T abajos
o iginales
Compa ación de dos enzimo ·inmuno-
ensayos pa a alo a an icue pos
humo ales inducidos po i us del Fib o
ma
de Shope y po i us mixoma oso
de Sana elli
E.
Espuña, M. Noga eda, A.
Pagés
y
P.
Casade all
(*)
In oducción
El
conocimien o
del
es ado inmuni a io
de
una
pobl
ac
ión co
n
a el
i L<S
de
la mixo-
ma osis i
ene
muchísimas implicaciones
pníc i
cas
y puede
se
de
g an
alo
pa a
es-
udia la e icacia
de
di e sos mé odos.
la
pe s
is encia
de
la
inmunidad y
la
adopción
de
med
i
das
p o ilac icas
adecuadas.
Po
ello
la
de e minación
de
los
ni eles
de
an icue -
pos
ci culan es
en
el sue o
es
necesa
ia
pa a
l
os
es udios
se o-ep
idemiológicos así como
pa a
inal
idades
ci ínicas.
Va
ias écni
cas
se
han
ap
licado con
es a
inalidad
a
l
es
co
mo
la
Fijación
del
Com·
plemen o (1),
la
Inmunodi usi
ón
doble (2)
y la Sue oneu alizaci
ón
í ica (3).
Recien emen e
se
ha
u
ilizado
el
enzimo-
inmunoensayo
(E
LISA) indi ec o como
mé odo
de
alo ación
de
los
an icue pos
humo ales. Algunos au o es
han
empleado
el
i us
de
Sana elli como subs a o an igé-
nico
en
es a
écni
ca
(4) (5)
pa a
lle a a
ca-
bo es udios epidemiológicos
en
conejos
sal-
ajes
y dilucida
as
í
la
incidencia de anima-
les
po ado es o que hayan
es a
do
en
con-
ac o con
el
i us mixoma oso
de
Sana elli.
Noso os adap amos un E LISA
pa a
a-
lo a
la
inmunogenicidad
de
acunas
h
e e-
ól
ogas
I i
us
del Fib oma
de
Shope) con-
a la Mixoma osis
(6)
(7).
Pa a
ello abso -
bi
mos
las
mic oplacas con i us
del
Fib o-
ma
de
Shope
en
lug
a
de
u
iliza i
us
de
Sana
elli.
Es
bi
en
sabido que exis en
eac-
ciones
de
inmunidad c uzada en e
és e
y el
i us
de
l Fib oma
de
Shope (8), con i ma-
das
po
una
se
ie
de
eacciones se ológicas
ales como la aglu inación,
la
Fijaci
ón
del
Complemen o,
la
Inmunodi usión Dobl
e,
e c., con lo cual
la
u ilización
del
i us
de
Shope
nos
pe mi e alo a an icue pos h
u-
m
o a
l
es
inducidos po el i
us
de
Sana e
lli
y i
ce e sa.
En
es e
abajo compa amos
el
g ado
de
co elación exis en e en e
dos
enzimoin-
munoensayos I E LISA
S)
en
uno
de
los
cua-
les
usamos
el i us
de
l Fib oma
de
Shope
como subs a o an igénico abso bido a
las
mic oplacas y
en
el
o o
el
i us
de
l Mixo-
ma
de
Sana elli.
Ambos ELISA S
se
compa a on
en
cuan-
o
a
su
e icacia p
a a
a
lo a
la
espues a
in-
munológica
en
conejos
sin
acuna ,
en
co-
nejos inoculados con i us acunal a enua-
do
de
Sana elli,
en
conejos acunado con
i us
de
l Fib oma
de
Shope y
en
gazapos
p oceden es
de
mad es
inmuni
zadas
con el
i us
de
l Fib oma
de
Shope.
Ma e ial y mé odos
Desc ipción
de
los
ensayos:
-ELlSA-S
hope:
En
es e
ensayo u il
iza-
mos i
us
del
F ib oma
de
Shope
(cepa
Boe iage) que ue p opaga do
en
cul i os
ce-
lula es
de
R K
13
en
monocapa, ob eniéndo-
se
concen aciones
Vl
l
cas
de
105.4
DICTs o/ml.
Es e
i us
se
abso bió a
los
po-
cillos
de
las
mic oplacas cons i uyendo
el
subs a o an igénico.
La
ejecución
de
la éc-
nica y
la
lec u a
de
los
esul ados
ya
ue
desc i a an e io men e (6).
-ELlSA-Sana ell
i:
Como al designamos
al E.
