Aplicaciones de la complexometría con Ca (II) a la determinación indirecta de grasa en almendras de algunos frutos

ARS PHARMACEUTICA RElVISTA DEl LA FACULTAD DE FARMACIA UNIVERSIDAD DE GRANADA Tomo XV -Núm. único Consejo de Redacción Director: Prof. Dr. D. Jesús Cabo Torres Director Ejecutivo: Prof. Dr. D. José Luis Val verde López VocaLes: Prof. Dr. D. Alber,to Ramos Cormenzana Prof. Dr. D. Aurelio Murillo Taravíllo Dr. D. Fermín Sánchez Medina Contreras Dr. D. Antonio Cerezo Galán de Red(tcciÓ'n: D. Lu i s Bravo Díaz Boquerón, 6 Granada 1974. 1.000 ejemplares De conformidad con lo preceptuado en el ar tículo 21 de la vigente Ley de Prensa e Impren ta, se hace pública la re lación de los Organos Rectores de esta revista. 1974 PAG. TRABAJOS ORIGINALES DE LA FACULTAD • Aplicaciones de la complexometría con Ca (JI) A la determinación in directa de grasa en almendras de algunos frutos, por R. García-VilIanova y M.a F. Olea ... ... ... ... 3 • Estudio espectrofotométrico y es pectrofluorométrico de la reacción de azúcares con el ácido cromo trópico en medio sulfúrico. JI. Comportamiento de las metil -pen tosas, por R. García-Villanova y O. Lorente ... ... ... ... ... ... ... 15 • Estudio espectrofotométrico de la reacción entre la vitamina C y el 2-6-dicloroindofenol, por R. Hernández (+) y F. Bosch ... ... ..... . 39 • Screening fitoquímico, por A. Hor tigüela Español ... ... ... ... ... ... 51 • Influencia de diferentes ácidos or gánicos y aminoácidos sobre la de terminación de succinato por la succinato deshidrogenasa de mito condria de hígado de rata, por J. M. Arias de Saavedra, E. GarcíaPeregrín e 1. Núñez de Castro 57 • Contribución al estudio conjunto de disgregación/disolución de compri midos, por J. Sánchez-Morcillo, A. Cerezo y F. AguiJar ... ...... ... 67 • La botica del convento de San Pa blo de Córdoba, y la visita de boti cas de religiosos, por J. L. Valverde y J. A. Pérez Romero... 95 TRABAJOS DE COLABORACION • Compuestos de fosfito de trialilo con iones metálicos de configura ción d8 por J. M. Suárez Cardeso y Ronald S. Nyholm 111 • Bibliografía 123 TRABAJOS ORIGINALES DE LA FACULTAD DEPARTAMENTO DE BROMATOLOGIA. TOXICOLOGIA y ANALISIS QUIMICO APLICADO ProL Dr. RAFAEL GARCIA-VILLANOVA APLICACIONES DE LA COMPLEXOMETRIA CON Ca (II) A LA DETERMINACION INDIRECTA DE GRASA EN ALMENDRAS DE ALGUNOS FRUTOS por R. GARCIA-VILLANOVA y M.a F. OLEA INTRODUCCION . Las técnicas analíticE's para la determinación de grasa indirec tamente empleando la volumetría complexométrica, vienen siendo desarrolladas por nosotros y nuestros colaboradores (1, 2, 3, 4 Y 5). En el trabajo presente se aplica la técnica ya conocida pero em pleando como catión precipitante el Ca (II) a la determinación indi recta de grasa en almendras de frutos. PARTE EXPERIMENTAL Fundamento del método.-Los glicéridos que constituyen la gra sa se hidrolizan con disolución hidro alcohólica de KOH y los anio nes de los ácidos grasos, se precipitan en condiciones adecuadas con Ca(II). Separado el precipitado por filtración, se determina el exce so de Ca(II), deduciéndose finalmeOlte el porcentaje de grasa del en sayo. Disoluciones empleadas Disolución de cloruro cálcico 0'05 M.- 5 g de carbonato cálcico puro, desecado a 1050 C se interponen en 50 mI de agua destilada y se agrega lentamente ClH concentrado hasta total disolución, prote giendo con un vidrio de reloj las pérdidas ocasionales. Fría la diso lución se completa con agua destilada hasta 1000 mI. Ars Pharmacéuticct. Tomo XV. Núm. Unico. 1974. 4 R. GARC.IA-VILL�NOVA y M.a. F. OLEA Disolución de EDTA 0'05 M.- 18'61 g de EDTA desecados a 70° e se disuelven en agua destilada hasta 1000 mI. Se titula partiendo de 50 mI de la disolución anterior de cloruro cálcico, diluyendo con unos 50 mI de agua destilada en un matraz erlenmeyer de 250 mI, Se añaden unos 10 mI de disolución de hidróxido potásico aproxima damente 1 N y una punta de espátula de murexida como indicador. Se valora el EDTA desde la bureta, hasta viraje al color violeta. Disolución dee timolftaleina.