámetro hasta las 24 horas postextracción de la sangre, momento en el que aumenta el ancho de distribución de los eritrocitos a las dos temperaturas de almacenamiento y el VCM en las muestras almacenadas a temperatura ambiente. A las 36 horas el valor hematocrito de las muestras a temperatura ambiente ya no es fiable, así como la CHCM. El valor hematocrito de las muestras en refrigeración es estable hasta las 72 horas. DISCUSIÓN. El analizador hematológico de impedancia eléctrica Baker 9120+ presenta una precisión muy buena en el recuento de eritrocitos en las dos especies, siendo ésta mucho mejor que la que se obtiene con el método manual que es de aproximadamente el 12%(13).En el recuento de leucocitos se obtienen valores de precisión ligeramente superiores a los del recuento de eritrocitos, coincidiendo con lo observado por otros autoresü>. 16), pero esta precisión es mejor que la del método manual que se sitúa en el 16%(1,33). El coeficiente de variación del recuento de plaquetas del Baker 9120+ con sangre canina es mucho mejor que la precisión del método manual (CV de un 20%) y la del sistema Unopette de Becton Dickinson (CV de un 11%)(24). Con sangre felina no es posible realizar el recuento de plaquetas debido a la sobreposición de las poblaciones de eritrocitos y plaquetas, siendo imposible para el analizador he mato lógico encontrar un punto de inflexión que separe las 212 Evaluación del analizador hematolágico de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro y gato. J. Pastor et al. Clinica Veterinaria de Pequeños Animales (Avepa) Vol. 18, nO4, 1998. Baker 9120+ ~12 r= 0.964 ~10 y = -0.82 + 1.13 * X O (J) 8 O .... el e 6 .... 'i: al al 4 \J .8 2 e O 23456789io Baker 9120+ .......30 :o r= 0.986 -.. E! 25 y=0.012 + 0.97 * X Ol ~ //' .Q 20 .> ~ / .. ~/ E•. al 15 '.' .c .~.)rI e/' 'O L/. '~1°1 .>: Lr 579 n 13 15 17 19 21 23 25 Analizador semiautomático 100Baker 9120+ r r= 0.645 80 1 y= 37.69 + 0.44' X g 60 1 ~ Ü > 40 Analizador semiautomático Baker 9120+ 80~r= 0.968 ~70 y= ·6.01 + 1.15 * X "t60 o .... .: 50 o o' tU40 E al .c 30 ./ / " .. l ••• .".:" ./'., , :I'-------'--'----'-----l..-~'-------'-- M~40~~~00~m~00 ~ 00 Método manual Baker 9120+ 630 r= 0.916 ~ 530 V= 31.84 + O.89*X 40 (J) 2 430 al :J er ~ 330 '. o, Q) \J 230 O• e ~/~ ~ 130 r-, 30' !! 50 100 150 200 2~ 300 aso 400 ~O 500 550 000 Analizador semiautomático '- o ~ :t_-'-_----'-_-'-_--'-_--'-_-'-_--'--_-'-----' 20 25 30 ~ 40~~~00~ Método del microhematocrito Baker 9120+ 50 r= 0.987 "* Y= -0.14 + 1.03*X '640 (J) .8 30 8~ ~20 / ..... o10 .' e I ~r ,10 -----'-------'-----'-------' o 10 .' . 20 30 Fiq, 1. Comparación del Baker 9120+ con el método manual o un analizador hematológico semiautomático con sangre canina (n=30), Analizador semiautomático 214 Evaluación del analizador hematolágico de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro y gato. J. Pastor et al. Clinica Veterinaria de Pequeños Animates (Avepa) Vol. 18, n" 4, 1998. Analizador semiautomático Baker 9120+ 60[r= 0.935 ' 50 y= 4.64 + 0.96 * X ~ // .» >: / .. y/ Ü I" o. a; 30 : :/ '. ~V'¿. .J:: • • ~2O • 10 O'---'---'---'---'---'----'----'--------l 712 17 22 27 32 37 42 Baker 9120+ ~16 TI r= 0.979 § 14 y=-O.04 + 0.97 * X al .~ 12 .a Q 0110 o E <D .J:: e 'Ü o al ....4t e <D § 2 1 o O IL--L---.J_-L---.J_-'-----'_--'--------l._--'---' 6 Método del microhematocrito Baker 9120+ 50[ r= 0.984 ~ / ~y=2.33 + 0.91 * X/ ~w // :; I ~/ ~3+ ,/ o ~ ./~/ ~20 // • "U • ' ~I '/< <D 10 V/' :J .-.' U.• <D • a: . o I ! I O 5 10 15 20 25 35 30 w 45 /' . .....--' .>: . /A' /r: ./ . .r--:' ./ 8./ y 6V" 8 9 10 il i2 13 14 rs 16 Analizador semiautomático Analizador semiautomático Baker 9120+ 70, r= 0.603 :1~Y=27'.44~.O'~:~ .> z: I •• '.'_ I :::::,.40 Ii • 2 ~3O 20 10 47 O L' _L---L._L....--L.--''---'----'_--'------'_-'----l.-----l 20 ~ 30 ~ W ~ 50 ~ W ~ ro ~ w Método manual 50 Fig. 2. Comparación del Baker 9120+ con el método manual o un analizador hematológico semiautomático con sangre felina (n=30). 215 Evaluación del analizador hematològico de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro y gato. J. Pastor et 01. Clinica Veterinaria de Pequeños Animales (Avepa) Vol. 18, n" 4, 1998. r~ ~4 1 JJ __ .L...--_-'-_--'- __ .L...--_-'-_--' O122436486072 Horas ~50 :§ <:; o rtí 40 j I ~::t__~'---__~__~__----''_____~__~ O -+- 2S·C 12 24 35 Horas 48 50 72 Fig. 3. Almacenamiento de la sangre canina (media de 5 animales). El asterisco indica la presencia de diferencias significativas (p<O,05) respecto al tiempo O. 12 24 36 Horas 48 60 60 [. 4"C -+- 250C 50 =40 :a, f;+.'.0' :::::::t:==::::t:::====:±:==----'¡""-"""==±==----t ~30 020 10 0'----..1-----'-------'-----'-------'--- O122436486072 Horas 40r 30 4°C -+- 25°C fE: ;;: 20 o c::: 10 Ol.-__ ~ __ ~ __ ~ __ '--__ '--_~ ° 12 24 36 48 60 72 Horas <::- 300 t 4°C -+- 2~·C ~ 'ò 250 ,¡--\ ~200 ~, '" ~~---je--_+-_--+ 5- \, -, ~ 150 ~ 100 o e '" ~50 '" c::: 0'-----"----..1----'-----'-------'-----" O 12 24 60 36 48 Horas 72 9 8 °0[ 4°C -+- 25°C ...¡....._---+-- --+ ~I I ~~=-------~-- IOL ! €60¡ d 50~ > ::~ 20 ---'-------'------'----'------'--------' O1 224 36 48 60 ?2 Horas _ :: C=2=5:::0C~~===~===::=:::::=~==:::; ~~:t O---~----'----~----'------'----~ ° 12 24 36 60 72 48 Horas 40 4°C -+- 25°C ~r' I-rF ciO Ol ::J " Ol c::: O LI '-- __ -'- .L-..__ -'- -'- __ -' O1224 36 48 60 72 40 HOr113 4'C -+- 25°C 30 72 € :;: 20 ~j~" ----+----==F":== O 12 24 36 48 60 72 Horas ili 216 Evaluación del analizador hematolégico de impedancia eléctrica Baker 9120+ con sangre de perro y gato. J. Pastor et al. Clinica Veterinaria de Pequeños Animales (Avepa) Vol. 18, n" 4, 1998. oL----'-----'-----'-----'------'----.J O 48 60 12 24 36 Horas ~:: ~ 4°C + 25°C ;fi. 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Almacenamiento de la sangre felina (media de 5 animales). El asterisco indica la presencia de diferencias significativas (p<O,05) respecto al tiempoO. 218 72 72 72 72