LlSA
en el
cua
l
se
u i
lizó
i
us
del
Mi-
xoma
de
Sana e
ll i como subs a o an igéni-
co.
Pa a
ello
usamos
la
cepa
i ulen a R
IN
3
(*)
Dl eccló
n de l
os
au o es:
Lab
o a
o lo5
Hip
a,
S.A.
Ame
(Gi ona)
agos o 1986 I cunicul u a 133
que
se
ob u o a pa i
de
célu
l
as
R K
13
in-
ec adas a una m.d.i.
de
1.
El
i
us
abso
bi-
do
en
ía un
í u
lo
de
10
• .
4 DICT50/ml.
Es e
ensayo
se
Ilè ó a cabo
a
l como lo
desc ibió Whe he al y col.
(41
con l
as
si-
guien
es
modi i
cac
i
ones.
Se
u ili
zó
amp
ón
P
BS
pa a
abso be el an ígeno
en
luga
de
ampón ca bona obica bona o.
La
abso
-
ción
se
hizo a
+4°
C.
du an e oda la no-
ch
e.
As
imismo l
as
mic opl
acas
no ' ue on
a adas con BSA
después
de
l la ado
de
l
an-
ígeno
es
idual.
Se
u i
lizó
una
dilución
sé
i
ca
ún
ica
al
1/32
pa a
odos
los
es ajes
a
l como
en
el
E LlSA-Shope y
se
aplicó
el
Indice
de
l(1mu-
ni
dad
Re
la i a
(I
RI
pa a
hace
la
lec u a
de
los
esul ados (4
,61.
Valo ac;ón
de
los sue os.
Todas
las
mues
as
sé
icas ue on
co
n
ge-
la
das
a-35°
C.
has a
el momen o
de
su
a-
lo ación. Ambos ELISA
se
Ile a on a cabo
simul aneamen e
después
de
hace l
as
co-
espondi
en es
diluciones con el
ín
de
e
i-
a
pos
ibl
es
e a es
de
dilución al compa a
ambos
ensayos.
P og ama de acunac;ón.
Pa
a comp
oba
el
g ado de
co
el
ac
i
ón
en e
los
d
os
ensayos
(E
LI
SA-S
hope y E LI -
SA-Sana ellil
se
u
iliza on 4 g upos
de
co-
nejos que ue on some idos a di e sos a a-
mien os acunal
es.
Los
sue os
ob eni
dos
de
los
mism
os
ue on
a
lo
ados
med
ian e l
as
dos écni
cas
an
es
mencionad
as.
G upo I:
Se
u
il
iz
a on 16 conej
os
que
ue on di idid
os
en 2 g upos de 8 animales
cada
un
o.
Un
g upo se dejó como con ol y
el
o o
ue
ac
u
na
do con 1 dosis
acu
nal
(103,5DICT5o
l.
de
i us
del
Fib oma
de
Shope
a
l como
se
desc
i
be
en
la abla
1.
Todos los ani
ma
l
es
ue on ob enl
dos
de
g a i
jas
en l
as
cuales
no
se
había p ac ic
ad
o
ni
ng
una
ac
unación con a la Mixoma o
si
s.
An
es
del
in
icio de la p
ueb
a
se
comp obó
la
ause
ncia
de
an icue p
os
sé
i
cos
co
n a
es-
a
en e
medad
med
ian e el ELlSA-Shope, y
el ELl
SA
-
Sana
elli.
Se
adminis ó
una
d
os
is acunal a l
os
8
conejos po ia subcu
anea.
A
los
95 dl
as
es os
ue
on
in ec
ad
os
con 103 O I CT 5 o
de
i
us
i ul
en
o
de
Sa
na elli
cep
a RIN-3 ( i-
po I-III po ia i
n
apa
lpeb al, co
nj
u
n
a-
me
n e con
los
8 con ol
es.
Las
mues
as
sé-
i
cas
se
oma on
en
l
os
d
las
eseñados
en la
abla
1.
G upo
11:
Se
u i
lizó un g upo
de
8 cone-
jos a l
os
que
se
adm inis ó 1
dos
is acunal
(103
DI
C
T501
de
i
us
a enuado
de
San
a
e-
lli. El i
us
ac
unal
se
adm
inis ó po d
os
í
as
di
s
in as
a
l como
se
desc
ibe
en
la a-
bla
2.
Todos l
os
an
i
ma
l
es
ue on inmuni
zados
con 1 dosis
acu
nal y la in ecci
ón
expe i-
Tabla 1. P o oc
olo
de acunación con i us he e ólogo
del
Fib oma
de
Shape.
Co
n
eJ05
N.
o N .o mues
as
¡n
ec.
a
dia
s
Ob
ención sue
a
sé lcas pos - acu- dias pos - ac
unación
naclón
No
acunado
s 8 36 (*)
95
0,
6,95,
101 Y 105
V
acu
nad
os
8 40
95
0,6,95,
101 Y 105
(*)
D
os
cone
jo
5
mu
le an
po
les
lón ca d iaca
ca
u
sa
da po la e
x
a
cció
n de
sa
ng e en el m omen o de la I
n
ecclón e
xp
e i-
men al en el d
ia
95, po lo cua
no
pudlm
os
ab ene
la
s 4 mues as sé
l
cas
en
los d ias
101
y
10
5 .
Ta
bla
3.
P
o o
colo
de
a
cun
ac
ión con i us de Sana elli a enuada
in
ocu/ada
po
la subc
u a
nea
yen
do-
eno
sa.
ia ad
ml
nis a
ción
N.o conejos N.o
mu
es
a
s I
n ec
. di
as
Toma mu
es
as
pos - acuno d ías pos - acuno
Subcu
an
ea 4 27 1*1
54
3
,10,
13,5
4,
End
o en
osa
4 28
61
,68y74
(*)
Un
canejo
mu
l6
deb
l
do
a las ep
e
ldas
ex acclones
de
sa
ng e, po lo cual el n
um
e
o
de
mu
es
as
sé
l
cas
ob
enldas
dl le e
IIge amen e
del
o a
l espe ada.
134 agos o 1986 I cunicul u a
J~jÚj
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hizo a l
os
54 días con
10
3
DICTs o
de
i us i ulen o
de
Sana e
lli
cepa
RI
N
-3
po ía in apalpeb al.
G upo III: Valo ación de sue os de gaza·
pos p oceden es de mad es
ac
unadas con
i
us del Fib oma de Shope.
Se
adminis ó una dosis acunal del Vi·
us
del
Fib oma
de
Shope a 5 conejas
ges·
an es.
Dos
gazapos
de
cada
una
de
es as
conejas ue on some i
dos
a cua o ex ac·
ciones
de
sa
ng e
desde
el día
del
na
cimien·
o
has a
l
os
35 d(as
de
edad. A con inua·
ción
las
mues as
sé
i
cas
se
a
lo a
on
po
ELlSA·Shope y ELlSA·Sana elli.
G upo IV: Valo ación de sue os
de
cone·
¡os no acunados con a
la
Mixoma osis.
Se
ob u ie on 140
sue os
de
conejos p o·
ceden es
de
g an
j
as
en
las
cua
les
no
se
ad·
minis aba ninguna acuna.
Todos
los
sue os
ue on congelados a
-35
0
C.
has a
el
momen o
de
su
a
lo ación
u ilizando
el
ELlSA·Shope y
el
ELlSA·
Sa·
na elli. Calculados
los
índices
IR
de
cada
sue o
pa a
cada
una
de
las
2 ELlSAS's,
és·
os
se
in oduje on
en
un o denado .
Con
un
p og ama
es ad
ís ico
pa a
el
calculo
del
coe icien e
de
co elación en e
la
a iable ELlSA·Shope y la a iable
ELl·
SA·Sana ell
i.
Resul a
dos
G upo I: Conejos con ol y
ac
un
ados
con i us
del
Fib oma
de
Shope.
G upo
11
: Conejos acunados con il
us
a enuado
de
l Mixoma
de
Sana e
lli po ía
subcu anea yendo enosa.
Las
g Micas 1 y 2 mues an la ciné i
ca
de
an icue pos humo al
es
es ados po ELISA·
Shope y E LlSA·Sana elli
de
los
co
nejos
a·
cunados po ía subcu anea y po ía endo·
enosa.
G upo III:
Va
lo ación
de
sue os
de
gaza·
pos
p oceden es de mad es
acunadas
con
i us
del
F ib oma
de
Shope.
Los
esul ados quedan e lejados
en
la
g Mica
3.
G upo IV:
Va
lo ación
de
sue os
de
gaza·
pos
y conejos adul os no acunados con a
la
Mixoma osis.
De
los
140
sue os
ensayados, 122
e an
o almen e nega i os po
las
dos
écnicas,
12
e an
pos
i i os po
las
d
os
écnicas, 4
e an
posi i
os
po E LlSA·Sho
pe
y nega i·
os
po ELISA·Sana elli y 2 e
an
pos
i i os
po ELlSA·Sana elli y
nega
i
os
po
ELl·
SA·Shope.