- 0'1 g de timolftaleina se disuelve en 100 mI de alcohol de 75°. Murexida indicador.- 0,2 g de murexida se mezcla bien en un mortero con 100 g de cloruro sódico puro desecado y pulverizado. Disolución de hidróxido potásico 1 N aproximada.- 56 g de hi dróxido potásico se disuelven en agua destilada hasta 1000 mI. Disolución de ácido nítrico al 10%.- 100 mI de ácido nítrico con centrado se diluyen hasta 1000 mI con agua destilada. Disolución de potasa alcohólica al 8%.- 3'2 g de hidróxido po tásico en lentejas, se disuelven en 3'2 mI de agua destilada y se com pleta hasta 40 mI con alcohol etílico de 96-98°. Se debe preparar extemporáneamente. Etanol de 40°.-420 mI de etanol de 96° se completan con agua destilada hasta 1000 mI. METODO GENERAL En un matraz de fondo plano de 250 mI, se pesa la cantidad de muestra que se indicará para cada uno de los ensayos, saponificando con 40 mI (en el caso de las almendras de ciruela poner 80 ml) de disolución alcohólica al 8% de hidróxido potásico, hirviendo a reflu jo durante unos 30 minutos. La disolución anterioc, que contiene los ácidos grasos que cons tituyen los glicéridos de la grasa de las almendras de los frutos al estado de sus sales potásicas, se filtra a través de un filtro de plie gues, en un matraz aforado de 500 mI, (excepto en la almendra de ciruela que se lleva a un matraz de 250 mI), lavando el matraz y residuo con 40 mI de alcohol de 40° y completando con agua desti lada hasta el enrase. 50 mI de la disolución anterior que deben corresponderse con 0'5 g de grasa aproximadamente, se colocan en un vaso de precipitados de 250 mI, se neutralizan con disolución de ácido nítrico aproxima- ARS PHARMACEUTICA 5 damente 1 M, en presencia de 4' gotas de disolución de timolftaleina (evitándose así la adsorción de Ca(II) por el precipitado a ese pH) y se agregan 25 mI de disolución de cloruro cálcico 0'05 M lentamente en agitación continua, dejando reposar el precipitado unos 15 minu tos, filtrando a través de un filtro de pliegues, lavando dos veces con unos 50 mI de agua destilada cada vez y recogiendo el filtrado en un matraz erlenmeyer de 250 mI. Se agregan unos 5 ml de disolución de hidróxido potásico apro ximadamente 1 M, una punta de espátula de indicador murexida y se titula con EDTA 0'05 M hasta viraje. Cálculos.-De acuerdo con la composición de los ácidos grasos que constituyen los glicéridos de la grasa de cada una de estas al mendras, se calcula el peso molecular medio de los ácidos grasos que contienen y el peso rr.olecular medio de los glicéridos. La reacción de hidrolisis practicada se puede esquematizar: CH20H I I CH -OOC -R + 3 OH -• CHOH + 3R -COO - � ---- I CH20H Los aniones de los ácidos gn::sos (R-COO-) liberados en la hidro lisis, precipitarán con un exceso de disolución titulada de Ca(II), se gún la reacción: 2R -COO- + Ca2+ � ---. R -COO "-Ca R -coo / Por tanto, de acuerdo con los esquemas expuestos, 1 mol de Ca (l!) reacciona con 2/3 de mol del correspondiente triglicérido. La diferencia entre los mI de Ca(II) 0'05 M agregados y los mI de EDTA 0'05 M gastados, multiplicados por el factor correspondien te en cada caso, dará la riqueza en grasa de cada ensayo individual Por corresponderse: 6 R. GARCIA-VILLANOVA y M.O F. OLEA 1 mI de 0'05 M de Ca(II) con 2 X peso mol. medio glicéridos X 0'05 g del triglicérido 3 X 1000 En la TABLA 1 se consignan los resultados encontrados al apli car el método a una de las muestras de almendras de ciruelas, prac ticando el hidrolizado en la muestra finamente pulverizada y pesan do 10 g para el ensayo. Teniendo en cuenta la composición de los ácidos grasos que cons tituyen los glicéridos de la grasa de ciruelas % P.M. Acido oléico 87'5 282'46 Acido linoléico 11 280'44 Acido esteárico 1'5 284'47 El peso molecular medio de los ácidos grasos es 281'5 y el peso molecular medio de los glicéridos es 885'5, de aquí se deduce que el factor para la determinación de la riqueza grasa de la almendra de ciruela es 0'0295. Para comparar los resultados se han practicado tres determina ciones de la grasa por el método Soxhlet. l.a Determinación 2.