Compuestos bioactivos polifenólicos conteniendo azufre o selenio y sus usos

ES 2 392 915 B1 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 21 Número de publicación: 2 392 915 Número de solicitud: 201100639 51 Int. CI.: C07C 321/10 (2006.01) C07C 321/20 (2006.01) C07C 335/12 (2006.01) C07C 391/00 (2006.01) A61K 31/095 (2006.01) A61K 31/10 (2006.01) A61K 31/17 (2006.01) A61P 7/02 (2006.01) A61P 9/00 (2006.01) A61P 25/28 (2006.01) A61P 29/00 (2006.01) A61P 31/00 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) 12 PATENTE DE INVENCIÓN B1 54 Título: COMPUESTOS BIOACTIVOS POLIFENÓLICOS CONTENIENDO AZUFRE O SELENIO Y SUS USOS 73 Titular/es: UNIVERSIDAD DE SEVILLA (50.0%) OTRI-PABELLÓN DE BRASIL, PASEO DE LAS DELICIAS SN 41012 SEVILLA (Sevilla) ES y INSTITUTO DE LA GRASA (CSIC) (50.0%) 72 Inventor/es: FERNÁNDEZ-BOLAÑOS GUZMÁN, Jose Maria; MAYA CASTILLA, Inés; LÓPEZ GARCIA, Maria Angeles; FERNÁNDEZ-BOLAÑOS GUZMÁN, Juan; RODRIGUEZ GURIÉRREZ, Guillermo y GÓMEZ CARRETERO, Antonio 22 Fecha de presentación: 03.06.2011 43 Fecha de publicación de la solicitud: 14.12.2012 Fecha de la concesión: 03.09.2013 45 Fecha de publicación de la concesión: 13.09.2013 57 Resumen: Compuestos bioactivos polifenólicos conteniendo azufre o selenio y sus uso. La invención se refiere a compuestos que contienen al menos un grupo polifenol y azufre o selenio y sus usos como antioxidantes y captadores de radicales libres. Además, se refiere a las composiciones farmacéuticas, nutracéuticas y cosméticas que los incluyen. Se puede realizar consulta prevista por el art. 37.3.8 LP. Aviso: COMPUESTOS BIOACTIVOS POLIFENÓLICOS CONTENIENDO AZUFRE O SELENIO Y SUS USOS La presente invención se refiere a unos compuestos que contienen al menos 5 un grupo polifenol y azufre o selenio y sus usos como potentes antioxidantes y captadores de radicales libres, y por tanto de aplicación en la industria alimentaria, industria cosmética e industria farmacéutica. Por tanto, la presente invención se enmarca en el campo químico-farmacéutico. 1 O ESTADO DE LA TÉCNICA Los polifenoles son una amplia familia de compuestos que se encuentran, entre otros alimentos, en la fruta, la verdura, el vino, el té, el cacao y el aceite de oliva virgen extra y que muestran una marcada actividad 15 antioxidante. Uno de los polifenoles más abundantes y más efectivos como antioxidante y atrapador de radicales libres es el hidroxitirosol, 2-(3,4- dihidroxifenil)etanol, un polifenol que predomina en el olivo (Olea europea), y que muestra una contrastada actividad en la prevención y tratamiento de enfermedades cardiovasculares, como la aterosclerosis, cáncer, 20 enfermedades neurodegenerativas, diabetes u osteoporosis. El hidroxitirosol muestra actividad anticancerígena, previene de la degeneración macular relacionado con la edad, actúa como fotoprotector evitando el daño inducido por la radiación ultravioleta, y presenta actividad 25 como anti-inflamatorio. También presenta actividad antimicrobiana frente a patógenos, como el Helicobacter pylori y el Mycoplasma neumoide. También posee actividad anti-VIH. Por otro lado, el azufre es un elemento químico esencial, ya que compuestos 30 que contienen azufre como aminoácidos, proteínas, enzimas y micronutrientes poseen importantes funciones en la bioquímica celular. Los compuestos organosulfurados naturales se encuentran frecuentemente en   2 ES 2 392 915 B1 DESCRIPCIÓN 5 vegetales, particularmente en los vegetales Allium y Cruciferous. En especial ajo, cebolla, cebolleta, cebollinos y puerro son ricos en dialil sulfuro, dialil disulfuro, dialil trisulfuro, S-alii-L-cisteina sulfóxido y ajoeno. El brócoli, la col y las coles de Bruselas son ricas en sulforafano. Además, se ha estudiado la influencia de los compuestos sulfurados en la prevención de enfermedades cardiovasculares, neurodegenerativas, inflamatorias y cáncer, habiéndose comprobado cómo ciertos compuestos organosulfurados presentan propiedades antioxidantes (Battin, Erin E.; 10 Brumaghim, Julia L. Ce// Biochem. Biophys. 2009, 55, 1-23), antiaterosclerótica, antiproliferativa, antibacteriana, inhibición de la agregación plaquetaria, reducción de la presión sistólica de la sangre y reducción de los niveles de colesterol (Vazquez-Prieto, M. A.; Miatello, R. M. Mol. Aspects Med. 201 O, 31, 540-545). Por ejemplo, el sulfuro de bis[2-(3,4- 15 dihidroxifenil)etilo] ha sido descrito como un agente terapéutico útil para la nefritis. En derivados organoselénicos, estudios epidemiológicos y clínicos en humanos, así como ensayos de laboratorio, apoyan el papel protector del 20 selenio frente al desarrollo del cáncer. Los resultados han demostrado que un suplemento de selenio en la dieta inhibe la proliferación de células cancerígenas, induce la apoptosis de las células tumorales, suprime la metástasis en animales y reduce en humanos el riesgo de cáncer de próstata, de pulmón, de mama y colorrectal. Se ha demostrado que tanto la 25 dosis, como la forma química en la que se administre el selenio, son factores críticos en la respuesta celular. Existen evidencias de que muchas de las numerosas actividades que tiene el selenio en los sistemas biológicos se deben a su capacidad de actuar como antioxidante (Naithani, R. Mini-Rev. Med. Chem. 2008, 8, 657-668). Los selenocompuestos han mostrado una 30 mayor actividad anticancerígena en comparación con sus isósteros de azufre.   3 ES 2 392 915 B1 Las selenoureas son compuestos de interés tanto desde el punto de vista biológico como sintético. En relación con su actividad biológica, se ha descrito el uso de selenoureas como agentes despigmentantes, debido a su capacidad de inhibición de la tirosinasa, como atrapadores de radicales 5 superóxido y como potenciales agentes radioprotectores. El método más utilizado para la obtención de selenoureas es la reacción de isoselenocianatos con aminas. Determinados selenuros y diselenuros han mostrado actividad antioxidante, 1 o antinociceptiva, antiinflamatoria y antidepresiva. En concreto, el diselenuro de difenilo (PhSe-SePh) inhibe la peroxidación lipídica, actúa como antinociceptivo, antiulceroso, ansiolítico, antiinflamatorio y antidepresivo, y tiene efecto neuroprotector e hipoglucémico. Dicho compuesto y otros análogos han exhibido actividad hemolítica y genotóxica en células del 15 plasma humano. El campo de aplicación de este tipo de compuestos con poder antioxidante, es tan amplio que puede ser de interés la búsqueda de compuestos alternativos o que tengan propiedades mejoradas a los anteriormente 20 citados. DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a compuestos cuya estructura resulta de la 25 combinación de la función polifenólica (monohidroxi, dihidroxi o polihidroxi fenólicas, por ejemplo hidroxitirosilo) con grupos funcionales conteniendo azufre y/o selenio, dando lugar a estructuras tales como tiol, disulfuro, tioacetato, tiourea, selenuro, diselenuro, selenonio y selenourea, para la potenciación y mejora de la actividad biológica de polifenoles. Estos 30 compuesto mejoran de forma notable las propiedades como antioxidante y secuestrante de radicales libres en distintos sistemas y matrices, por ejemplo en medio acuoso, medio lipófilo, en emulsión y en células microsomales.   4 ES 2 392 915 B1 5 Los compuestos de la presente invención también han mostrado actividad como inhibidores de la tirosinasa, implicada en reacciones de pardeamiento enzimático. Los compuestos de la invención son potentes antioxidantes y captadores de radicales libres y de esta manera son útiles para su aplicación en los siguientes sectores de actividad: industria alimentaria, industria cosmética e industria farmacéutica. En concreto para la industria farmacéutica, el uso de 1 o estos compuestos irá encaminado a la obtención de nuevos fármacos o formulaciones que los contengan, y serían útiles en la prevención y tratamiento de enfermedades cardiovasculares, neurodegenerativas, y tumorales; además como antiinflamatorios, antimicrobianos y antivirales. 15 Dentro de la industria alimentaria pueden ser útiles para la formulación de alimentos funcionales o como aditivos para prevenir el deterioro del alimento mejorando sus propiedades físico-químicas, organolépticas o nutricionales. Y en la industria cosmética, estos compuestos podrán utilizarse como componentes de cremas solares y antienvejecimiento por su capacidad de 20 captación de radicales libres. 25 Por tanto, un primer aspecto de la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula general (1) para la elaboración de una composición antioxidante o como oxidante: (1) donde: R1 y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno (H}, alquilo (C1-C4) o acetilo   5 ES 2 392 915 B1 5 (-COCH3 ). Preferiblemente R1 y/o R2 son hidrógeno, metilo o acetilo y más preferiblemente R1 y R2 son hidrógeno. R3 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo (C 1 -C4 ), acetilo, -C(=Z)-NH-R7, el grupo de fórmula (11) o el grupo de fórmula (111): \-v (11) (111) 10 X se selecciona de entre S, Se, NH o X'-R4; donde X' es S o Se y R4 es el grupo de fórmula (111); R5 y R6 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, alquilo (C 1 -C4) o acetilo. Preferiblemente R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo; 15 Y es S o Se; Z es S o Se; y R7 se selecciona de entre alquilo (C1-C1 8 ), fenilo (-CsH5), sustituido o sin sustituir o bencilo (-CH2 -C6H5 ), sustituido o sin sustituir. 20 El término "alquilo" se refiere en la presente invención a cadenas alifáticas, lineales o ramificadas, sustituidas o no sustituidas, en el caso de R1, R2, R3, R5 y R6 tienen de 1 a 4 átomos de carbono, preferiblemente se selecciona de entre un alquilo C1-C2, más preferiblemente el grupo alquilo es un metilo y en el caso de R7 tienen de 1 a 18 átomos de carbono, preferiblemente se 25 selecciona de entre un alquilo C1 -C9, más preferiblemente el grupo alquilo es un butilo. Ejemplos de grupos alquilo, pero sin limitarse, son metilo, etilo, npropilo, i-propilo, n-butilo, tert-butilo o sec-butilo. Opcionalmente el grupo alquilo puede estar sustituido.   6 ES 2 392 915 B1 Por "fenilo" se entiende al grupo -C 6H5, que puede estar sustituido o sin sustituir. El grupo fenilo sustituido puede estar sustituido con al menos un sustituyente, preferiblemente está sustituido con un sustituyente y más preferiblemente el sustituyente estaría en posición para. Los sustituyentes 5 pueden ser seleccionados de lista que comprende, pero no limita, hidrógeno, alquilo (C1-C4), sustituido o sin sustituir, hidroxilo, alcoxilo, amina, tiourea o selenourea, y estos sustituyentes a su vez pueden estar opcionalmente sustituidos. Preferiblemente los sustutiyentes son hidrógeno, alquilo como se ha definido anteriormente y alcoxilo. 10 Por "bencilo" se entiende el grupo (-CH2-C 6 Hs), que puede estar sustituido o sin sustituir. El grupo fenilo sustituido puede estar sustituido con al menos un sustituyente que se puede ser seleccionados de lista que comprende, pero no limita, hidrógeno, alquilo (C1-C4) sustituido o sin sustituir, hidroxilo, 15 alcoxilo, amina, tiourea o selenourea, y estos sustituyentes a su vez pueden estar opcionalmente sustituidos. Preferiblemente el grupo bencilo no está sustituido. Por "alcoxilo" se entiendo el grupo -ORa, donde Ra es un grupo alquilo(C1 - 20 C4) como el descrito anteriormente. Preferiblemente el alcoxilo es metoxilo. En una realización preferida X es S o Se, y más preferiblemente R3 es hidrógeno, acetilo. 25 En otra realización preferida X es S o Se y R3 es el grupo de fórmula (11), dando lugar al compuesto (la): X-Y (la)   7 ES 2 392 915 B1 5 donde: R1, R2, R5, R6 e Y se han definido anteriormente. En otra realización preferida X es S o Se y R3 es el grupo de fórmula (111), dando lugar al compuesto (lb): X (lb) donde: R1, R2, R5, R6 se han definido anteriormente. En otra realización preferida, X es X'-R4 y más preferiblemente R3 es el 10 grupo de fórmula (111), dando lugar al compuesto de fórmula (le): OR 5 (le) donde: X', R 1, R2, R5, R6 se han definido anteriormente, R5 y R6 pueden ser iguales o diferentes entre sí o entre los R3 y R4 a los que pertenecen. A es 15 un anión que preferiblemente es un halógeno y aun más preferiblemente el anión es de bromo. Aún más preferiblemente X' es Se. 20 En otra realización preferida X es NH, más preferiblemente R3 es el grupo - C(=Z)-NH-R7 dando lugar a un compuesto de fórmula (Id):   8 ES 2 392 915 B1 (Id) donde: Z, R1, R2y R7 se han definido anteriormente. Preferiblemente cuando 5 Z es S, R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por al menos un grupo alquilo (C 1-C4 ) o bencilo, más preferiblemente R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por un metilo o bencilo. Cuando Z es Se, preferiblemente R7 es un fenilo, sustituido o sin sustituir, más preferiblemente el grupo fenilo no está sustituido o está sustituido por un 10 grupo alquilo (C1 -C4) o un grupo alcoxilo, tal y como se han definido anteriormente. En una realización preferida, el compuesto se selecciona de la lista que comprende: 15 4-(2-Acetiltioetil)-1 ,2-diacetoxibenceno (8) 4-(2-Sulfaniletil)benceno-1 ,2-diol (1 O) Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11) Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13) Bromuro de tris(3,4-dihidroxifenetil)selenonio (17) 20 1-Butil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (24) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) tiourea (25) 1-Bencil-3-(3,4-dihidroxifenetil)tiourea (26) 1-Fenil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (27) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31) 25 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33) Diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (12) Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15) Diselenuro de bis(3,4-dimetoxifenetilo) (16) o   9 ES 2 392 915 B1 Se ha llevado a cabo la primera síntesis de selenuros y diselenuros derivados de hidroxitirosol utilizando selenuro y diselenuro de sodio. Se ha generado in situ el selenuro por reacción de selenio elemental con 5 borohidruro de sodio bajo atmósfera inerte. Para la obtención del diselenuro Na2 Se2 se hace reaccionar el Na2Se con un equivalente extra de Se elemental. Las soluciones fuertemente básicas en las que se prepara el selenuro y el 10 diselenuro sódico se neutralizan añadiendo co2 sólido hasta formar un tampón carbónico/bicarbonato. Sobre estas soluciones se añade bajo atmósfera inerte 5, 6 o 7 formándose el diselenuro de bis(3,4- diacetoxifenetilo) 12 tanto a partir del diselenuro sódico como del selenuro sódico. La desacetilación del diselenuro 12 dio lugar al diselenuro de bis(3,4- 15 diacetoxifenetilo) (13) (Esquema 4). AcO~,, x ___ _ " Na2Sex AcO ó 5X=CI 6X= Br 7X= 1 1 1 ~ AcO~SeSe~oAc AcO .-<' 112 .-<' OAc HO~SeSeuOH 1 1 ~ ó ó HO 13 OH Esquema 4 La reacción de los haluros de 3,4-dimetoxifenetilo 14a-c con Se2 - y con Se2 2 - 20 permitió obtener el selenuro 15 y el diselenuro 16 (Esquema 5). MeO~ X MeO~ 14a X= Cl 14b X= Br 14c X= 1 MeO~Sex~OMe ~ lA MeO 15 x= 1 OMe 16 X= 2 Esquema 5   16 ES 2 392 915 B1 Estos mismos procedimientos se llevaron a cabo a partir de los haluros 2-4 para obtener directamente el diselenuro, pero los rendimientos de reacción fueron bajos, además de detectarse la presencia de impurezas. 5 En la desprotección del diselenuro 0-metilado 16 se obtuvo el diselenuro 13 (Esquema 6). Sin embargo, a partir del selenuro 15 se obtuvo el bromuro de selenonio 17 (Esquema 7). 10 MeO~Se·se~OMe 1 ~ 1 ó ó MeO 16 OMe HO~Se·Se~OH BBr3• ~~ ~ HO ó 13 ó OH Esquema 6 MeO~Se~OMe __ ss_r3 __ MeO~ ~OMe 15 Esquema 7 ló HO~: Br + HO~Se~OH HO~ ~OH 17 Con objeto de obtener selenoderivados más lipófilos y estables se procedió 15 a la acetilación del diselenuro 13 y del la sal de selenonio 17 obteniéndose 12 y 18, respectivamente (Esquema 8). HO~Se·Se~OH 1 ~ 1 ó ó HO 13 OH AcO~Se·se~OAc _A;,..;,:C:!"'-'0'--- 1 ~ 1 ó ó AcO 12 OAc OH OAc HO AcO - - Br Br + HO~Se~OH HO~ ~OH 17 + AcO~Se~OAc ~ ~ AcO 18 OAc Esquema 8   17 ES 2 392 915 B1 Tioureas y selenoureas derivadas de la dopamina Se prepararon una serie de tioureas y selenoureas derivadas de la dopamina. Para la síntesis de tioureas se hizo reaccionar la dopamina hidrocloruro 19 con alquil y aril isotiociantos. Por ejemplo, las nuevas 5 tioureas 24-27 se obtuvieron por reacción de los isotiocianatos 20-23 con dopamina hidrocloruro 19, utilizando trietilamina como base y metanol como disolvente (Esquema 9). 10 R-NCS----- 20: R =n-Bu- 21: R = p-CH3CsH4- 22: R = PhCH2- 23: R = Ph- Esquema 9 De manera similar, se describen las primeras selenoureas derivadas de la dopamina por reacción de aril isoselenocianatos con dopamina hidrocloruro. Los aril isoselenocianatos se prepararon a partir de las correspondientes formamidas según un procedimiento descrito (López O.; Maza, S.; Ulgar, V.; 15 Maya, 1.; Fernández-Bolaños, J. G. Tetrahedron 2009, 65, 2556-2566). 20 Se obtuvieron las selenoureas 31-33 por reacción de los correspondientes isoselenocianatos 28-30 con clorhidrato de dopamina con rendimientos casi cuantitativos (Esquema 1 0). HO~NH 2 .HCI 1 + HO .ó 19 ~Se R 28 R = H 29 R =Me 30 R = OMe Esquema 10 H H HO~NI(N~ HO~ Se ~R 31 R = H 32 R =Me 33 R = OMe ENSAYOS DE ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE IN VITRO   18 ES 2 392 915 B1 A continuación se representan los resultados obtenidos en las pruebas de poder reductor, actividad antirradical DPPH, actividad antirradical ABTS, inhibición de la oxidación primaria e inhibición de la oxidación secundaria para los compuestos 8-11 (Tabla 1), el diselenuro 13, el selenonio 17, las 5 selenoureas 31-33 (Tabla 2) y las tioureas 24-27 (Tabla 3). Poder reductor del hierro. Este método se basa en la capacidad de los antioxidantes para facilitar la reducción del hierro. Se empleó de FeCb como oxidante. El ión Fe2+ formado 10 en la reacción redox forma un complejo coloreado con el 2,2'-bipiridilo, el cual es medido espectrofotométricamente. El poder reductor (PR) se calculó de la ecuación obtenida por regresión linear para el Trolox, según la modificación del método de Psarra y coi.(Psarra, E.; Makris, D. P.; Kallithraka, S.; Kefalas, P. J. Seí. Food Agríe. 2002, 82, 1014-1020.) descrita 15 por Jiménez y col., (Jiménez, A.; Rodríguez, R.; Jaramillo, S.; Rodríguez, G.; Espejo, J.A.; Guillén, R.; Fernández-Bolaños J.; Heredia, A. J. Agríe. And Food Chem. 2005, 53, 5212-5217) y se expresa como equivalentes Trolox (mM trolox): PR = 1932 x ~go- 177.48 20 Actividad antirradical. Captación de radicales DPPH. La actividad antirradical expresada como EC 50 frente al DPPH representa la cantidad de antioxidante necesario para disminuir la concentración de DPPH al 50%. Se utilizó el método de Sánchez-Moreno (Sánchez-Moreno, C.; Larrauri, J. A.; Saura-Calixto, F. J. Seí. Food Agríe. 1998, 76, 270-276) con 25 las modificaciones de Jiménez y col. ((Jiménez, A.; Rodríguez, R.; Jaramillo, S.; Rodríguez, G.; Espejo, J.A.; Guillén, R.; Fernández-Bolaños J.; Heredia, A. J. Agríe. And Food Chem. 2005, 53, 5212-5217). Actividad antirradical. Captación de radicales ABTS. 30 La actividad antirradical expresada como EC5o frente al ABTS representa la cantidad de antioxidante necesario para disminuir la concentración de ABTS   19 ES 2 392 915 B1 5 al 50%. Se empleó una modificación de los métodos descritos por Re y col. (Re, R.; Pellegrini, N.; Proteggente, A.; Pannala, A.; Yang, M., Rice-Evans, C. Free Radie. Biol. Med. 1999, 26, 1231-1237 y Gülgin. (Gülc;in, l. Chemieo- Biologieallnteraetions, 2009, 179, 71-80) Inhibición de la oxidación primaria del ácido linoleico en emulsión. Método del tiocianato férrico. Se empleó el método de Mitsuda y col. (Mitsuda, H.; Yasumoto, K.; lwami, K. Eiyo to Shokuryo, 1966, 19, 210-214) con algunas modificaciones, 10 basado en la oxidación del ácido linoleico en emulsión, inducida por ABAP y por calentamiento. Durante este proceso se forman radicales peróxido que oxidan el Fe2+ a Fe3 +, el cual forma un complejo de color rojo con el anión SCN-, el cual se mide espectrofotométricamente. La función de los antioxidantes consiste en reducir el Fe3 +, con lo que se evita la formación de 15 complejos coloreados.(Gülc;in, l. Lite Sei. 2006, 78, 803 -811) Los valores obtenidos se representaron en función del EC50, es decir, la concentración de oxidante a la cual la oxidación primaria desciende en un 50%, expresado en unidades mM. 20 Inhibición de la oxidación secundaria del ácido linoleico en emulsión. Método del ácido tiobarbitúrico (TBA). Se utilizó el procedimiento descrito por Moon y coi.,(Moon, J.K.; Shinamoto, T. J Agríe Food Chem. 2009, 57, 1655-1666) con algunas modificaciones, basado en la medida de la cantidad de malondialdehído formado por 25 oxidación del ácido linoleico (inducida por ABAP y calentamiento prolongado), que reacciona con ácido tiobarbitúrico (TBA) formando un complejo coloreado. Con este método se mide la concentración de las especies reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS). Los resultados obtenidos se expresaron en función del EC 50 en unidades mM. 30   20 ES 2 392 915 B1 Tabla 1: Valores obtenidos para las pruebas de actividad biológica in vitro de 8, 9, 10, 11. Actividad Ox. Ox. Compuesto PR(mM antirradical Primaria Secundaria Trolox) DPPH ECso(mM) TBARS2s ECso~mM} ~mM} 8 6,74 9 0,84 1,87 2,37 1,61 10 2,76 0,98 1,34 0,80 11 2,58 1,18 0,33 0,71 HT 1 '11 1,43 4,92 0,94 5 En cuanto al poder reductor, el mejor resultado con diferencia se consiguió con el tiol 10, seguido del disulfuro 11 (2,76 mM y 2,58 mM, respectivamente, medido en equivalentes de Trolox), que han mostrado un incremento superior al 200% con respecto al poder reductor de 9 (0,85 mM), es decir, tres veces el del HT. El derivado 9 presenta un poder reductor 1 o similar al del HT (1, 11 mM), mientras que el compuesto 8 no muestra poder reductor. En relación con la actividad antirradicalaria el mejor resultado se consiguió con el tiol 1 O, seguido del disulfuro 11. La capacidad antirradicalaria de 9 no 15 es destacable, mientras que el compuesto 8 es inactivo. Respecto a la inhibición de la oxidación primaria, cabe destacar el elevado potencial del disulfuro 11, más de diez veces superior al del HT. También son destacables los datos obtenidos para el tiol 1 O y el tioacetato 11, 20 mejores que los del hidroxitirosol. Aunque el derivado 8 mostró inhibición, su valor no mejora al del HT, si bien es destacable al tratarse un derivado con su grupo catecol protegido. Y respecto a la oxidación secundaria, son los que presentan de nuevo un 25 mayor potencial con respecto al HT (hidroxitirosol).   21 ES 2 392 915 B1 5 De los datos de la tabla para la oxidación secundaria, se deduce el elevado poder inhibidor de los compuestos sulfurados, especialmente el tiol 10 y el disulfuro 11, con EC 50 de 0,80 y 0,71 mM, respectivamente. Tabla 2: Valores obtenidos para las pruebas de actividad biológica in vitro del selenuro 13, el selenonio 17, ~las selenoureas ~8 20 31-33. PR Actividad Actividad Ox. Ox. antirradical antirradical Primaria Compuesto (mM DPPH ABTS ECso Secundaria Trolox) ECso!mMl ECso!mMl !mMl ECso(mM) 13 5,61 0,64 0,031 0,43 0,26 17 6,02 0,51 0,021 0,42 0,17 31 2,78 0,77 0,055 1,34 0,40 32 2,03 0,72 0,059 1,09 0,38 33 2,29 0,80 0,028 1,99 0,22 HT 1 '11 1,43 0,210 4,92 0,94 El poder reductor de las selenoureas es aproximadamente el doble que el del hidroxitirosol. Para el selenuro 13 y el selenonio 17 se obtuvieron valores 10 hasta más de 5 veces superiores, lo cual indica el elevado potencial reductor de los derivados del selenio. Los valores de captación de radicales DPPH obtenidos para los selenocompuestos 13, 17 y 31-33 demuestran que todos los 15 selenocompuestos son buenos captadores de radicales a baja concentración, y en todos los casos esta capacidad es mayor que la del hidroxitirosol (HT). Especialmente significativo es el resultado obtenido para el selenonio 17, el cual presenta un potencial de captación de radicales libres casi tres veces mayor que el del HT. 20 De los datos obtenidos para la captación de radicales ABTS se deduce que al igual que en el caso del DPPH, el selenonio 17 es el que presenta menor EC 50 , lo cual indica su elevada capacidad para secuestrar radicales libres, 1 O   22 ES 2 392 915 B1 5 veces mayor que el hidroxitirosol. Los compuestos testados poseen todos un poder de captación de radicales ABTS mucho mayor que el del HT. Dentro de las selenoureas, el derivado 33 es el que presenta un valor superior a sus homólogos selenoureídos Los resultados obtenidos muestran la elevada capacidad e inhibición de la oxidación primaria del diselenuro 13 y del selenonio 17, más de 10 veces superior al HT. También son destacables los datos obtenidos para las selenoureas 31-33. En todos los casos los valores obtenidos superan a los 10 del hidroxitirosol. Los selenoderivados 13 y 17 muestran un poder de reducción de la oxidación primaria superiores a las selenoureas. De los datos de la tabla para la oxidación secundaria, se deduce el elevado poder inhibidor de los compuestos del selenio, especialmente el selenonio 15 17, cuyo ECs 0es tan sólo 0,17 mM. Las diferencias entre los valores de EC50 obtenidos para los organoselenoderivados 13 y 31-33 y el hidroxitirosol muestran el magnífico poder antioxidante en cuanto a oxidación secundaria, y por tanto de inhibición de formación de especies reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) de estos compuestos. 20 Tabla 3: Valores obtenidos para las pruebas de actividad biológica in vitro de las ti o ureas 24-27. PR Actividad Actividad Ox. Ox. antirradical antirradical Primaria Compuesto (mM DPPH ABTS ECso Secundaria Trolox) ECso!mM} ECso!mM} !mM} ECso(mM) 24 2,30 1 '12 0,050 2,50 0,55 25 2,38 1,01 0,040 1,20 0,30 26 1,43 1,00 0,029 1,32 0,36 27 2,86 1,20 0,057 1,01 0,32 HT 1 '11 1,43 0,210 4,92 0,94   23 ES 2 392 915 B1 Para el poder reductor de los tioderivados, en todos los casos se obtuvieron valores superiores a los del hidroxitirosol. La tiourea 27 muestra un poder reductor unas 25 veces superior al del HT. 5 Los valores de EC 50 (mM) obtenidos en la prueba de captación de radicales DPPH para las tioureas 24-27 indican que en todos los casos el poder antirradical es superior al del hidroxitirosol. Los resultados obtenidos para el EC 50 (mM) en la prueba de captación de 1 o radicales libres ABTS superan con creces a los del HT, entre 3 y 7 veces mejores. La tiourea 26 es la que presenta un mejor valor. En el ensayo de inhibición de la oxidación primaria para las tioureas 24-27, éstas muestran mejores valores que en el HT, entre 2 y 5 veces mejores que 15 el HT. 20 Los datos obtenidos en las pruebas de inhibición de la oxidación secundaria del ácido linoleico para las tioureas 24-27 muestran que éstas son entre 1,7 y 3 veces mejores que el HT. ENSAYOS DE ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE EX VIVO Inhibición de peroxidación microsomal Los productos a ensayar se incubaron, siguiendo el protocolo de Mitchell y coi.(Mithchel, J.H.; Gardner, P.T.; McPhail, D.B.; Morrice, P.C.; Collilns, A.R.; 25 Duthie, G.G. Archiv. Biochem. Biophys. 1998, 360, 142-148), con microsomas hepáticos (vesículas que resultan de la fragmentación del retículo endoplasmático de las células del hígado de ratas), tras 20 minutos de estrés oxidativo inducido por el quelato de Fe(II)-ADP y ascorbato. El daño oxidativo se midió entonces por la formación de TBARS (productos de 30 la degradación oxidativa incluido el malonaldehído procedente de la peroxidación mediada por radicales libres de los ácidos grasos insaturados   24 ES 2 392 915 B1 de la membrana lipídica): cuanto menor sea la cantidad de TBARS formado, mayor efecto protector en la membrana. Los microsomas obtenidos de ratas deficientes en vitamina E (-VE) se emplearon para determinar el diferente efecto protector de los compuestos a testar, comparándolos con microsomas 5 obtenidos de ratas sometidas a una adecuada dieta en VE (+VE), y con la vitamina E, que es el principal antioxidante lipídico soluble en membranas biológicas (Duthie, G.G.; Gonzalez, B.M.; Morrice, P.C.; Arthur, J. R. Free Raci. Res. Commun. 1991, 15, 35-40), y finalmente microsomas -VE a los que se adicionó tocoferol en las mismas concentraciones que los 1 O compuestos a ensayar. Los resultados obtenidos en los ensayos de inhibición de oxidación lipídica en microsomas para el tiohidroxitirosol 10, comparados con el HT y el atocoferol, utilizando como referencias microsomas de ratas con dieta 15 deficiente en vitamina E (-VE), y ratas con dieta adecuada en vitamina E (+VE), aparecen representados en la Tabla 4. Tabla 4. Inhibición de la oxidación lipídica en células de microsomas con el tiohidroxitirosol10, HT y a-tocoferol. Compuesto Concentración % de inhibición a la oxidación (mM) lipídica en células de microsomas Control (-VE) O (+VE) 72,60 10a 0,250 85,94 1 o o' 1 00 84' 84 10 0,050 39,72 HTb 0,250 -35,18 HT 0,100 -16,66 HT 0,050 25,8 a-Tocoferol 0,250 91,6 a-Tocoferol 0,100 89,51 a-Tocoferol 0,050 81,27 Disolventea 19,07 Disolventeb 27,31 20 a1 O disuelto en EtOH/MeOH 1: 1. 6HT y a-tocoferol disueltos en EtOH.   25 ES 2 392 915 B1 EIMS HREIMS miz 346 ([Mt, 27%), 137 ([M-Brt, 23%). miz calculado para C8H979 Br0 2 ([M+t): 215.9786. Encontrado: 215.9793. 4-(2-Yodoetil)benceno-1 ,2-diol (4) HO~I HO,v A una disolución de hidroxitirosol (300 mg, 1.95 mmol) en THF seco (5 mi) y 5 atmósfera inerte, se añadió PPh 3 (510 mg, 1.95 mmol), imidazol (265 mg, 3.89 mmol), l2 (741 mg, 2.92 mmol) y tamiz molecular 4A y se calentó a reflujo durante 3 horas. A continuación, se filtró la mezcla de reacción, se evaporó el disolvente, el residuo resultante se disolvió en AcOEt (20 mi) y se añadió una disolución saturada de NaHC03 (5 mi) y una disolución saturada 1 o de Na2S203 (5 mi), agitándose durante unos minutos hasta desaparición del color amarillento. La fase orgánica se separó de la acuosa y esta última se extrajo con AcOEt (3 x 15 mi). El volumen total de fase orgánica se secó con MgS04 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :5~1 :3) y se obtuvo 15 un sólido incoloro que corresponde al derivado yodado 4. Rendimiento: 356 mg, 69%; RF 0.42 (hexano-AcOEt 2:1 ); p.f.: 110-112 °C. IR Ymax 3486, 3332, 3033, 2949, 1732, 1601, 1515, 1454, 1346, 1275 cm· 1 . 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 0D): o (ppm) 6.69 (d, 1H, J5,6 = 8.0 Hz, H-6), 20 6.64 (d, 1 H, J3,s = 2.0 Hz, H-3), 6.52 (dd, 1 H, H-5), 3.30 (t, 2H, J1·.2· = 7.7 Hz, CH2I), 2.97 (t, 2H, CH2Ar). 25 13 C-RMN (75.5 MHz, CD 3 0D): o (ppm) 146.2, 145.0 (C-1, C-2), 133.9 (C- 4), 120.7 (C-5), 116.4 (C-3, C-6), 41.0 (CH 2 Ar), 39.8 (CH 2 1). EIMS HREIMS miz 264 ([Mt, 32%). miz calculado para [Mt C8H9 10 2: 263.9647. Encontrado: 263.9648.   32 ES 2 392 915 B1 1 ,2-Diacetoxi-4-(2-cloroetil)benceno (5) AcO~CI AcO~ Una disolución de 2 (55 mg, 0.32 mmol) en Ac20-Py 1:1 (2.0 mi) se mantuvo 5 a 5 °C durante 24 h. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida, coevaporando con tolueno y EtOH. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :5), aislándose 4 en forma de sirupo incoloro. Rendimiento: 65 mg, 79%; RF 0.46 (hexano-AcOEt 2:1). 10 IR Vmax 3369, 3220, 2962, 2919, 2380, 2346, 1764, 1502, 1428, 1371, 1259, 1201, 1177, 1104, 1007 cm· 1 . (300 MHz, CDCb): 8 (ppm) 7.13 (d, 1H, Js.s= 8.2 Hz, H-6), 7.09 (dd, 1 H, J3,s = 2.1 Hz, H-5), 7.06 {d, 1 H, H-3), 3.69 (t, 2H, J1·,2· = 7.4 Hz, CH2CI), 3.05 (t, 2H, CH 2 Ar), 2.28, 2.27 (2s, 6H, 15 2CH3CO). 20 13 C-RMN (75.5 MHz, CDCI 3 ): 8 (ppm) 168.4, 168.3 (2CH3 CO), 142.1, 141.1 (C-1, C-2), 137.0 (C-4), 127.1 (C-5), 123.9 (C-3), 123.5 (C-6), 44.5 (CH2CI), 38.5 (CH2Ar), 20.7 (2CH3 CO). EIMS HREIMS miz 256 ([Mt, 5%). miz calculado para [Mt C12H1 3 CI04: 256.0502. Encontrado: 256.0504. 1 ,2-Diacetoxi-4-(2-bromoetil)benceno (6) AcO~Br AcO~ 25 A una disolución del4-(2-bromoetil)benceno-1 ,2-diol 2 (250 mg, 0.856 mmol) en piridina (2 mi) a O °C, se fue añadiendo gota a gota anhídrido acético (2 mi). Se agitó a O °C durante una hora, y se dejó en congelador toda la noche. Se concentró a sequedad a presión reducida. Se disolvió en agua   33 ES 2 392 915 B1 destilada (40 mi) y se extrajo con 3 x 40 mi de diclorometano. La fracción orgánica se secó sobre MgS0 4 y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20 __. AcOEthexano 1 :5), obteniéndose un aceite amarillento. 5 Rendimiento 237.1 mg, 92 %. RF: 0.42 AcOEt/Hex (1 :2). IR Vmax: 2925, 2848, 1766, 1591, 1507, 1427, 1368, 1256, 1203, 1175, 1107, 1010,901 cm- 1 . 1 H-RMN 13 C-RMN FABMS HRFABMS (300 M Hz, CDCb): 8 7.14 (d, J5,6 8.1 Hz, 1 H, H-5), 7.1 O (d, J3 ,5 1.7 Hz, 1 H, H-3), 7.06 (dd, J3,s 1.7 Hz, Js,s 8.1 Hz, 1 H, H-5), 3.54 (t, J1·.2· 7.6 Hz, 2H, CH2Br), 3.15 (t, J1',2-?.6 Hz, 2H, CH2Ar), 2.28 (2 s, 2 x 3H, OAc) ppm. (75.5 MHz, CDCb): 168.2 y 168.1 (2 C=O, OAc) 142.0 (C-2), 140.9 (C-1), 137.6 (C-4), 126.7 (C-5), 123.6 y 123.4 (C-3 y C-6), 38.6 (CH2Br), 32.0, (CH2Ar) 20.6 (2 CH 3, OAc) ppm. miz 301 ([M+Hr, 45%), 221 ([M-Brr, 20%). Cale. para C12H1/9Br04 ([M+Hr): 301.0075. Encontrado: 301.0078. 1 ,2-Diacetoxi-4-(2-yodoetil)benceno (7) AcO~I AcO~ Una disolución de 5 (300 mg, 1.14 mmol) en Ac2 0-Py 1:1 (5.0 mi) se 10 mantuvo a 5 °C durante 24 h. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida, coevaporando con tolueno y EtOH. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :4), aislándose 7 en forma de sirupo amarillento. 15 Rendimiento: 267 mg, 75%; RF 0.51 (hexano-AcOEt 2:1). IR Vmax 3369, 3229, 2962, 2938, 2350, 1759, 1589, 1502, 1429, 1366,1255,1192,1113,1012 cm- 1 . (300 MHz, CDCb): 8 (ppm) 7.13 (d, 1H, J5,6= 8.2 Hz, H-6), 7.07 (dd, 1 H, J3,s = 2.0 Hz, H-5), 7.03 (d, 1 H, H-3), 3.34 (m, 2H, J1·.2·   34 ES 2 392 915 B1 = 7.7 Hz, CH2I), 3.17 (m, 2H, CH2Ar), 2.28, 2.28 (2s, 6H, 2CH3CO). 13 C-RMN (75.5 MHz, CDCb): 8 (ppm) 168.3, 168.3 (2CH3CO), 142.1, 141.0 (C-1, C-2), 139.4 (C-4), 126.5 (C-5), 123.6 (C-6), 123.4 5 (C-3), 39.8 (CH2Ar), 20.7 (2CH3CO), 4.3 (CH2I). EIMS m/z 348 ([Mt, 9%). HREIMS m/z calculado para [Mt C12Hd04: 347.9859. Encontrado: 347.9865. 1 o 4-(2-Acetiltioetil)-1 ,2-diacetoxibenceno (8) AcO~SAc AcO~ A una disolución de 7 (1 equiv.) en butanona se añadió tioacetato potásico (1.4 equiv.) y se calentó a reflujo durante 2 h. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida, el residuo se disolvió en AcOEt y se lavó con 15 agua. La fase acuosa se extrajo con AcOEt y el conjunto de los extractos orgánicos se secó con MgS0 4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad. El crudo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :6), aislándose 6 en forma de sólido de color pardo rojizo. Rendimiento: 111 mg, 76%; RF 0.36 (hexano-AcOEt 2:1), p.f.: 39-41 °C. 20 IR Vmax 3374, 3316, 3239, 2977, 2919, 1774, 1682, 1502, 1424, 1366, 1264, 1192, 1133, 1104, 1012,896,623 cm·1 . 1 H-RMN (300 MHz, CDCb): 8 (ppm) 7.11-7.05 (m, 3H, H-3, H-5, H-6), 3.09 (m, 2H, CH 2 S), 2.85 (m, 2H, CH 2 Ar), 2.33 (s, 3H, CH 3 COS), 2.28, 2.27 (2s, 6H, 2CH3 CO). 25 13 C-RMN (75.5 MHz, CDCI3 ): 8 (ppm) 195.6 (SCOCH3 ), 168.4, 168.3 (2CH3CO), 142.0, 140.7 (C-1, C-2), 138.9 (C-4), 126.8 (C-5), 123.6 (C-6), 123.4 (C-3), 35.4 (CH2S), 30.7 (CH2Ar), 20.7 (2CH3CO). EIMS miz 296 ([Mt, 1%).   35 ES 2 392 915 B1 HREIMS miz calculado para [Mt C12Hd04: 296.0718. Encontrado: 296.0714. Etanotioato de S-2-(3,4-dihidroxifenil)etilo (9) HO~SAc HO~ 5 A una disolución de 8 (1 00 mg, 0.34 m mol) en MeOH (2.0 mi) se añadió HCI 2N (1.0 mi) y, en atmósfera de argón, se agitó a t.a. durante 12 h en la oscuridad. A continuación, se neutralizó con una disolución saturada de NaHC03 hasta pH 5 y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 10 1:5~1:3), aislándose 7 en forma de sirupo de color pardo rojizo. Rendimiento: 58 mg, 86%; RF 0.35 (hexano-AcOEt 2:1). IR Vmax 3335, 2924, 2850, 2375, 2346, 1715, 1652, 1604, 1517, 1444, 1366, 1279, 1250, 1192, 1114, 1051 cm· 1 . 1 H-RMN (300 MHz, CDCb): o (ppm) 6.79 (d, 1 H, J5 ·, 6· = 8.1 Hz, H-5'), 15 6.74 (d, 1H, J2·. 6 · = 1.9 Hz, H-2'), 6.62 (dd, 1H, H-6'), 5.70 (s.a., 2H, 20H), 3.06 (m, 2H, CH 2 S), 2.71 (m, 2H, CH 2 Ar), 2.34 (s, 3H, CH3CO). 13 C-RMN (75.5 MHz, CDCb): o (ppm) 197.3 (SCOCH3), 143.7, 142.4 (C- 3', C-4'), 133.0 (C-1'), 121.1 (C-6'), 123.6 (C-2'), 123.4 (C-5'), 20 35.0 (CH2S), 30.8 (CH2Ar), 30.8 (CH3CO). EIMS miz 212 ([Mt, 6%). HREIMS miz calculado para [Mt C1oH1203S: 212.0507. Encontrado: 212.0506. 25 4-(2-Sulfaniletil)benceno-1 ,2-diol (1 O) HO~SH HO~   36 ES 2 392 915 B1 A una disolución del compuesto 8 (1 00 mg, 0.34 m mol) en MeOH (2.0 mi) se añadió HCI 2N (1.0 mi) y, en atmósfera de argón y en la oscuridad, se agitó calentando a 40 °C durante 34 h. A continuación, se neutralizó con una disolución saturada de NaHC0 3 hasta pH 5 y se eliminó el disolvente a 5 presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :5), aislándose el compuesto 10 en forma de sólido amarillento. 10 15 20 Rendimiento: 57 mg, 100%; RF 0.30 (hexano-AcOEt 2:1), p.f.: 77-78 °C. IR Vm~ 3466, 3347, 3132, 3030, 2962, 2928, 2904, 2850, 2568, 2360, 1658, 1609, 1517, 1438, 1352, 1273, 1250, 1187, 1134, 11 04, 958 cm·1 . 1 H-RMN (300 MHz, (CD3 )2CO): o (ppm) 6.74 (d, 1 H, Js, 6 = 8.0 Hz, H-6), 6.71 (d, 1 H, J3,5 = 2.0 Hz, H-3), 6.55 (dd, 1 H, H-5), 3.06 (2s.a., 2H, 20H), 2.72 {m, 4H, CH2S, CH2Ar), 1.64 {t, 1 H, J2',SH = 7.2 Hz, SH). 13 C-RMN (75.5 MHz, (CD3)2CO): o (ppm) 145.8, 144.4 (C-1, C-2), 132.8 (C-4), 120.7 (C-5), 116.5 (C-6), 116.0 (C-3), 40.5 (CH2S), 26.7 (CH2Ar). EIMS miz 170 ([Mt, 37%). HREIMS miz calculado para [Mt CaH1o02S: 170.0402. Encontrado: 170.0396. Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11) ~OH HO~S,S~OH HO~ 25 A una suspensión de NaHS (170 mg, 3.03 mmol) en DMF y en atmósfera de argón, se añadió una disolución de 3 (200 mg, 0.76 mmol) en DMF y se calentó a 55 °C en la oscuridad durante 5 h. Posteriormente, se concentró a   37 ES 2 392 915 B1 sequedad y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CHzCiz-MeOH 20:1), aislándose 9 en forma de sirupo de color pardo-rojizo. Rendimiento: 128 mg, 90%; RF 0.37 (CH2 CI 2 -MeOH 10:1). IR Ymax 3335, 2924, 2850, 2375, 2346, 1715, 1653, 1605, 1517, 5 1444, 1366, 1279, 1250, 1192, 1114, 1051 cm- 1 . 10 15 1 H-RMN (300 MHz, (CD3 0D): ú (ppm) 6.68 (d, 2H, J5,6 = 8.0 Hz, H-6), 6.64 (d, 2H, J3 ,5 = 2.0 Hz, H-3), 6.51 (dd, 2H, H-5), 4.93 (s.a., 4H, 40H), 2.84 (m, 8H, 2CH2 S, 2CH2Ar). 13 C-RMN EIMS HREIMS (75.5 MHz, (CD3 0D): ú (ppm) 146.2, 144.7 (C-1, C-2), 133.2 (C-4), 120.9 (C-5), 116.7 (C-6), 116.4 (C-3), 41.6 (CHzS), 36.1 miz 338 ([Mt, 16%). miz calculado para [Mt C1sH1a04Sz: 338.0647. Encontrado: 338.0651. Diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (12) AcO~Se-Se~OAc 1~ ~ AcO ,¿; ,¿; OAc A una disolución de selenio negro (150 mg, 1.901 mmol) en etanol (11 mi), bajo atmósfera de argón, se fue añadiendo borohidruro sódico, en pequeñas 20 porciones, hasta que el color de la disolución cambió a blanco y además persistió. El exceso de basicidad se neutralizó con COz sólido, y a continuación se adicionó 4-(2-bromoetil)benceno-1 ,2-diacetoxi 6 (520.2 mg, 1.728mmol) disuelto en tetrahidrofurano (11 mi) y se agitó en oscuridad a temperatura ambiente bajo atmósfera de argón durante 2.5 horas. Se 25 concentró a sequedad. Se disolvió en agua destilada (75 mi) y diclorometano (75 mi). Se separó la capa orgánica y la acuosa se extrajo con 2x75 mi de diclorometano. La fracción orgánica se lavó con 2x75 mi de cloruro sódico saturado, se secó sobre MgS0 4 y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20~Ac0Et- 30 hexano 1 :3), obteniéndose un sólido amarillo.   38 ES 2 392 915 B1 5 Rendimiento 265 mg, 51 %; RF: 0.22 AcOEt-Hex (1 :2); p.f.: 98-100 °C. IR 1H-RMN 13C-RMN FABMS HRFABMS Ymax: 1768, 2914, 2851, 1502, 1427, 1368, 1258, 1192, 1124, 10107, 894, 825,669 cm- 1. (300 MHz, CDCb): ó 7.11 (d, Js,6 8.1 Hz, 2H, H-5), 7.09 (d, J2,6 1.6 Hz, 2H, H-2), 7.05 (dd, J5,6 8.1 Hz, J2, 6 1.7 Hz, 2H, H-6), 3.12 (m, 4H, CH2Se), 3.03 (t, 4H, CH2Ar), 2.28 (2 s, 2x3H, OAc) ppm. (75.5 MHz, CDCb): 168.3 y 168.2 (2 C=O, OAc) 142.0 (C-3), 140.5 (C-4), 139.6 (C-1), 126.6 (C-6), 123.3 (C-2 y C-5), 36.9 (CH2Se), 29.9, (CH2Ar), 20.6 (4 CH 3, OAc) ppm. miz 521 ([M- Ht, 12%), 545 ([M+Nat, 5%). Cale. para C24H26 0280SeNa ([M+Nat): 545.0688 Encontrado: 545.0691. Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13) HO~Se·Se~OH 1~ ~ HO ó ó OH Procedimiento A: A una disolución de diselenuro de bis (3,4-diacetoxifenetilo) 12 (150 mg, 0.25 mmol) en diclorometano-metanol 1:1 (7 mi) se añadió una cantidad catalítica de K2C03, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente, en 10 oscuridad y en atmósfera de argón durante 1h. Se neutralizó el medio de reacción con ácido acético diluido hasta pH 6 y se concentró a sequedad. Rendimiento 55 mg, 51 %. Procedimiento B: A una disolución enfriada a -78 °C de diselenuro de bis{3,4- 15 dimetoxifenetilo) 16 (250 mg, 0.512 mmol), en diclorometano seco (8.5 mi), en atmósfera de argón y con tamiz molecular de 4 A, se añadió tribromuro de boro (2.046 mmol, 193 IJL) y la mezcla se agitó en oscuridad a -78 oc durante 30 minutos, y una hora a temperatura ambiente. Se adiciónó entonces 1 mi de agua y se agitó 15 minutos más. Se concentró a sequedad.   39 ES 2 392 915 B1 El residuo obtenido se disolvió en metano! y se filtró sobre celita, evaporando posteriormente el disolvente en el rotavapor. Rendimiento 122 mg, 55%. El residuo obtenido por cualquiera de los dos métodos se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2----+CH2CI2-MeOH 25:1), 5 obteniéndose un sólido amarillento. RF 0.39. CH2Cb-MeOH (10:1). p.f.: 104- 108 °C. 10 IR 1H-RMN 13C-RMN CIMS HRCIMS Ymax: 1281, 3451, 3249, 2918, 1605, 1524, 1439, 1374, 1253, 1179, 1119,927,864,812,786,656 cm- 1. (300 MHz, MeOH-d4): 8 6.68 (d, Js,6 8.0 Hz, 2H, H-6), 6.64 (d, J3,s 2.0 Hz, 2H, H-3), 6.51 (dd, J3,s 2.0 Hz, Js,6 8.0 Hz, 2H, H-5), 3.09 (m, 4H, CH2Se), 2.87 (m, 4H, CH2 Ar), ppm. (75.5 MHz, MeOH-d4 ): 146.3 (C-2), 144.8 (C-1), 134.0 (C-4), 120.6 (C-5), 111.6 y 111.4 (C-6, C-3), 38.0 (CH2Se), 32.3, (CH2Ar) ppm. miz 435 ([M+ Ht, 2%, 217 ([M/2t, 30%). Cale. para C8H902 80Se ([M/2t): 216.9776. Encontrado: 216.9768. Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15) MeO~Se~OMe MeO~ ~OMe A una disolución de selenio negro (150 mg, 1 ,90 mmol), en etanol (12 mi) se añadió borohidruro sódico poco a poco hasta que persistió la tonalidad incolora. Se adicionó bromuro de 3,4-dimetoxifenetilo 14 (1 ,726 mmol, 436,4 mg) y la reacción se agitó en oscuridad a temperatura ambiente en 15 atmósfera de argón durante 3 horas. Se concentró a sequedad, se disolvió en agua (75 mi) y diclorometano (75 mi). Se separó la capa orgánica, y la acuosa se extrajo con 2x75 mi de CH2 CI 2. La fracción orgánica se lavó con 75 mi de cloruro sódico saturado, se secó con sulfato magnésico y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en 20 columna (AcOEt-hexano 1 :20 7 AcOEt-hexano 1 :3), obteniéndose un sólido amarillento.   40 ES 2 392 915 B1 5 Rendimiento339 mg, 98 %. RF 0.22 AcOEt-Hex (1 :3). p.f.: 69-72 °C. IR 1H-RMN 13C-RMN EIMS HREIMS Ymax: 1024, 2926, 2838, 1587, 1510, 1441, 1240, 1138, 1024, 857, 807, 765 cm- 1. (300 MHz, CDCb): 8 6.80 (d, J5,6 8.1 Hz, 2H, H-5), 6.73 (m, 4H, H-2 y H-6), 3.87 y 3.85 (2 s, 4x3H, OMe), 2.90 (m, 4H, CH2Se), 2.78 (m, 4H, CH2Ar), ppm. (75.5 MHz, CDCb): 148.9 (C-3), 147.6 (C-4), 133.9 (C-1), 120.2 (C- 6), 111.7 y 111.3 (C-5 y C-2), 55.9 (OMe), 36.8 (CH2Se), 25.4, (CH2Ar) ppm. miz 409 ([M- Ht, 10%), 433 ([M+Nat, 30%). Cale. para C2oH2 604Se ([M+Nat): 433.0888. Encontrado: 433.0894. Diselenuro de bis(3,4-dimetoxifenetilo) (16) MeO~Se·se~OMe ,~ V MeO ó ó OMe A una suspensión enfriada a O oc de selenio negro (300 mg, 3.800 mmol) y Na OH (8.360 m mol, 334.4 mg) en tetrahidrofurano-agua 100:1 (13.Q mi), bajo atmósfera de argón, se fue añadiendo borohidruro sódico (8.360 mmol, 316.2 mg) en pequeñas porciones. Finalizada la adición se agitó a O oc 10 durante 30 minutos, y otros 30 minutos a temperatura ambiente. Se agregó selenio negro (3.800 mmol, 300 mg), y se continuó la agitación en oscuridad durante 3 horas. Se añadió el bromuro de 3,4-dimetoxifenetilo 14 (1.902 mmol, 480.1 mg) disuelto en tetrahidrofurano (9 mi) y se agitó a temperatura ambiente en oscuridad y atmósfera inerte 2 horas más. Se concentró a 15 sequedad, se disolvió en agua (75 mi) y diclorometano (75 mi). Se separó la capa orgánica, y la acuosa se extrajo con 2x75 mi de CH2 CI2. La fracción orgánica se lavó con 75 mi de cloruro sódico saturado, se secó con sulfato magnésico y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20-AcOEt-hexano 1 :3), 20 obteniéndose un sólido amarillento.   41 ES 2 392 915 B1 5 10 durante una hora. Se concentró a sequedad, y el bruto de reacción se purificó por cromatografía en columna. 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31) H H 1 1 HO~NI(N~ 1 .ó Se V HO Se obtuvo a partir de fenilisoselenocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH 2 CI2~CH 2 Cb-MeOH 40:1), obteniéndose 31 como un sólido amarillento. Rendimiento 493 mg, 93%. RF: 0.32 CH2 Cb-MeOH (20:1). p.f.: 106-108 °C. IR 13C-RMN FABMS HRFABMS (KBr): Ymax: 1549,3215,2362, 1597, 1510, 1447, 1348, 1281, 1187, 1113,810 cm- 1. (300 MHz, MeOH-d4): 8 7.35 (m, 2H, H-3'y H-5'), 7.23 (m, 1 H, H-4'), 7.08 (m, 2H, 7.6 Hz H-2'y H-6'), 6.68 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.53 (d, Js,s 7.8 Hz, 1 H, H-6), 3.81 (t, JcH2,CH2 7.2 Hz, 2H, CH2NH), 2.78 (t, JcH2,CH2 7.2 Hz, 2H, CH2Ar), ppm. (75.5 MHz, MeOH-d4): 178.8 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4 y C- 1'), 131.6 (C-1), 130.8 (C-3' y C-5'), 127.1 (C-4'), 126.1 (C-2' y C-6'), 121.1 (C-6), 117.0 y 116.5 (C-2 y C-5), 49.9 (CH2NH), 35.2 (CH2Ar) ppm. miz 337 ([M+Ht, 22%), 359 ([M+Nat, 25%). Cale. para C15H16 N20l 0SeNa ([M+Nat): 359.0285. Encontrado: 359.0275. 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32) H H HO~NI(N~ ~ Se 1 .ó HO e   48 ES 2 392 915 B1 Se obtuvo a partir de p-tolilisoselenocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CHzCiz~CHzCiz-MeOH 30:1 ), obteniéndose 32 como un sólido amarillento. Rendimiento 530 mg, 96 %. RF: 0.28 CH 2 CI 2 -MeOH (20:1). p.f.: 142-148 °C. IR (KB~: Ym~: 1509, 3446, 3307, 2950, 1599, 1510, 1460, 1281, 1184, 1106, 1021, 810 cm- 1 . 1H-RMN 13C-RMN FABMS HRFABMS (300 MHz, MeOH-d4 ): 8 7.15 (m, 2H, H-3'y H-5'), 6.94 (m, H-2'y H- 6'), 6.67 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.51 (d, Js,s 7.9 Hz, 1 H, H-6), 3.79 (t, JcH2,CH2 7.0 Hz, 2H, CHzNH), 2.76 (t, JcH2,CH2 7.0 Hz, 2H, CHzAr), 2.31 (s, 3H, CH3) ppm. (75.5 MHz, MeOH-d4): 178.5 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4), 138.1 (C-1'), 135.6 (C-3' y C-5'), 131.6 (C-1 y C-4'), 126.2 (C-2' y C- 6'), 121.5 (C-6), 117.0 y 116.5 (C-2 y C-5), 56.0 (Me), 49.9 (CH2NH), 35.2 (CHzAr) ppm. miz 351 ([M+Ht, 43%), 373 ([M+Nat, 39%). Cale. para C1sH1aNzOz 80SeNa ([M+Nat): 373.0421. Encontrado: 359.0431 5 1-{3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33) H H 1 1 HO~NI(N~ HO~ Se ~OMe Se obtuvo a partir de p-metoxifenilisoselenocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH 2 CI 2 ~CH 2 CI 2 -MeOH 20:1 ), obteniéndose 33 como un sólido amarillento. 10 Rendimiento 561 mg, 97%. RF: 0.42 CH 2 Ciz-MeOH (10:1). p.f.: 144-146 °C. IR 1 H-RMN (KBr): Ymax: 1508, 3309, 3061, 2843, 1590, 1547, 1466, 1342, 1275, 1238, 1170, 1104, 1024, 828 cm- 1 (300 MHz, MeOH-d4): 8 6.98 (m, 2H, H-3'y H-5'), 6.88 (m, H-2'y H- 6'), 6.67 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.50 (d, Js,s 7.9 Hz, 1 H, H-6), 3.77 (m,   49 ES 2 392 915 B1 13 C-RMN FABMS HRFABMS 5H, CH2NH y OMe), 2.75 (t, JcH2,CH2 7.1 Hz, 2H, CH2Ar) ppm. (75.5 MHz, MeOH-d4): 178.7 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4), 160.1 (C-4'), 131.6 (C-1), 130.7 (C-1'), 128.6 (C-2' y C-6'), 121.1 (C- 6), 117.0 y 116.5 (C-2 y C-5), 116.0 (C-3' y C-5'), 56.0 (OMe), 49.9 (CH2NH), 35.3 (CH2Ar) ppm. m/z 367 ([M+Ht, 20%), 389 ([M+Nat, 39%) Cale. para C1 6 H1aN20l 0SeNa ([M+Nat): 389.0394. Encontrado: 389.0380   50 ES 2 392 915 B1 5 1.- Uso de un compuesto de fórmula general (1): donde: R1 y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno (H), alquilo (C1-C4) o acetilo (-COCH3). R3 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo (C1-C4 ), acetilo, 10 -C(=Z)-NH-R7, el grupo de fórmula (11) o el grupo de fórmula (111): 15 \-v (11) (111) X se selecciona de entre S, Se, NH o X'-R4; donde X' es S o Se y R4 es el grupo de fórmula (111); R5 y R6 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, alquilo (C1-C4) o acetilo; 20 Y es S o Se; Z es S o Se; y R7 se selecciona de entre alquilo (C 1 -C1a), fenilo, sustituido o sin sustituir o bencilo, sustituido o sin sustituir, 25 para la elaboración de una composición antioxidante.   51 ES 2 392 915 B1 REIVINDICACIONES 5 2.- Uso según la reivindicación anterior, donde R1 y/o R2 son hidrógeno, metilo o acetilo. 3.- Uso según la reivindicación anterior, donde R1 y R2 son hidrógeno. 4.- Uso del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde X es S o Se. 5.- Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R3 es 1 o hidrógeno o acetilo. 6.-Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R3 es el grupo de fórmula (11). 15 7.-Uso según la reivindicación anterior, donde Y es S o Se y los radicales R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo. 20 25 8.-Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R3 es el grupo de fórmula (111). 9.-Uso según la reivindicación anterior, donde R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo. 1 0.-Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde X es X'-R4. 11.-Uso según la reivindicación anterior, donde X' es Se y R3 es el grupo de fórmula (111). 12.- Uso según la reivindicación 11, donde R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o 30 acetilo.   52 ES 2 392 915 B1 5 10 13.-Uso según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, donde la sal formada es un halogenuro. 14.- Uso según la reivindicación anterior, donde la sal es de bromuro. 15.- Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde X es NH. 16.- Uso según la reivindicación anterior, donde R3 es el grupo -C(=Z)-NH- R?. 17.-Uso según la reivindicación anterior, donde Z es S. 18.- Uso según cualquiera de las reivindicaciones 16 o 17, donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por al menos un grupo 15 alquilo (C1-C4) o bencilo. 19.- Uso según la reivindicación anterior, donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por un metilo o bencilo. 20 20.-Uso según la reivindicación 16, donde Z es Se. 21.-Uso según la reivindicación anterior, donde R7 es un fenilo, sustituido o sin sustituir. 25 22.-Uso según la reivindicación anterior, donde el grupo fenilo no está sustituido o está sustituido por un grupo alquilo (C1-C 4 ) o un grupo alcoxilo. 23.-Uso según la reivindicación 1, donde el compuesto se selecciona de la lista que comprende: 30 4-(2-Acetiltioetil)-1 ,2-diacetoxibenceno (8) 4-(2-Sulfaniletil)benceno-1 ,2-diol (1 O) Disulfuro de bis{3,4-dihidroxifenetilo) (11)   53 ES 2 392 915 B1 Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13) Bromuro de tris(3,4-dihidroxifenetil)selenonio (17) 1-Butil-3-(3,4-dihidroxifenetil) ti o urea (24) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) tiourea (25) 5 1-Bencil-3-(3,4-dihidroxifenetil)tiourea (26) 1-Fenil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (27) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33) 10 Diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (12) Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15) Diselenuro de bis(3,4-dimetoxifenetilo) (16) o Bromuro de tris (3,4-diacetoxifenetil)selenonio (18). 15 24.-Uso del compuesto de fórmula general (1) según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para la elaboración de un medicamento. 25.-Uso del compuesto de fórmula general (1), según cualquiera de las reivindicaciones anteriores para la elaboración de un medicamento para el 20 tratamiento y/o la prevención de enfermedades inflamatorias, tumorales, neurodegenerativas, trombosis, cardiovasculares o infecciosas. 26.- Compuesto de fórmula general (1): 25   54 ES 2 392 915 B1 donde: R1 y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno (H), alquilo (C1-C 4) o acetilo (-COCH3). R3 se selecciona de entre -C(=Z)-NH-R7, el grupo de fórmula (11) o 5 el grupo de fórmula (111): 10 --Y (11) (111) X se selecciona de entre S, Se, NH o X'-R4; donde X' es S o Se y R4 es el grupo de fórmula (111); R5 y R6 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, alquilo (C 1 -C4) o acetilo; 15 Y es S o Se; Z es S o Se; y R7 se selecciona de entre alquilo (C 1 -C 18 ), fenilo, sustituido o sin sustituir o bencilo, sustituido o sin sustituir. 20 27.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde R1 y/o R2 son hidrógeno, metilo o acetilo. 25 28.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde R1 y R2 son hidrógeno. 29.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, donde X es S o Se.   55 ES 2 392 915 B1 30.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 29, donde R3 es el grupo de fórmula (11). 31.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde Y es S o Se y los 5 radicales R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo. 32.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 29, donde R3 es el grupo de fórmula (111). 1 o 33.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo. 15 34.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, donde X es X'-R4. 35.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde X' es Se y R3 es el grupo de fórmula (111). 36.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde R5 y/o R6 son 20 hidrógeno, metilo o acetilo. 37.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 34 a 36, donde la sal formada es un halogenuro. 25 38.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde la sal es de bromuro. 39.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, donde X es NH. 30 40.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde R3 es el grupo - C(=Z)-NH-R7.   56 ES 2 392 915 B1 41.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde Z es S. 42.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 40 o 41, donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por al menos un grupo 5 alquilo (C1-C4) o bencilo. 43.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por un metilo o bencilo. 1 O 44.- Compuesto según la reivindicación 40, donde Z es Se. 45.-Compuesto según la reivindicación anterior, donde R7 es un fenilo, sustituido o sin sustituir. 15 46.- Compuesto según la reivindicación anterior, donde el grupo fenilo no está sustituido o está sustituido por un grupo alquilo (C1-C4) o un grupo alcoxilo. 47.- Compuesto según la reivindicación 26, donde el compuesto se 20 selecciona de la lista que comprende: Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11) Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13) Bromuro de tris(3,4-dihidroxifenetil)selenonio (17) 1-Butil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (24) 25 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) tiourea (25) 1-Bencil-3-(3,4-dihidroxifenetil)tiourea (26) 1-Fenil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (27) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31) 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32) 30 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33) Diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (12) Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15)   57 ES 2 392 915 B1 OPINIÓN ESCRITA Nº de solicitud: 201100639 1. Documentos considerados.- A continuación se relacionan los documentos pertenecientes al estado de la técnica tomados en consideración para la realización de esta opinión. Documento Número Publicación o Identificación Fecha Publicación D01 US 2008/0064687 A1 (SUH, Y.G. et al.) 13.03.2008 D02 ALI, A.R. et al. Tetrahedron Letters, 2010, Vol. 51, pp. 1019-1021 11.12.2009 D03 TAKEUCHI, T. e t a l. Organic & B iomolecular C hemistry, 2006, Vol. 4, pp. 565-568 05.01.2006 D04 PATEL, R.B. et al. Indian Journal of Chemistry, Julio 2006, Vol. 45B, pp. 1716-1721 00.07.2006 D05 WO 2007/107352 A1 27.09.2007 D06 WO 2002/033596 A1 25.04.2002 D07 AMBITER (Chemical Library). RN: 473878-33-0. 19.02.2002 D08 AMBITER (Chemical Library). RN: 481666-01-7. 27.01.2003 D09 AMBITER (Chemical Library). RN: 475371-41-3. 04.02.2003 D10 AMBITER (Chemical Library). RN: 474253-01-7. 27.01.2003 2. Declaración motivada según los artículos 29.6 y 29.7 del Reglamento de ejecución de la Ley 11/1986, de 20 de marzo, de Patentes sobre la novedad y la actividad inventiva; citas y explicaciones en apoyo de esta declaración El objeto de la invención es un compuesto de fórmula general (I), el uso de dicho compuesto para la elaboración de una composición antioxidante y una composición que comprende al menos uno de estos compuestos de fórmula general (I). El documento D01 divulga una serie de compuestos derivados de tiourea de fórmula general (I) que, cuando R1 es un anillo bencénico, R4 R5 son hidroxilo o alcoxilo, X es S, Y es NR3 y R3 es alquilo o fenilalquilo, solapa con la fórmula general (I) de la i nvención ( ver párrafos [0008]-[0021]). Estos compuestos tienen diversas propiedades farmacológicas, por l o qu e so n útiles para el tratamiento diversas enfermedades, como son procesos antiinflamatorios, ulcerosos o neurodegenerativos, por lo que el documento divulga también las composiciones farmacéuticas que los comprenden (ver párrafos [0002] y [0007]). En el documento se recogen compuestos concretos que se incluyen dentro de la fórmula general (I) de la invención, como, por ejemplo, el compuesto 25-14 (siendo en dicha f órmula (I) de l a invención X=NH, R1=H, R2=Me, R3 es C(=S)NHR7 y R7=(CH2)2Ph) (ver página 76, tabla). Por lo tanto, se considera que el objeto de las reivindicaciones 24-28, 39-43, 48-53 no es nuevo según lo divulgado en el documento D01. El documento D02 divulga una tiourea de fórmula 15 (1-(3,4-dimetoxifenil)-3-feniltiourea), que se incluye dentro de la fórmula general (I) de la invención, cuando en esta última X es NH, R1 y R2 son Me, R3 es C(=S)NHR7 y R7 es fenilo (ver página 1020, tabla 1, compuesto 15). En co nsecuencia, se co nsidera qu e el o bjeto de l as reivindicaciones 26-28, 39-43 no pr esenta n ovedad a l a l uz de l o divulgado en el documento D02. El documento D03 divulga el 2-(3,4-dihidroxifenil)etiltioacetato (2) y el 1,2-dihidroxi-4-(2-mercaptoetil)benceno (3) (ver página 567, par te e xperimental). E stos compuestos se i ncluyen dent ro de l a f órmula g eneral ( I ) de l a i nvención, si endo X =S, R1=R2=H, R 3=acetilo en 2; X e s S, R1=R2=R3=H en 3. Así , l os co mpuestos 2 y 3 recogidos en est e docu mento so n exactamente los compuestos 8 y 10 de la solicitud. Por t anto, se considera q ue el o bjeto de l as reivindicaciones 26-29 no presenta nov edad a l a luz de lo divulgado e n el documento D03. El documento D04 divulga la N,N’-bis(3,4dimetoxifeniletil)tiourea (1), que se incluye dentro de la fórmula general (I) de la invención, siendo X=NH, R1=R2=R5=R6=CH3, R3=C(=S)NHR7, R7=(CH2)2-(3,4-dimetoxi)fenilo (ver página 1717, esquema 1). Por tanto, se considera que el objeto de las reivindicaciones 26, 27, 39-41 no es nuevo según lo divulgado en el documento D04. Informe del Estado de la Técnica Página 5/6 OPINIÓN ESCRITA Nº de solicitud: 201100639 El documento D05 divulga una serie de compuestos que inhiben la proliferación celular (página 1, líneas 5-8) y que presentan una fórmula general (VI), que solapa con la fórmula (I) de la invención, cuando X es NH, R3 es C(=S)NHR7 y R7 es arilalquilo) (ver página 57). El documento divulga también una serie de compuestos, como son los compuestos (XII) (página 64, tabla 1), (XVIII) ( página 65) , ( XXXVI) ( página 6 6), ( XXXIX) y ( XLVI) ( página 67) ; y l as composiciones farmacéuticas que l os comprenden (ver reivindicación 22). Por lo tanto, se considera que el objeto de las reivindicaciones 24-28, 39-43, 48-53 no presenta novedad según lo divulgado en el documento D05. El documento D06 divulga un método computacional para el análisis subestructural útil para el descubrimiento de fármacos. Entre los compuestos divulgados se encuentra el N-[2-(3,4-dihidroxifenil)etil]-N’-(4-metilfenil)tiourea (compuesto 25 de la invención; ver página 1, líneas 5-11; página 85), que aparece también divulgado como parte de una librería química (ver documento D07 en el Informe sobre el Estado de la Técnica). El documento D08 divulga el compuesto N-butil-N’-[2-(3,4-dihidroxifenil)etiltiourea (compuesto 24 de la invención) como parte de una librería química. 26-28, 39-43, 47 El doc umento D 09 divulga el co mpuesto N-[2-(3,4-dihidroxifenil)etil]-N’-(fenilmetil)tiourea ( compuesto 26 de la i nvención) como parte de una librería química. 26-28, 39-43, 47 El documento D10 divulga el compuesto N-[2-(3,4-dihidroxifenil)etil]-N’-feniltiourea (compuesto 27 de la invención) como parte de una librería química. Por tanto, se considera que el objeto de las reivindicaciones 26-28, 39-43, 47 no es nuevo según lo divulgado en cada uno de los documentos D06-D10 tomados por separado. Sin embargo, no se ha encontrado en el estado de la técnica divulgación ni sugerencia alguna que pudiera dirigir al experto en l a materia hacia el objeto de l as reivindicaciones 1-23, que se r efieren al uso d el compuesto de l a i nvención para l a elaboración de una composición antioxidante; 30-38, relativas a compuestos de fórmula (I) en los que R3 es el grupo (II) ó (III); y 44-46, que se refieren a los compuestos de fórmula (I) en los que Z es Se. En consecuencia, se considera que el objeto de las reivindicaciones 1-23, 30-38 y 44-46 reúne los requisitos de novedad y actividad inventiva recogidos en los Artículos 6.1 y 8.1 de la Ley de Patentes. Informe del Estado de la Técnica Página 6/6