Po
lo
cua
l
la
sensibilid
ad
del
ELISA·Shope con
e
lación
al
ELlSA·Sana·
Tabla 3. Coe icíen es de co elación
( )
de los sue os de conejos no acunados V acunados con i us del
Fib oma de Shope, an es V
después
de la in ección expe imen al, alo ados
po
E LlSA·Shope V E
LISA·
Sana elli.
Conejos
An es
In ecclón
Después
In ec
c
l6
n
Ne
acunades 0.957
In
= 24) 0.906
In
= 12) I")
Vacunades 0.879
In
= 24) 0.577
In
= 16)
C*)
n =
núme o
de mues as ensayadas.
T
al:lla
4. Coe icien es de co elación de los sue os de conejos acunados con i us a enuada del Mixoma
de Sana elli, u ilizando
la
ia subcu anea V endo enosa, compa ando ELISA-Shape V ELISA-Sana elli
an es V después de
la
in eccíón expe imen al con i us i ulen o. .
ia
adminis aci6n
An es
In eccl6n
Después
In ecc
l
6n
Subc
u
anea
0.926
In
= 16) 0.686 In =
111
Endo enosa 0.855
In=
171
0.569
In
=
11
1
agos o 1986 I cunicul u a 135

I
ndice
IR
(ELI
SA)
240
220
200
180
160
140
1
20
100
80
40
--
20
"''''
......
--
--
I
I
INF
I
I
I
¡ -..
I
G a lca
1.
Respues a
hum
o al
en co-
neJos
acunados
po
ia
subc
u an
ea e
In ec ados
con
i us
i ulen o.
Va
l
o,
es
E
Ll
SA-
IR
(iTi
4 sue os).
)
10
1)
54
61
6 l.
74
L>Íal5
po
s
.
_
acuneci6n
ELISA-Sana elli
ELISA·Shape
e
l I i ue del 85 po cien o y la especi icidad
ue
de
l 96 po cien o.
Discusión
En
es as
p uebas comp obamos que e ec-
i amen e los an icue pos
sé
i
cos
inducidos
po el i us
de
l Fib oma
de
Shope y po el
i us del Mixoma
de
Sana elli, pueden
de-
ec a se y
a
lo a se
med
ian e el ELISA-
Shope y
el
ELlSA-Sana elli, debido a la
ex
is encia
de
an igenos comun
es
en
ambos
i us.
Po
ello, el sue o
de
cua
l
qu
i
e
conejo
a-
cunado con
una
acuna
que con enga i us
de
Shope o i us a enuado
de
Sana e
lli po-
136
dní
a
lo a se acilmen e po
ambas
écni-
cas.
Hemos posido obse a que el g ado
de
co elación en e
los
dos
ensayos
al
a
lo a
sue os
de
conejos acunados
con
el i us
del
Fib oma
de
Shope e a muy al
o
( = 0.879) al como puede ap eci
a se
en
la
abla
3.
Sin emba go,
después
de
la
in ec-
ci
ón
expe imen al con i
us
i
ulen o
de
Sana e
lli
se
p oduce un ma cado
descenso
de
la
co
elac
i
ón
en e l
os
2 ensayos
(
=·
0.577)
aún
cua
nd
o con inúa siendo
posi i a.
Es e
hecho pod ía
debe se
a
una
des ia-
ción impo an e p oducida po el es ímulo
an igénico
de
l i
us
i ulen o
de
in ecci
ón
agos o 1986 I cunicul u a
¡TECNICOS,INDUSTRIALES
,
GANADEROS
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DICCIONARIO
AVICOLA-GANADERO
INGLES-ESPAÑOL
POULTRY
&
LlVESTOCK
DICTIONARY
SPANISH-ENGLlSH
José A. Cas elló
Di ec o
de
la
REAL ESCUELA OFICIAL Y
SUPERIOR
DE
AVICULTURA
A enys de Ma (Ba celona)
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ocablos
y acepciones inglesas
aducidas
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Con iene:
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Dicciona io Inglés·Espai' ol
- Oicciona io Español·lnglés
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Tablas de Con e siones y Equi alencias
-42
Siglas de O ganizaciones en A icul u a y Ganade i8
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Sana el
li muy supe i
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que
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de ec a
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po ELlSA-Sana elli
después
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dos
con un i us mixoma oso a enuado
(g 8 icas 1 y
2)
se
debe p obablemen e a
137