� Determinación 3." Determinación Media % de grasa -Método de Soxhloet 28'79 28'45 28'55 28'59 Ensayo núm. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 ARS PHARMACEUTICA TABLA 1 EDTA 0'05 M ml Grasa hallada Grasa Soxhlet g % g % 5'0 29'25 5'2 28'95 5'1 29'10 5'0 29'25 5'2 28'95 5'1 29'10 5'1 29'10 5'2 28'95 5'0 29'25 5'1 29'10 5'1 29'10 1 x = 56'1 x = 5'1 1 (x -x)2 = 0,05 Varianza = 0'006 . Desviación típica (]" = 0'2 28'59 28'59 28'59 28'59 28'59 28'59 28'59 28'59 28'59 28'59 28'59 Error medio del resultado = ± 0'07 7 Diferencia en el porcentaje 0'66 0'36 0'51 0'66 0'36 0'51 0'51 0'36 0'66 0'51 0'51 En la TABLA JI se consignan los resultados encontrados al apli car el método a una de las muestras de almendras de albaricoque practicando el método del mismo modo y pesando 14 gramos para hidro liza do. . . La composición de la grasa de estas almendras es igual a la de ciruelas. Los valores obtenidos por el método Soxhlet son: % nA grasa -Método de Soxhlet l.a Determinación 2: Determinación 3.a Determinación Media28'74 28'95 28'68 28'79 8 Ensayo núm, 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 R, GARClA-VILLANOV!I. y M,a F. OLEA TABLA II EDTA 0'05 M Grasa hailada Grasa Soxhlet Diferencia en el mI g % g % porcentaje 11'3 28'62 28'79 -0'17 10'8 29'04 28'79 0'25 11'4 28'41 28'79 -0'38 11'5 28'20 28'79 -0'59 11'0 29'25 28'79 0'46 11'1 29'04 28'79 0'25 11'0 29'25 28'79 0'46 11'1 29'04 28'79 0'25 11'4 28'41 28'79 -0'38 11'2 28'83 28'79 0'04 11'2 28'83 28'79 0'04 ¡ X = 123 x 11'18 ¡ (x -x)2 0'44 Varianza = 0'044 Desviación típica (T 0'20 Error medio del resultado ± 0'02 En la TABLA IU se indican los resultados obtenidos trabajando con piñones y siguiendo el mismo criterio anterior. Se pesan 10 g de piñones finamente pulverizados. La composición de la grasa de los piñones es: % Peso Molecular Acido Oléico 82'22 282'46 Acido Palmítico 1'85 256'42 Acido Esteárico 1'25 284'47 Acido Araquídico 1'75 312'52 Acido Linoléico 10'00 280'44 Acido Mirístico 0'1 227'38 ARS PHARMACEUTICA 9 El Peso Molecular medio de los ácidos grasos es 272'27 y por tanto el peso molecular medio de los glicéridos será 857'60. El fac tor correspondiente es de 0'0286. Los valores obtenidos por el método Soxhlet son: % de grasa -Método de Soxhlet La Determinación 2." Determinación 3." Determinación 46'64 46'70 46'99 Ensayo núm. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Media EDTA 0'05 M ml 8'3 8'4 8'3 8'4 8'3 8'4 8'4 8'4 8'4 8'3 8'4 ¡ x 46'77 TABLA III Grasa hallada g % 47'76 47'47 47'76 47'47 47'76 47'47 47'47 47'47 47'47 47'76 47'47 = 92 Grasa Soxhlet g % 46'77 46'77 46'77 46'77 46'77 46'77 46'77 46'77 46'77 46'77 46'77 x 8'36 ¡ (x -x)2 = 0'0256 Varianza = 0'00256 Desviación típica (J" = 0'05 Diferencia en el porcentaje 0'99 0'70 0'99 0'70 0'99 0'70 0'70 0'70 0'70 0'99 0'70 Error medio del resultado = ± 0'011 En la TABLA IV se indica la determinación de la grasa en ave llanas, pesando para el hidrolizado 8 g finamente pulverizadas. La composición de los glicéridos de esta grasa es la misma que la de los piñones. 10 R. GARCIA-VILL'\.NOVA y M.a F. OLEA Los valores obtenidos en % de grasa por el método Soxhlet son: 1.'" Determinación 2." Determinación 3." Determinación Media % de grasa -Método de Soxhlet 57'62 56'94 56'85 57'13 TABLA IV Ensayo núm. EDTA 0'05 M Grasa hallada ml g % Grasa Soxhlet . Diferencia en el g % porcentaje 1 9'0 57'20 57'13 0'07 2 9'2 56'48 57'13 -0'65 3 9'1 56'84 57'13 -0'29 4 9'0 57'20 57'13 0'07 5 9'0 57'20 57'13 0'07 6 9'0 57'20 57'13 0'07 7 9'1 56'84 57'13 -0'29 8 9'1 56'84 57'13 -0'29 9 9'0 57'20 57'13 0'07 10 9'1 56'84 57'13 -0'29 11 9'0 57'20 57'13 0'07 � x = 99'6 ..., x = 9'05 ¡ (x -51)2 = 0'0475 Varianza 0'00475 Desviación típica cr = 0'064 Error medio del resultado = ± 0'020 La TABLA V, corresponde a la determinación de grasa en al mendras, se pesan 9 g de almendras finamente pulverizadas para el hidrolizado. La composición de la grasa es la misma que en las almendras de ciruelas. Los valores expresados en ro, obtenidos por el método Soxhlet son: