Estudio comparativo de diversos tipos de esencias de espliego españolas

DEPARTAMENTO DE FARMACOGNOSIA y FARMACODINAMIA P o . J. CABO TORRES ESTUDIO COMPARATIVO DE DIVERSOS TIPOS DE ESENCIAS DE ESPLIEGO ESPAÑOLAS Resumen de la esis Doc o al ealizada po M. MARTIN MESONERO Y di igida po el P o . D . J. CABO TORRES. INTRODUCCION El p esen e abajo iene po obje o el es udio anal1 lco de esencias de espliego españolas de p ocedencias dis in as. Siendo e iden e que las ca ac e ís icas c1imá icas yedá icas de las di e sas egiones de nues o país a ían mucho, es lógico pensa , que pueden a ia ambién con ellas los endimien os y calidades de los acei es esencia les conseguidos en las mismas. Debido a es a ci cuns ancia, juzgamos in e esan e sabe cuales pueden se es as a iaciones, ya que en la ac ualidad a la indus ia a us o mado a le in e esa, an o como la calidad de los ¡p oduc os que ecibe y manipula la uni o midad de los mismos. Tan o desde el pun o de is a cuali a i o como cuan i a i o, los acei es esenciales .plan ean un doble p oblema: P ime o, el de ,endimien o en de e  minados componen es; segundo, el de su ipi icación. Den o de las plan as p oduc o as de acei es esenciales, nos ha pa ecido opo uno el es udio del ,espliego po que, apa e de ocu¡pa un luga des aca do den o de la p oducción nacional de esencias, G anada es una zona de g an ex ensión, donde se encuen an encla adas calde as de des ilación en g an núme o. Po ello, ealizamos un es udio de las di e sas clases de esencia de es pliego españolas, con is as a es ablece la di e enciación en e unas y o as, según su o igen geog á ico, e in luencia de es as ca ac e ís icas en las calidades. 428 M. MARTIN MESONERO PLAN DE TRABAJO Mwes as en es udio: Hemos dispues o d"e esencia de espliego p oceden e de Za agoza, So ia, Sigüenza (Guadalaja a) , Sal ocañe e (Cuenca), Pineda (Cuenca), Quesada (Jaén), So illo (G anada) y Cogollos (G anada). Tam_ bién de los llamados "Conjun os" de expo ación, así como de espliegos a i iciales u,pos Bélgica, F ancia y U. S. A. A). PARTE TEORICA Se ha ealizado una amplia e isión bibliog á ica en lo e e en e a la monog a ía a macognós ica del espUego y su esencia, así como de las écnicas empleadas a lo la go del abajo. B). PARTE EXPERIMENTAL l.-De e minación de ca ac e es y cons an es en las di e sas mues as de esencia: Físicos: Densidad, índice de e acción, pode o a o io, so lubilidad en alcohol. Químicos: Es e es, alcoholes. Il.-C oma og a ía en papel. IlI.-C oma og a ía en capa ina. lV.-C oma og a ía en ase gaseosa. V.-Espec oscopia in a oja. MATERIAL Y METODOS I.-DETERMINACION EN LAS DIVERSAS MUESTRAS DE LAS CONS TANTES FISICAS y QUIMICAS USUALES. Comenzamos po es ablece los índices más clásicos en la de inición y ilpi icación de los acei es esenciales con un doble in: De un lado po que, las mues as es udiadas son de ga an izada pu eza y de p ocedencia geog á ica di e sa, den o de España, lo que nos pe mi i á con ibui , de o ma e ec, i a, al es ablecimien o de las a iaciones admi sibles. � 1 De o o lado, in en amos comp oba si las pequeñas a iaciones en ales 1ndices, ienen epe cusión en los esul ados c oma og á icos; ello pe mi i á además juzga del in e és de dichas a iaciones. * * * ARS PHARMACEUTICA 429 l. 1.-Densidad. 'Se ha de e minado po el mé odo del picnóme o a la empe a u a del labo a o io. Hemos hecho la co ección adecuada sumando o es ando al alo ob enido 0,00082 po g ado, según que la empe a u a a la que se e ec uó la de e minación uese supe io o in e io , espec i a men e, a 15°. El empl'eo de es e ac o de co ección es el señalado po Bosa y nos ha pa ecido el más aconsejable den o de la biJjliog a la oon sul ada. I. 2.-Pode o a o io. Se ha u ilizado un pola íme o ipo Lau en (Winkel"'¡Zeis,s) , I. 3.-Indice de e acción. Pa a nu·es as ex.,pe ien::ias hemos u ilizado un e ac óme o ipo Abbé (Ca l Zeiss), que iene una escala de 1,3 a 1,7 (su i cien emen e amplia pa a el análisis de los acei es esenciales). T abajamos exclusi amen e a empe a u a cons an1:le de 20°, po lo cual el e ac óme o es á conec ado a un e mos a o muy sensible. I. 4.-Solubilidad en alcohol. Pa, a es a" de .� minación se ha seguido la écnica desc i a según los "Me hodes D'analyse des Huilles Essen iell:es du Syndica des Fab ican s e impo aeu s D'Huilles Essen ielles". Se ha em pleado alcohol de 65° exac amen e i ulado y ope ado a la empe a u a de 15°. l. '5.-Es el"es. Los mé odos u ilizados pa a la de e minación de 'Es a Gons an e química en esencias, son la saponi icación en ío y en calien e. La p ime a se emplea en la de e minación de o mia os po eJemplo, pe o gene almen e no es un buen mé odo analí ico, ya que no odos los és e es con enidos se salponi ican en es as condiciones. Debido a es o hemos em pleado la saponi icación en calien e. I. 6.-Alcoholes. En 'e Jos mé odos de de e mina·ción de aoJ.cohol·es '2n esencias hemos seleccionado el de la ace ilación, dada la clase de alcoholes p esumibles en es a esencia. 'II.-CROMATOGRAFIA EN PAPEL Di icul ada po un a amien o p e io: in e sión de la ase. El papel hid o ugado conseguido iene un alo empí ico. De o a pa e, el iempo empleado en ·el desa ollo de es os c oma og amas es muy g ande y de pendien e del g ado Upó ilo del papel, po lo que la expe iencia adolece de cla os de ec ds. lII.-CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA Pa a ·es a écnica hemos seguido el mé odo más gene alizado, p econi zado po S ahl: .placas de 20 x 20 cm. Sin emba go, en un es udio más sis e- 430 M. MARTIN MESONERO má ico de 'ensayo de ases mó iles es mejo un sopo e más educido, que p esen a ía algunas en ajas ales como: meno capa de adso ben e (eco nomía), apidez en el desa ollo del c oma og ama ... Se lle ó a cabo sob e po a-Obje os de los co ien emen e empleados en mic osco.pia, disponiéndolos cada cua o en cáma as de ácil cons ucción ( asos apados con cajas pe i cubie as en el in e io con cin a adhe ·en e " esamol" que pe mi e hace un cie e pe ec o y e i a la e apo ación). Es es a una écnica sencilla y o iginal de nues o labo a o io. Los ensayos p esun i os han sido con i mados al aslada la c oma og a ía a placas. Se economiza iempo y a la ez se ob ienen copiosos da os. IIl. l.-Adso ben es u ilizados: Silicagel G Me ck Silicagel GF-254 Me ck Silicagel H Me ck Silicagel H-254+366 Me ck Silicagel F-5 Camag IlI. 2.-Fc/;SIes mó iles es udiadas: Unas eoes hemos a �ado el disoloonbe y o as I�as p!/1opo ciones e¿a i 'as en las mezolas. Olo o o mo Dic,lo ome ano Te a.cJo ome ano E e isop opílico E e -C1o o o mo (15/85) E e -Clo o o mo (25/75) Benceno-Clo o o mo (50/50) Be uceno-ClOll0, o mo (25/75) Sul u o de ca bono-Alcohol (90/10) Hexano-hep ano-E e (85/15) Hexano-hep ano-E e (75/25) Benc'eno-E e (85/15) Benceno-E e (75/25) Benceno-E e isop op1lico (5/1) Diclo ome- ano-E e (90/10) Hexano-Ace a o de e ilo (85/15) Clo o o mo-E e (90/10) Clo o o mo-E e (100/10) Benceno-Alcohol (100/2) ARS PHARMACEUTICA 431 IIl. 3.-Re elado es: Luz ul a iole a (ha p ecedido al empleo de cualquie o o e elooo ) . Vainillina sul ú ica ( ainillina al 3% en alcohol más 4 mI. de SO.H2 conc./100 mI. de sol). Anisaldehido sul ú ico (1 mI. de a 1isaldehido en 97 mI. de acé- ico más 2 mI. de S04H2 conc.). Sul ú ko con anisaldehido (al 3 %) . 2-4 D. N. F. H. (al 0,4% en cm 2N). Acido os omolíbdico (al 5% en e anol). Pen aclo u o de an imonio (disuel o en C14C 1/4 ). Bwmod'luo esceina (sódica, sol. acuosa al 0,04 %) . Vapo es de iodo. Vainillina en ace ona (al 3 %) Acido sul ú ico concen ado. • IV.-CROMATOGRAFIA EN FASE GASEOSA Hemos abajado con un c oma óg a o Pe kin-Elme modo F- ll con co lumna de silicona Rubbe E. 301 al 5% sob e ch omoso b W, y ca bowax 20 MallO % sob e ch omoso b G, en las siguien es condiciones expe imen ales: Tempe a u a: Bloque de inyección: 195° Ho no: Inicial de 85°; a los 12 minu os p og amación con una elocidad de 10° po minu o has a alcanza 130' A enuación: 50 x 102 Gas po ado : Ni ógeno; l.ujo: 2ml/minu o. Velocidad de egis o: 5 mm/minu o. V.-ESPECTROSCOPIA INFRARROJA Hemos u ilizado un apa a o Pe kin-Elme modo 157; el acei e esencial se ha deposi ado en e células de clo u o sódico. RESULTADOS I.-INDICES Los índices usuales son conside ablemen e uni o mes al compa a en e sí las di e sas mues as analizadas. Además, los da os o'b enidos suelen en a de lleno en los má genes ad mi idos :po los au o es que han analizado esencias de espliego, como son el 432 M. MARTIN MESONERO ancés Fesneau (que abajó a ios años en España, en una indus ia de acei es esenciales), el conocido especialis a Guen he , el P o . Do onso o, en su me i o io abajó sob e esencias españolas y el a macognos a po u gués Fe nándes Cos a. Sin emba go 'es imamos con enien e hac·e algunas obse aciones es pec o a los esul ados ob enidos. Po ejemplo el pode o a o io, además de se algo más le ógi o de lo que suele ci a se en la bibliog a ía, nos o ece la ci cuns ancia de que la ac i idad óp ica ha a iado siemp e, pa iendo de 0°, hacia la izquie da, no habiendo encon ado ninguna mues a dex ógi a, como es usual en los da os de o os au o es. El índice de e acción iende a se lige ísimamen e in e io . Los da os e e en es a los es e es exp esados en ace a o de lin alilo , no p esen an di e encias supe i.o es a 0,2.4 en e un alo cualquie a y el que le s-igue o p ecede, excep o al alo co espondien e a la mues a p oceden e de Za agoza que, siendo el más ele' a:do, supe a al siguien e en casi 0,6. Al co eja nues os da os ·e e en es a alcoholes o ales con los ob enidos pa a és e es, es digno de señala que no exis e co elación alguna. II.-CROMATOGRAFIA EN PAPEL Dejamos es a écnica po que p on o demos a on los p ime os ensayos que no e a equipa able con la de capa ina en cuan o a la buena calidad die esul ados conseguidos con es a. Y además la c oma og a ía en papel aplicada a es e ipo de sus ancias no pola es, esul a mucho más di icul osa y mucho menos :pulc a. lII.-CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA Realizado un es udio compa a i o del pode eluy'en e de ases mó iles - an o mezclas como eac i os únicos- nos ha pe mi ido es ablece un ci men ando c i e io de se}ección aplicado a los ines p opues os en es e abajo. Las ases seleccionadas son: Hep ano/ Ace a o de e ilo (85/15) Clo o o mo/E e sul ú ico (100/2) Clo o o mo/ Alcohol e ilico 96° (100/2) Como e elado es, apa e del empleo cons an e de la luz ul a iole a an es y después d,e la pul�e iza.ción de cuaIquie 'e!lic i o de e elado, se ha sele cionado la ainillina alcohólica en medio sul ú ico. En ocasiones, según hemos comp obado, dá magní icos esul ados com bina la ainillina con el empleo p e io de apo es de yodo, pues al com- ARS PHARMACEUTICA 433 binación p oduce a iaciones de las onalidades en algunas manchas es pec o a las que p esen aban sin a amien o p e io. Ello cons i uYe un nue o c i e io di e encia i o adicional. La ep oduc ibilidad de lo.s esul ados de la C. C. F., ha sido ácil de demos a . Pe o además al conclusión es a i icada po el hecho indepen dien e de la cons ancia en e los c oma og amas ob enid<ls con las di e en es mues as de ·esencia de espliego es udiadas, pese a su o igen geog á ico dis in o. Cons ancia, o o a pa e, pa alela a la obse ada en los índices clásicoS'. Tal In a iabilidad no implica en absolu o al a de sensibilidad, como lo demues a la le e di e encia en la imagen c oma og á ica de la mues a p oceden e de Za 3Jgoza, que ambién se había di e enciado lige amen e en algún da o analí ico. La demos ada cons ancia en el compo amien o c oma og á ico en capa ina de las esencias de espliego, aún con l ua señala.d us a iaciones especí icas, da luga a una incues ionable di e encia en e las esencias e dade as Y las "esencias de espliego a i iciales" ( alsi icaciones come ciales) incluso cuando los pa ecidos en a omas Y en los índices ísicos Y químicos clásicos, son acep ables, El es udio minucioso Y sis emá ico de las imágenes c oma og á icas de las di e en es mues as de esencias de espliego españolas, compa a i amen e con las di e sas sus ancias pu as (componen es-pa ón), cuyo compo a mien o c oma og á ico ambién ha sido es udiado, nos ha pe mi ido es able ce o nega su p e.sencia en ellas. En las condiciones expe imen ales ·es ablecidas, median e el uso de sus ancias-pa ón pu as e inc emen ando la sensibilidad, pode di e encia i o Y o as cualidades median e nues o sis ema de doble e elado (iodo- aini llina) , se puede llega a la conclusión inicial de que en la.s esencias de esplie go, las dos manchas de mayo amaño que las es an es Y que apa ecen una as la o a, son de eucalip ol Y linalol espec i amen e. o a mancha am bién .pa en e aunque meno que las an e io es, a ece debe se a e pineol. La mancha co espondien e a la acción e pénica se ha accionado a su ez en es, que hemos iden i icad<l como Bpine .JK -pineno- y·can eno. Ope ando con silicagel luo escen e Y aplicando pos e io men e la luz U. V. hem()s podido de ec a o o componen e: el alcan o . Po úl imo, la mancha que dis ingue de las demás mues as de espliego, al de Za agoza, odo lle a a conclui que es de ace a o de lina.lilo. Obse emo.s qu·e a ales conclusiones nos lle an n() sólo los alo e.s R de las manchas apa .ecidas, idén ico.s a los de las sus ancias pu as espec i as, sino ambién la ci cuns ancia de las colo aciones idén icas en e cada una 434 M. MARTIN MESONERO de es as y aquellas as el e elado (gene almen e con la ainillina) y ambién cuando p e iamen e se a a on con iodo, pues es e se ija -aunque con di e en e in ensidad- en los compues os. no sa u ados (ace a o de linalilo, linalol, e pineol) y no lo hac,e en el eucalip ol, que ecob a el colo azul al e ela con ainillina. IV.-CROMATOGRAFIA EN FASE GASEOSA Los esul ados ob enidos po c oma og a ía en ase gaseosa, con i man y comple an lo que habíamos obse ado con las c oma og a ías en capa ina. En e ec o, el examen de los c oma og amas mues a: -que no exis en di e encias cuali a i as en e las dis in as esencias de espliego, sal o una le ísima ,en la mues a za agozana. ---que en 'el acei e esencial de espliego se encuen an los sIguien es com ponen es: ( -pineno, can eno, 3 -pineno, eucalip ol, linalol, alcan o , e pi neol, ace a o de e penilo (no iden i icado po C. C. F.) y ace a o de linalilo (sólo la mues a de Za agoza). Los análisis cuan i a i os ealizados po c oma og a ía gaseosa dan como componen es cla amen e mayo i a ios: linalol, eucalip ol, alcan o ; y den o de los mismos en o den dec ecien e, a excepción de los esenciales p oce den e de So ia, donde se obse a un cla o p edominio del eucalip ol sob e los o os dos. El o den de los componen es mino i a ios a ía en las dis in as mues a,s, siendo en odas el p ime o el e pineol. V.-ESPECTROSCOPIA INFRARROJA El es udio inicial de los espec os in a ojos de cada una de las mues as de esencia de e.spliego sólo pe mi e es ablece el espec og ama 1. R. pa a 18.'3 'esencias de e.spliego pu as, sin duda di e en e al de o as esencias. Sin em ba go no hemos de ec ado di e encias en e ellas, sal o -una ez más-, pa a la mues a de 'Za agoza. RESUMEN Y CONCLUSION GENERAL Es imamos que en el es udio de las esencias na u ales las más mode nas écnicas c oma og á icas en capa ina y ase gaseosa cons i uyen un magn1- ico complemen o de las écnicas analí icas clásicas en es e campo. Ello se ap ecia con me idiana cla idad en el p esen e es udio sob e esen cias de espliego españolas, pues las conclusiones ob enidas median e las écnicas aludidas no sólo se han complemen ado sino que o ecen en con- ARS PHARMACEUTICA 435 jun o g an cohe encia. En e ec o, se ob ienen esul ados comunes que o e cen p ecisamen e los pun os de pa ida en que se cimen an o as conclus�o nes especi icas apo adas aisladamen e po alguna de las écnicas emplea das. Po ej,emplo es á el caso p esen ado po la mues a de espliego p oce den e de Za agoza, en que el da o analí ico clásico de de e minación de és e es acusaba una di e encia ímidamen e señalada en algún o o índice ísico o químico; la c oma og a ía en capa ina y la c oma og a ía gaseosa sub aya on la apa en e anomalía -más la p ime a que la segunda- co o bo ándose después que en e ec o, dicha mues a con enía cIe a can idad de ace a o de linalilo. La C. C. F., es pa icula men e ú il en el aspec o cuali a i o de los com ponen es de la esencia. Nos a e emos a deci que en es e aspec o es más aconsejable su empleo que la C. G., ya que a su apidez une lo sencillo dje su ins umen al y el se mucho más ec·onómica que és a; en es e aspec o cuali a i o que emos pun ualiza que la imagen inal -el c oma og ama- posee en la C. C. F., una ue za plás ica, pues en ";ez de picos más o menos agudos se es udian manchas de amaño a iable y de onalidades di e en es pa a cada eac i o de e elado e incluso en e a uno mismo. La c oma og a ía gaseosa además de a i ica se mú uamen e con la de capa ina en lo cuali a i o, se mues a de g an u ilidad especialmen e en las conside aciones de ipo cuan i a i o de los componen es de ec ados. El p esen e es udio sob e esencias españolas de espliego, e e idas a las p .oceden es de las egiones de mayo p oducción, nos ha pe mi ido a i m u que los es componen es p incipales con di e encia no able sob e los demás son: linalol, eucalip ol y alcan o , y en e los es an es se han iden i icado ambién el e pineol, ac'e a o de e penilo, can eno, K �pineno, y 8 -pine no; en la únIca mues a p oc·eden e de Za agoza exis e además en can idad ap eciable ac·e a o de linalilo. Al oma en conside ación el in e esan e aspec o de la posible in luen cie ecológica, pal"e1ce que, desde el pun o de 'Vis a cuali a i' o dicha in luen cia es nula como lo demues a la homogeneidad de las imágenes c oma og á icas. Sin emba go, hay que admi i una excepción posi i a cual es la esencia de Za agoza, con su ace a o de linalilo que según dijimos no exis e en las demás. Na u almen e, es p eciso co obo a al pun o e.s u diando esencias de o as "campañas". Sin emba go, en lo cuan i a i o di cha in luencia ecológica se hace algo más pa en e: así, los es componen es mayo i a ios se si úan en o den dec ecien e linalol-;,eucalip ol> alcan o , 'excep o en las mues as de So ia en el que el o den es en es e sen ido: eu calip ol >linalol > alcan o ; po o a pa e es a iable el o den de los Que llamamos componen es mino i a ios.